miR-365通過靶向ELF4抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖及其臨床意義
發(fā)布時(shí)間:2021-09-01 11:10
目的 探討微小RNA-365(miR-365)和E74樣受體4(ELF4)在宮頸癌中的表達(dá)、作用和臨床意義,驗(yàn)證miR-365直接靶向調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子ELF4基因的表達(dá),分析宮頸癌患者組織中miR-365和ELF4mRNA的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。方法 選取2014年7月至2017年1月在唐山工人醫(yī)院行宮頸活檢及手術(shù)治療的病例,臨床資料完整,且術(shù)前并未接受過放化療的病例,共135例,其中行全子宮切除的良性病變正常宮頸34例,宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)68例(其中CINⅠ31例、CINⅡ-Ⅲ37例),術(shù)后病理回報(bào)為宮頸鱗癌33例,嚴(yán)格按照標(biāo)本的納入及排除標(biāo)準(zhǔn),所取標(biāo)本均經(jīng)本院病理科主任醫(yī)師證實(shí)。采用實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)方法檢測(cè)miR-365在正常宮頸組織(n=34)、宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)(CINⅠ)(n=31)、宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ-Ⅲ級(jí)(CINⅡ-Ⅲ)(n=37)和宮頸鱗癌組織(SCC)(n=33)以及三種宮頸癌細(xì)胞系(C33A細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、SiHa細(xì)胞)中的表達(dá);生物信息學(xué)預(yù)測(cè)和熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)驗(yàn)證miR-365與ELF4的3’UTR區(qū)域存在相互作用,初步分析miR-36...
【文章來源】:華北理工大學(xué)河北省
【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Westernblot結(jié)果顯示,與正常宮頸上皮細(xì)胞相比,在三種宮頸癌細(xì)胞中,ELF4的蛋
為了研究 miR-365 對(duì)宮頸癌增殖功能的影響,我們進(jìn)行了 CCK-8 實(shí)驗(yàn),分析結(jié)果顯示,在三種宮頸癌細(xì)胞中,與轉(zhuǎn)染 NC mimic 組比較,miR-365 mimic 組的OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均降低(SiHa:48 ht=5.212,48 hP=0.039;72 ht=6.958,72 hP=0.024;96 ht=7.045,96 hP=0.017; C33A:48 ht=0.986,48 hP=0.046;72 ht=6.378,72 hP=0.022;96 ht=7.545,96 hP=0.015; HeLa:48 ht=5.833,48 hP=0.035;72 ht=6.256,72 hP=0.028;96 ht=6.477,96hP=0.022);相反,與轉(zhuǎn)染 NC inhibitor 組比較,miR-365 inhibitor 組三種細(xì)胞株的 OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均升高(SiHa:48ht=0.988,48 hP=0.043;72 ht=1.163,72 hP=0.037;96 ht=1.886,96 hP=0.020;C33A:48 ht=0.973,48 hP=0.044;72 ht=1.412,72 hP=0.034;96 ht=7.215,96 hP=0.014;HeLa:48 ht=1.447,48 hP=0.032;72 ht=1.856,72 hP=0.021;96 ht=9.869,96 hP=0.011)。提示 miR-365 具有抑制腫瘤增殖作用,而 miR-365 表達(dá)的下調(diào)促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖。
