發(fā)布時(shí)間：2021-08-21 19:14

　　目的:宮腔粘連常見于人工流產(chǎn)、自然流產(chǎn)刮宮術(shù)、產(chǎn)后感染及宮腔手術(shù)后,是我國婦女繼發(fā)性不孕的第二大病因。間充質(zhì)干細(xì)胞移植在損傷修復(fù)和疾病治療方面應(yīng)用廣泛,其中經(jīng)血源性間充質(zhì)干細(xì)胞（menstrual blood-derived stromal cells,MenSCs）在具有間充質(zhì)干細(xì)胞共性的同時(shí),還具有獲取容易、來源豐富以及低免疫原性的特點(diǎn),在干細(xì)胞再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域擁有廣闊的發(fā)展前景。我們之前的研究結(jié)果已經(jīng)證實(shí)了MenSCs對重度宮腔粘連患者以及大鼠宮腔粘連模型的治療作用,在探究其治療機(jī)制時(shí),我們發(fā)現(xiàn)MenSCs可能通過其旁分泌發(fā)揮部分的治療效應(yīng)。為了進(jìn)一步探索MenSCs的旁分泌作用,我們用MenSCs來源的外泌體（MenSCs-Exos）治療大鼠宮腔粘連模型,以觀察MenSCs-Exos的治療效果,并探索其可能的作用機(jī)制。研究方法:超速離心法分離提取MenSCs無血清培養(yǎng)上清中的外泌體,通過透射電鏡、納米顆粒追蹤分析（NTA）和western blot技術(shù)對其進(jìn)行鑒定,Shotgun法對其進(jìn)行測序分析;采用機(jī)械損傷法建立大鼠模型,造模后大鼠隨機(jī)分為三組,分別注射PBS、MenSCs和M... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MenSCs的表面標(biāo)志CD44、CD73、CD90、CD105陽性，CD34、CD45、CD38陰性

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文133實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1MenSCs的培養(yǎng)和鑒定顯微鏡下觀察結(jié)果顯示，原代MenSCs集落在培養(yǎng)皿底貼壁生長，培養(yǎng)至第三代時(shí)，細(xì)胞大小均一，胞體向兩端突起，呈紡錘形或梭形，MenSCs的集落呈旋渦狀或輻射狀（圖3.1）。流式結(jié)果顯示MenSCs陽性表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志CD44、CD73、CD90、CD105，陰性表達(dá)造血干細(xì)胞表面標(biāo)志CD34、CD45、CD38，提示MenSCs屬于間充質(zhì)干細(xì)胞（圖3.2）。圖3.1MenSCs（A：原代，B：P3）細(xì)胞呈紡錘形或梭形圖3.2MenSCs的表面標(biāo)志CD44、CD73、CD90、CD105陽性，CD34、CD45、CD38陰性3.2MenSCs-Exos的分離和鑒定選擇P3-P7的MenSCs，替換為不含血清的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h后回收上清，上清過濾后利用超速離心法獲得外泌體沉淀，沉淀用PBS溶液重懸后通過透射電鏡、納米顆粒追蹤分析以及westernblot的方法鑒定MenSCs-Exos。納米顆粒追蹤分析結(jié)果顯示，MenSCs-Exos的粒徑大小介于30-150nm之間，與理論外泌體數(shù)值相符，粒徑峰值為127nm（圖3.3A）。透射電鏡觀察結(jié)果可見，MenSCs-Exos呈

MenSCs-Exos的鑒定結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3356180