目的 探討微小RNA-365（miR-365）和E74樣受體4（ELF4）在宮頸癌中的表達、作用和臨床意義,驗證miR-365直接靶向調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子ELF4基因的表達,分析宮頸癌患者組織中miR-365和ELF4mRNA的表達與臨床病理特征的關(guān)系。方法 選取2014年7月至2017年1月在唐山工人醫(yī)院行宮頸活檢及手術(shù)治療的病例,臨床資料完整,且術(shù)前并未接受過放化療的病例,共135例,其中行全子宮切除的良性病變正常宮頸34例,宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）68例（其中CINⅠ31例、CINⅡ-Ⅲ37例）,術(shù)后病理回報為宮頸鱗癌33例,嚴格按照標本的納入及排除標準,所取標本均經(jīng)本院病理科主任醫(yī)師證實。采用實時定量PCR（RT-qPCR）方法檢測miR-365在正常宮頸組織（n=34）、宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級（CINⅠ）（n=31）、宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ-Ⅲ級（CINⅡ-Ⅲ）（n=37）和宮頸鱗癌組織（SCC）（n=33）以及三種宮頸癌細胞系（C33A細胞、HeLa細胞、SiHa細胞）中的表達;生物信息學(xué)預(yù)測和熒光素酶報告基因檢測驗證miR-365與ELF4的3’UTR區(qū)域存在相互作用,初步分析miR-36... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblot結(jié)果顯示，與正常宮頸上皮細胞相比，在三種宮頸癌細胞中，ELF4的蛋

為了研究 miR-365 對宮頸癌增殖功能的影響，我們進行了 CCK-8 實驗，分析結(jié)果顯示，在三種宮頸癌細胞中，與轉(zhuǎn)染 NC mimic 組比較，miR-365 mimic 組的OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均降低（SiHa：48 ht=5.212，48 hP=0.039；72 ht=6.958，72 hP=0.024；96 ht=7.045，96 hP=0.017； C33A：48 ht=0.986，48 hP=0.046；72 ht=6.378，72 hP=0.022；96 ht=7.545，96 hP=0.015； HeLa：48 ht=5.833，48 hP=0.035；72 ht=6.256，72 hP=0.028；96 ht=6.477，96hP=0.022）；相反，與轉(zhuǎn)染 NC inhibitor 組比較，miR-365 inhibitor 組三種細胞株的 OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均升高（SiHa：48ht=0.988，48 hP=0.043；72 ht=1.163，72 hP=0.037；96 ht=1.886，96 hP=0.020；C33A：48 ht=0.973，48 hP=0.044；72 ht=1.412，72 hP=0.034；96 ht=7.215，96 hP=0.014；HeLa：48 ht=1.447，48 hP=0.032；72 ht=1.856，72 hP=0.021；96 ht=9.869，96 hP=0.011）。提示 miR-365 具有抑制腫瘤增殖作用，而 miR-365 表達的下調(diào)促進宮頸癌細胞的增殖。

第 1 章 實驗研究1.4.7 臨床分析顯示 miR-365 和 ELF4 mRNA 的表達均與腫瘤大小、腫瘤病理分級及臨床分期相關(guān)在正常組（Normal）、CINⅠ組、CINⅡ-Ⅲ組及宮頸鱗癌組（SCC）miR-365與 ELF4 mRNA 表達進行相關(guān)性分析，將 miR-365 及 ELF4 mRNA 在宮頸鱗癌中表達情況分為低表達組及高表達組，并對臨床病理參數(shù)進行分析。結(jié)果表明，在Normal 組和 CINⅠ組，miR-365 與 ELF4 mRNA 表達無相關(guān)性（r=0.227，P=0.285；r=-0.073，P=0.752），而在 CINⅡ-Ⅲ組及宮頸癌組（SCC），兩者間表達呈負相關(guān)（rA=-0.351，PA=0.045；rB=-0.349，PB=0.035），同時，進一步臨床病理參數(shù)分析表明，miR-365 和 ELF4 mRNA 的表達水平均與腫瘤大小、腫瘤病理分級及臨床分期相關(guān)（見表 8 和表 9，均 P＜0.05），而與年齡無關(guān)[31-32]。以上結(jié)果表明，miR-365 在宮頸高級別病變中及腫瘤組織中是通過靶向調(diào)控下游 ELF4 的表達調(diào)控腫瘤細胞的增殖，而在正常組織和低級別宮頸病變中兩者無相關(guān)性。


本文編號：3376873