miR-124對宮頸癌放射敏感性的影響及其機制研究
發(fā)布時間：2021-08-26 03:06
目的:研究miR-124對宮頸癌細胞放射敏感性的影響,并探索其潛在的作用機制。方法:qRT-PCR法檢測宮頸癌癌組織和癌旁正常組織,以及宮頸癌細胞系和正常宮頸細胞系中miR-124的表達水平。利用生物信息學技術(shù)預(yù)測miR-124可能的靶基因,并通過雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞C。再通過qRT-PCR和Western Blot實驗檢測miR-124對該靶基因的mRNA、蛋白表達的影響。免疫組化檢測宮頸癌癌組織和癌旁正常組織中該靶基因的表達。將人宮頸腺癌Hela和鱗癌Siha細胞分別分為三組,一組轉(zhuǎn)染miR-124 mimics,一組轉(zhuǎn)染陰性對照,一組轉(zhuǎn)染miR-124 inhibitor。qRT-PCR法檢測各組細胞miR-124和STAT3的表達。通過CCK-8實驗檢測miR-124異常表達對細胞增殖能力的影響,細胞劃痕實驗檢測miR-124異常表達對細胞遷移能力的影響,細胞周期實驗檢測miR-124異常表達對細胞周期的影響。每組細胞經(jīng)相同劑量放射線處理后,通過克隆形成實驗、Annexin V/PI流式細胞凋亡實驗、Hoechst 33258細胞核染色實驗等,檢測miR-124對宮頸癌細胞...
【文章來源】：蚌埠醫(yī)學院安徽省
【文章頁數(shù)】：65 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
miR-124與STAT3的結(jié)合位點
qRT-PCR檢測miR-124的表達
圖 4 Hela 細胞中 miR-124 的直接靶基因檢測A、雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?B、qRT-PCR 結(jié)果 C、Western Blot 結(jié)果3.2. Siha 細胞中 miR-124 靶基因的鑒定如圖 5A 所示，與 STAT3-3'UTR-wild 共轉(zhuǎn)染的 miR-124 mimics 轉(zhuǎn)染組和control 組細胞 RLU 值分別為 0.996±0.115、0.505±0.065，miR-124 可靶向抑制 STAT3-3'UTR-wild 表達（t＝6.446，P＝0.003）。而與 STAT3-3'UTR-mut 共轉(zhuǎn)染的 miR-124 mimics 轉(zhuǎn)染組和 control 組細胞 RLU 值分別為 0.982±0.064、0.949±0.066，差異無統(tǒng)計學意義（t＝0.623，P＞0.05）。圖 5B 顯示，相對于control 組，miR-124 mimics 轉(zhuǎn)染組細胞 STAT3 的 mRNA 表達水平明顯降低（t＝11.152，P＜0.001），而 miR-124 inhibitor 轉(zhuǎn)染組細胞 STAT3 的 mRNA 表達水平明顯升高（t＝-13.613，P＜0.001），且在 WesternBlot 實驗中也得到類似結(jié)果，見圖 5C。這些結(jié)果均顯示，STAT3 是 Siha 細胞中 miR-124 的直接靶基因，miR-
【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-124對宮頸癌Hela細胞放射敏感性的影響及其機制探討[J]. 王夢潔,孟碧,高飛,李皓,葉婷,劉陽晨. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2018(06)
[2]轉(zhuǎn)染miR-124模擬物的宮頸癌細胞株Siha放射敏感性變化及其機制探討[J]. 王夢潔,孟碧,李皓,高飛,葉婷,劉陽晨. 山東醫(yī)藥. 2017(35)
[3]微小RNA與宮頸癌放療敏感性的研究進展[J]. 王夢潔,劉陽晨. 癌癥進展. 2016(09)
[4]微RNA-375通過抑制YAP基因表達調(diào)控CIK細胞對宮頸癌SiHa細胞的體外殺傷效應(yīng)[J]. 李錦行,譚雪瑩,張萍. 腫瘤. 2016(01)
[5]miRNA在腫瘤放療敏感性中的作用及機制[J]. 張玉虹,李皓,劉陽晨. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2016(02)
[6]microRNA-218對宮頸癌細胞增殖和遷移的影響[J]. 劉珍,張蔚,胡曉霞,藍嬌,肖瑞平,陳璐璐,王琳琳. 中華腫瘤防治雜志. 2015(20)
[7]MiR-18a通過靶定ATM調(diào)節(jié)白血病細胞HL-60對VP-16和VCR化療敏感性[J]. 肖悅,胡蓉. 中國實驗血液學雜志. 2015(04)
[8]腫瘤放射敏感性影響因素的研究進展[J]. 尹麗,朱廣迎. 中華腫瘤防治雜志. 2012(08)
