目的:采用不同質(zhì)量濃度的超順磁性氧化鐵-短發(fā)夾RNA（superparamagnetic iron oxide-short hairpin RNA,SPIO-ShRNA）分子探針轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV3細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),檢測細(xì)胞的生物學(xué)行為,尋找最佳的轉(zhuǎn)染濃度。方法:將鐵濃度分別為5、15、30、45、75、100 mg/L的探針轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞后,采用熒光倒置顯微鏡觀察探針進(jìn)入細(xì)胞情況,普魯士藍(lán)染色及透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒,原子吸收光譜儀法測定細(xì)胞內(nèi)鐵含量,cell counting kit-8（CCK-8）檢測細(xì)胞活性,流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞凋亡,Western blot檢測細(xì)胞內(nèi)表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）蛋白的表達(dá),磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）檢測細(xì)胞內(nèi)信號強(qiáng)度變化。結(jié)果:在5³0 mg/L鐵濃度范圍內(nèi),細(xì)胞攝取量隨探針鐵質(zhì)量濃度增加而增大,當(dāng)探針鐵濃度為45 mg/L時(shí),進(jìn)入細(xì)胞達(dá)到飽和,標(biāo)記率接近100%;細(xì)胞活性隨探針質(zhì)量濃度的增加... 

【文章來源】：北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015,47(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1主要實(shí)驗(yàn)材料及儀器
    1.2探針轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞
    1.3熒光倒置顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染細(xì)胞
    1.4普魯士藍(lán)染色
    1.5細(xì)胞內(nèi)鐵含量的測定
    1.6透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒及細(xì)胞形態(tài)
    1.7細(xì)胞活性的檢測
    1.8細(xì)胞凋亡的檢測
    1. 9 EGFR蛋白表達(dá)檢測
    1. 10體外MRI掃描
    1. 11統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2結(jié)果
    2. 1熒光倒置顯微鏡觀察結(jié)果
    2. 2普魯士藍(lán)染色結(jié)果
    2. 3細(xì)胞內(nèi)含鐵量測定結(jié)果
    2. 4透射電鏡觀察結(jié)果
    2. 5細(xì)胞活性檢測結(jié)果
    2. 6細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果
    2. 7 EGFR蛋白表達(dá)檢測結(jié)果
    2. 8 MRI掃描結(jié)果
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]卵巢癌特異性MR分子探針的制備[J]. 文曦琳,李易,葛曉東,李妹玲,文明,李少林.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2014(11)
[2]超順磁性氧化鐵（SPIO）與多聚賴氨酸（PLL）納米粒的制備、結(jié)構(gòu)驗(yàn)證及其空間結(jié)構(gòu)表征[J]. 李易,文曦琳,孫紅武,葛曉東,李妹玲,文明.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(03)
[3]SPIO-PLL-pshRNA分子探針轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV3細(xì)胞及MR成像研究[J]. 文曦琳,李易,葛曉東,李妹玲,鄧小林,吳曉鳳,文明.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]不同質(zhì)量濃度磁性c-erbB-2反義探針對SK-Br-3腫瘤細(xì)胞株形態(tài)及表達(dá)的影響[J]. 劉海燕,溫志鵬,文明,賀海容,譚書德,李少林.  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(01)



本文編號：3359013