核糖核苷酸還原酶M2（ribonucleotide reductase, RRM2）在多種癌癥組織中高表達(dá),這與腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移及腫瘤血管形成等生物學(xué)行為密切相關(guān)。目前,關(guān)于以RRM2為靶點(diǎn)治療宮頸癌的研究并不多,其對(duì)宮頸癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響及機(jī)制也尚未明確。本研究采用RNA干擾技術(shù)下調(diào)RRM2,以人宮頸癌細(xì)胞株CaSki和HeLa細(xì)胞為研究對(duì)象,實(shí)驗(yàn)分為Ctrl-siRNA組和RRM2-siRNA組。通過RT-PCR和Western印跡檢測(cè)RRM2-siRNA的干擾作用,采用CCK-8和EDU實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖和DNA合成的情況,通過劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞的遷移和侵襲能力,并用Western印跡檢測(cè)NF-κB和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9, MMP-9）蛋白質(zhì)表達(dá)水平。結(jié)果顯示,在CaSki和HeLa細(xì)胞中,RRM2-siRNA組RRM2的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)較Ctrl-siRNA組均下降（P<0.05）,表明RRM2-siRNA能有效抑制RRM2的表達(dá)。與Ctrl-siRNA組相比,RRM... 

【文章來源】：中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2020,36(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 CCK-8檢測(cè)
    1.5 EDU分析
    1.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
    1.7 Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.8 Real-time PCR檢測(cè)mRNA水平
    1.9 Western印跡檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)
    1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 RRM2-siRNA抑制人宮頸癌細(xì)胞中RRM2基因表達(dá)
    2.2 核糖核苷酸還原酶M2下調(diào)抑制人宮頸癌細(xì)胞的增殖能力和DNA合成
    2.3 核糖核苷酸還原酶M2下調(diào)抑制人宮頸癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力
    2.4 核糖核苷酸還原酶M2下調(diào)抑制NF-κB和MMP-9蛋白質(zhì)表達(dá)
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