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卵巢癌相關(guān)抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL表位的篩選鑒定及其抗腫瘤的免疫效應(yīng)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-17 22:50
  生物免疫治療是手術(shù)、化療及放療之外治療惡性腫瘤的重要輔助手段。腫瘤特異性免疫治療是根據(jù)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)可以特異性識別存在于腫瘤細(xì)胞表面的抗原多肽——這種識別受主要組織相容性抗原復(fù)合體(major histocompatibility complex,MHC)-Ⅰ類分子限制,抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cell,APC)攝取腫瘤抗原肽,并以MHC-肽分子復(fù)合物的形式被呈遞于APC表面,CTL可特異性識別該MHC-肽分子復(fù)合物,同時(shí)被激活,并進(jìn)一步增生分化,從而特異殺傷腫瘤細(xì)胞[1]。T細(xì)胞能夠識別的抗原是靶細(xì)胞或抗原呈遞細(xì)胞的MHC-Ⅰ類或Ⅱ類分子呈遞的由812個(gè)氨基酸組成的多肽,因此對腫瘤相關(guān)抗原的CTL表位肽進(jìn)行預(yù)測并制備其相應(yīng)的多肽疫苗是十分有意義的。相關(guān)抗原肽的CTL表位可以被人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)A2、A3分子遞呈,而HLA-A2在我國人群中最為常見,陽性率高達(dá)53%[2],因此篩選HLA-A2限制性CTL表位肽具有更大的代表... 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:106 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

卵巢癌相關(guān)抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL表位的篩選鑒定及其抗腫瘤的免疫效應(yīng)研究


不同多肽各濃度刺激后與HLA-A2結(jié)合情況

油包水,小鼠,籠飼


圖 2 不合格的油包水劑 圖 3 合格的油包水劑Figure2 unqualified agent Figure3 Qualified agent1.3 實(shí)驗(yàn)方法及主要步驟1.3.1 轉(zhuǎn) HLA-A2 基因小鼠的繁育及鑒定本實(shí)驗(yàn)采用近交系長期同居法進(jìn)行繁殖,將采購的 4 只雄鼠與 4 只同居一籠飼養(yǎng)。此種方法可充分利用小鼠的繁殖能力(特別是利用雌后發(fā)情)在雌鼠分娩后幾小時(shí)內(nèi)可再行交配受孕。1.3.1.1 后代小鼠離乳、上耳釘標(biāo)記、剪鼠尾進(jìn)行基因鑒定小鼠生后一個(gè)月即可離乳,雌雄分籠飼養(yǎng),打耳釘對其進(jìn)行標(biāo)記。1.3.1.2 小鼠基因鑒定步驟⑴組織消化液配制:取高壓滅菌的 1.5mlEP 管,每只小鼠單管Protease Plus 2 μL+Buffer L 100μL,現(xiàn)用現(xiàn)配,充分混勻。

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本文編號:3348657

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