第 1 章 實(shí)驗(yàn)研究1.4.7 臨床分析顯示 miR-365 和 ELF4 mRNA 的表達(dá)均與腫瘤大小、腫瘤病理分級(jí)及臨床分期相關(guān)在正常組(Normal)、CINⅠ組、CINⅡ-Ⅲ組及宮頸鱗癌組(SCC)miR-365與 ELF4 mRNA 表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析,將 miR-365 及 ELF4 mRNA 在宮頸鱗癌中表達(dá)情況分為低表達(dá)組及高表達(dá)組,并對(duì)臨床病理參數(shù)進(jìn)行分析。結(jié)果表明,在Normal 組和 CINⅠ組,miR-365 與 ELF4 mRNA 表達(dá)無相關(guān)性(r=0.227,P=0.285;r=-0.073,P=0.752),而在 CINⅡ-Ⅲ組及宮頸癌組(SCC),兩者間表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rA=-0.351,PA=0.045;rB=-0.349,PB=0.035),同時(shí),進(jìn)一步臨床病理參數(shù)分析表明,miR-365 和 ELF4 mRNA 的表達(dá)水平均與腫瘤大小、腫瘤病理分級(jí)及臨床分期相關(guān)(見表 8 和表 9,均 P<0.05),而與年齡無關(guān)[31-32]。以上結(jié)果表明,miR-365 在宮頸高級(jí)別病變中及腫瘤組織中是通過靶向調(diào)控下游 ELF4 的表達(dá)調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖,而在正常組織和低級(jí)別宮頸病變中兩者無相關(guān)性。
本文編號(hào):3376873
【文章來源】:華北理工大學(xué)河北省
【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Westernblot結(jié)果顯示,與正常宮頸上皮細(xì)胞相比,在三種宮頸癌細(xì)胞中,ELF4的蛋
為了研究 miR-365 對(duì)宮頸癌增殖功能的影響,我們進(jìn)行了 CCK-8 實(shí)驗(yàn),分析結(jié)果顯示,在三種宮頸癌細(xì)胞中,與轉(zhuǎn)染 NC mimic 組比較,miR-365 mimic 組的OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均降低(SiHa:48 ht=5.212,48 hP=0.039;72 ht=6.958,72 hP=0.024;96 ht=7.045,96 hP=0.017; C33A:48 ht=0.986,48 hP=0.046;72 ht=6.378,72 hP=0.022;96 ht=7.545,96 hP=0.015; HeLa:48 ht=5.833,48 hP=0.035;72 ht=6.256,72 hP=0.028;96 ht=6.477,96hP=0.022);相反,與轉(zhuǎn)染 NC inhibitor 組比較,miR-365 inhibitor 組三種細(xì)胞株的 OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均升高(SiHa:48ht=0.988,48 hP=0.043;72 ht=1.163,72 hP=0.037;96 ht=1.886,96 hP=0.020;C33A:48 ht=0.973,48 hP=0.044;72 ht=1.412,72 hP=0.034;96 ht=7.215,96 hP=0.014;HeLa:48 ht=1.447,48 hP=0.032;72 ht=1.856,72 hP=0.021;96 ht=9.869,96 hP=0.011)。提示 miR-365 具有抑制腫瘤增殖作用,而 miR-365 表達(dá)的下調(diào)促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖。
第 1 章 實(shí)驗(yàn)研究1.4.7 臨床分析顯示 miR-365 和 ELF4 mRNA 的表達(dá)均與腫瘤大小、腫瘤病理分級(jí)及臨床分期相關(guān)在正常組(Normal)、CINⅠ組、CINⅡ-Ⅲ組及宮頸鱗癌組(SCC)miR-365與 ELF4 mRNA 表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析,將 miR-365 及 ELF4 mRNA 在宮頸鱗癌中表達(dá)情況分為低表達(dá)組及高表達(dá)組,并對(duì)臨床病理參數(shù)進(jìn)行分析。結(jié)果表明,在Normal 組和 CINⅠ組,miR-365 與 ELF4 mRNA 表達(dá)無相關(guān)性(r=0.227,P=0.285;r=-0.073,P=0.752),而在 CINⅡ-Ⅲ組及宮頸癌組(SCC),兩者間表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rA=-0.351,PA=0.045;rB=-0.349,PB=0.035),同時(shí),進(jìn)一步臨床病理參數(shù)分析表明,miR-365 和 ELF4 mRNA 的表達(dá)水平均與腫瘤大小、腫瘤病理分級(jí)及臨床分期相關(guān)(見表 8 和表 9,均 P<0.05),而與年齡無關(guān)[31-32]。以上結(jié)果表明,miR-365 在宮頸高級(jí)別病變中及腫瘤組織中是通過靶向調(diào)控下游 ELF4 的表達(dá)調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖,而在正常組織和低級(jí)別宮頸病變中兩者無相關(guān)性。
本文編號(hào):3376873
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