發(fā)布時間：2021-08-19 21:03

　　目的:1.通過檢測子宮內(nèi)膜異位癥病灶組織與正常內(nèi)膜組織中CD146、miR-329、MMP-9及VEGF的表達,分析CD146、miR-329、MMP-9及VEGF與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系。2.通過在正常子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞及異位子宮間質(zhì)內(nèi)膜細胞中干擾CD146、miR-329的表達,研究CD146、miR-329與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的潛在的分子機制。方法:1.取人正常子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜組織,qRT-PCR測定CD146、miR-329、MMP-9的表達水平,Western blotting法測定MMP-9和VEGF蛋白表達水平。2.提取并分離、純化正常子宮內(nèi)膜組織間質(zhì)細胞和異位內(nèi)膜間質(zhì)細胞,細胞形態(tài)學及免疫組化鑒定子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞,流式細胞儀檢測正常子宮內(nèi)膜細胞及異位子宮內(nèi)膜細胞CD146表達情況。3.將CD146siRNA分別轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞與異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞中,qRT-PCR測定轉(zhuǎn)染后CD146、MMP-9的表達情況,Western blotting檢測MMP-9及VEGF的表達量,了解CD146對于子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的影響。4.用ribo F... 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常內(nèi)膜組織和異位內(nèi)膜組織中CD146、miR-329、MMP-9及VEGF的表達A.qRT-PCR分析正常內(nèi)膜組織和異位內(nèi)膜組織CD146的表達

圖 2.子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞形態(tài)及波形蛋白鑒定A．正常內(nèi)膜間質(zhì)細胞鏡下形態(tài)，B.間質(zhì)細胞免疫組化鑒定 50×，C。異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞下形態(tài)，D.間質(zhì)細胞免疫組化鑒定 200×Figure 2. Endometrial stromal cell morphology and vimentin identificationA. Normal endometrial stromal cell morphology, B. stromal cell immunohistochemistry identified 50C. Ectopic endometrial stromal cytoscopic morphology, D. stromal cell immunohistochemicalidentification 200 ×2.3.3 CD146 在正常子宮內(nèi)膜和異位子宮內(nèi)膜細胞上的比例有關(guān)報道 CD146 在多種腫瘤細胞和其他新生血管形成疾病中表達增加，為了更地研究新生血管形成發(fā)生的關(guān)鍵分子機制，我們首先用流式細胞儀分別檢測正常子內(nèi)膜細胞和異位子宮內(nèi)膜細胞表面的 CD146，結(jié)果發(fā)現(xiàn)異位子宮內(nèi)膜比例高于正常

32圖 5 . CD146 通過促進 MMP-9 及 VEGF 的表達促進內(nèi)異癥病灶生成A． qRT-PCR檢測CD146siRNA轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜異位間質(zhì)細胞CD146mRNA的表達。B. qRT-PCR檢測 CD146 siRNA 轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞 MMP-9 mRNA 的表達。C.WB 檢測CD146siRNA 轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜異位間質(zhì)細胞后 MMP-9 及 VEGF 的蛋白表達。Figure 5 .CD146 promotes neovascularization by promoting the expression of MMP-9 and VEGFA. qRT-PCR was used to detect the expression of CD146 mRNA in endometriotic stromal cellstransfected with CD146 siRNA. B. qRT-PCR was used to detect the expression of MMP-9 mRNA inendometrial stromal cells transfected with CD146 siRNA. C.WB detects the protein expression of MMP-9and VEGF after transfection of endometriotic stromal cells with CD146 siRNA..

【參考文獻】：
期刊論文
[1]TGF-β1信號通路與子宮內(nèi)膜異位癥糖代謝異常的相關(guān)性研究[J]. 劉志紅,易莉莎,邱婷.  華中科技大學學報(醫(yī)學版). 2018(04)
[2]長鏈非編碼RNA在子宮內(nèi)膜異位癥中的研究現(xiàn)狀及前景[J]. 劉頌平,華克勤.  實用醫(yī)學雜志. 2018(13)
[3]VEGF-A在子宮內(nèi)膜異位癥中的研究進展[J]. 郭路路,王偉,郝敏.  國際婦產(chǎn)科學雜志. 2018(01)
[4]CD146對子宮內(nèi)膜異位癥新生血管形成的潛在作用[J]. 崔洪艷,劉頌平.  國際婦產(chǎn)科學雜志. 2017(06)
[5]miR-34調(diào)控c-Jun蛋白對甲狀腺癌細胞生物學行為的影響[J]. 馬沛,汪旭偉,李連海,王建偉,姬穎華.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2018(02)
[6]MicroRNA-143/145對大鼠子宮內(nèi)膜異位癥的治療作用[J]. 梁宗文,趙淵,項軍淼,張安琪,余丹揚,段萍.  溫州醫(yī)科大學學報. 2017(06)
[7]TGF-β、PDGF在子宮內(nèi)膜異位癥患者異位組織中的表達及意義[J]. 杜長江,申慶文.  中外女性健康研究. 2017(07)
[8]Role of microRNAs in translation regulation and cancer[J]. Stefania Oliveto,Marilena Mancino,Nicola Manfrini,Stefano Biffo.  World Journal of Biological Chemistry. 2017(01)
[9]CD146在兒童與成人急性B淋巴細胞白血病細胞中表達及其意義[J]. 謝曉晴,王衛(wèi)敏,甘思林,陳勝梅,張秋堂,謝新生,劉延方,程遠東,劉玉峰,徐學聚,孫慧.  中國實驗血液學雜志. 2017(01)
[10]IL-8受體介導c-Jun和Ets-1異常調(diào)控MMP-9促進胃癌細胞侵襲[J]. 陳惠新,歐志英,陳麗莎,徐永成,曾書君,羅程,余志金.  南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2017(02)

博士論文
[1]雌激素介導的Wnt/β-catenin信號通路調(diào)控子宮內(nèi)膜異位癥上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用機制研究[D]. 熊文倩.華中科技大學 2016
[2]粘附分子CD146在系統(tǒng)性血管炎臨床和發(fā)病機制中意義的研究[D]. 李玲.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2005

碩士論文
[1]抗CD146抗體在異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機制研究[D]. 郭靈華.蘇州大學 2016



本文編號：3352140