[9]腫瘤細胞放射敏感性與放射誘導(dǎo)凋亡關(guān)系的研究[J]. 鐘軍,熊戴群,羅輝,陳文學. 實用癌癥雜志. 2007(06)
博士論文
[1]第一部分：中晚期宮頸鱗狀細胞癌同步放化療敏感性相關(guān)血清microRNA的初步研究第二部分：早期宮頸神經(jīng)內(nèi)分泌癌32例臨床分析[D]. 王子毅.北京協(xié)和醫(yī)學院 2015
[2]中晚期宮頸鱗狀細胞癌同步放化療敏感性相關(guān)microRNAs的初步研究[D]. 胡金龍.北京協(xié)和醫(yī)學院 2012
本文編號：3363417
【文章來源】：蚌埠醫(yī)學院安徽省
【文章頁數(shù)】：65 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
miR-124與STAT3的結(jié)合位點
qRT-PCR檢測miR-124的表達
圖 4 Hela 細胞中 miR-124 的直接靶基因檢測A、雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?B、qRT-PCR 結(jié)果 C、Western Blot 結(jié)果3.2. Siha 細胞中 miR-124 靶基因的鑒定如圖 5A 所示，與 STAT3-3'UTR-wild 共轉(zhuǎn)染的 miR-124 mimics 轉(zhuǎn)染組和control 組細胞 RLU 值分別為 0.996±0.115、0.505±0.065，miR-124 可靶向抑制 STAT3-3'UTR-wild 表達（t＝6.446，P＝0.003）。而與 STAT3-3'UTR-mut 共轉(zhuǎn)染的 miR-124 mimics 轉(zhuǎn)染組和 control 組細胞 RLU 值分別為 0.982±0.064、0.949±0.066，差異無統(tǒng)計學意義（t＝0.623，P＞0.05）。圖 5B 顯示，相對于control 組，miR-124 mimics 轉(zhuǎn)染組細胞 STAT3 的 mRNA 表達水平明顯降低（t＝11.152，P＜0.001），而 miR-124 inhibitor 轉(zhuǎn)染組細胞 STAT3 的 mRNA 表達水平明顯升高（t＝-13.613，P＜0.001），且在 WesternBlot 實驗中也得到類似結(jié)果，見圖 5C。這些結(jié)果均顯示，STAT3 是 Siha 細胞中 miR-124 的直接靶基因，miR-
【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-124對宮頸癌Hela細胞放射敏感性的影響及其機制探討[J]. 王夢潔,孟碧,高飛,李皓,葉婷,劉陽晨. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2018(06)
[2]轉(zhuǎn)染miR-124模擬物的宮頸癌細胞株Siha放射敏感性變化及其機制探討[J]. 王夢潔,孟碧,李皓,高飛,葉婷,劉陽晨. 山東醫(yī)藥. 2017(35)
[3]微小RNA與宮頸癌放療敏感性的研究進展[J]. 王夢潔,劉陽晨. 癌癥進展. 2016(09)
[4]微RNA-375通過抑制YAP基因表達調(diào)控CIK細胞對宮頸癌SiHa細胞的體外殺傷效應(yīng)[J]. 李錦行,譚雪瑩,張萍. 腫瘤. 2016(01)
[5]miRNA在腫瘤放療敏感性中的作用及機制[J]. 張玉虹,李皓,劉陽晨. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2016(02)
[6]microRNA-218對宮頸癌細胞增殖和遷移的影響[J]. 劉珍,張蔚,胡曉霞,藍嬌,肖瑞平,陳璐璐,王琳琳. 中華腫瘤防治雜志. 2015(20)
[7]MiR-18a通過靶定ATM調(diào)節(jié)白血病細胞HL-60對VP-16和VCR化療敏感性[J]. 肖悅,胡蓉. 中國實驗血液學雜志. 2015(04)
[8]腫瘤放射敏感性影響因素的研究進展[J]. 尹麗,朱廣迎. 中華腫瘤防治雜志. 2012(08)
[9]腫瘤細胞放射敏感性與放射誘導(dǎo)凋亡關(guān)系的研究[J]. 鐘軍,熊戴群,羅輝,陳文學. 實用癌癥雜志. 2007(06)
博士論文
[1]第一部分：中晚期宮頸鱗狀細胞癌同步放化療敏感性相關(guān)血清microRNA的初步研究第二部分：早期宮頸神經(jīng)內(nèi)分泌癌32例臨床分析[D]. 王子毅.北京協(xié)和醫(yī)學院 2015
[2]中晚期宮頸鱗狀細胞癌同步放化療敏感性相關(guān)microRNAs的初步研究[D]. 胡金龍.北京協(xié)和醫(yī)學院 2012
本文編號：3363417
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