背景卵巢癌（ovarian cancer,OC）是常見的婦科惡性腫瘤,近年來盡管對OC的治療方法不斷改進(jìn),但患者的預(yù)后仍不理想。因此研究OC發(fā)病機(jī)制,尋找用于OC早期診斷和治療的新靶點(diǎn)成為我們亟待解決的問題。賴氨酸特異性去甲基化酶2B（Lysine-specific Demethylase 2B,KDM2B）通過影響組蛋白的甲基化狀態(tài)對其靶基因的表達(dá)發(fā)揮表觀調(diào)控作用,在多種腫瘤中起促癌作用。p21(p21^waf1/Cip1),是細(xì)胞周期進(jìn)展的關(guān)鍵負(fù)調(diào)節(jié)因子,與腫瘤抑制密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)KDM2B可以調(diào)控P21的表達(dá)參與腫瘤的發(fā)生過程,而二者在卵巢癌中的關(guān)系仍不清楚。目的本研究旨在探討卵巢癌中KDM2B是否調(diào)控P21的表達(dá)。檢測KDM2B基因沉默對P21表達(dá)的改變及對卵巢癌A2780/SKOV3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響;并檢測KDM2B基因沉默對卵巢癌裸鼠移植瘤腫瘤生長的影響,進(jìn)一步明確KDM2B與P21表達(dá)的相關(guān)性。為研究卵巢癌的發(fā)病機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。方法1.構(gòu)建包裝KDM2B沉默表達(dá)的慢病毒載體感染卵巢癌細(xì)胞A2780、SKOV3（shKDM2B感染組）,同時感染... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的A2780/SKOV3細(xì)胞中綠色熒光蛋白表達(dá)情況（×200）

（A）：實(shí)時熒光定量 PCR 檢測 A2780/SKOV3 細(xì)胞中 KDM2B mRNA 表達(dá)量；（B）：WesA2780/SKOV3 細(xì)胞中 KDM2B 蛋白表達(dá)量；（C）：KDM2B 下調(diào)后各組 A2780/SKOV3 細(xì)胞疫印跡圖片圖 1-2 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的 A2780/SKOV3 細(xì)胞中 KDM2B mRNA 及蛋白的表達(dá)(A): The expression of KDM2B mRNA in A2780/SKOV3 cells was detected by RealPCR ;(B): The expression of KDM2B mRNA in A2780/SKOV3 cells was detected by WThe picture of KDM2B protien in A2780/SKOV3 cells after KDM2B down-regulationWestern blot;Figure1-2:Expression of KDM2B mRNA and protein in stably transfectedA2780/1.2 沉默 KDM2B 表達(dá)后 p21 的相對表達(dá)量升高為了研究卵巢癌細(xì)胞中 KDM2B 和 p21 之間的調(diào)控關(guān)系，我熒光定量 PCR 及 Western blot 檢測沉默 KDM2B 表達(dá)后 p21 的表時熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與空白組 A2780 細(xì)胞相比，shK細(xì)胞中 p21 mRNA 表達(dá)水平增加了（3.01±5.51）倍，（P <0.0組上升了（3.18±4.93）倍，（P <0.05）；且 shNC 組與空白組細(xì)

KDM2B 調(diào)控 P21 表達(dá)影響卵巢癌增殖遷移的實(shí)驗(yàn)研究 Western blot 檢測結(jié)果顯示，在 A2780 與 SKOV3 細(xì)胞中，胞 KDM2B 蛋白表達(dá)量為 1，p21 的蛋白水平在 shKDM2B-A2780 細(xì)組增加了（3.96±3.78）倍，（P <0.05），較 shNC 組上升（3倍（P <0.05），而空白組與 shNC 組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P與空白組 SKOV3 細(xì)胞相比，在 shKDM2B-SKOV3 細(xì)胞中 p21（3.02±3.12）倍，（P <0.05），而空白組與 shNC 組比較差異義（P 均>0.05）；（圖 1-3 B-C）。


本文編號：3331940