目的:探討宮頸癌HeLa細(xì)胞外泌體對(duì)細(xì)胞遷移、侵襲及Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號(hào)通路的影響,闡明其外泌體在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中的可能作用機(jī)制。方法:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期宮頸癌HeLa細(xì)胞,采用超速離心法分離宮頸癌HeLa細(xì)胞外泌體,透射電鏡下觀察外泌體形態(tài)表現(xiàn),Western blotting法檢測(cè)外泌體標(biāo)志蛋白CD63和CD81的表達(dá),鑒定分離出來(lái)的外泌體。將HeLa細(xì)胞分為外泌體組（Exo組）和對(duì)照組,2組細(xì)胞分別用含和不含HeLa細(xì)胞外泌體的培養(yǎng)基培養(yǎng)。共聚焦顯微鏡下觀察HeLa細(xì)胞攝取外泌體情況,其中外泌體采用PKH26熒光標(biāo)記,HeLa細(xì)胞用DAPI熒光進(jìn)行核染色,Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移能力,Western blotting法檢測(cè)細(xì)胞中Wnt1、β-catenin和T細(xì)胞因子4 （TCF4）蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:透射電鏡下觀察,HeLa細(xì)胞中分離的外泌體為是圓形或橢圓形、直徑為40～100nm的囊泡狀小體,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦顯微鏡下觀察,Exo組HeLa細(xì)胞膜表面有外泌體附著,而對(duì)照組HeLa細(xì)胞膜表面無(wú)... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,46(04)北大核心CSCD

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電鏡下觀察HeLa細(xì)胞來(lái)源外泌體形態(tài)表現(xiàn)

HeLa細(xì)胞外泌體采用PKH26熒光標(biāo)記（PKH26染劑不影響外泌體特性，且可與外泌體膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定結(jié)合發(fā)出紅色熒光），HeLa細(xì)胞用DAPI熒光進(jìn)行核染色，培養(yǎng)24h，共聚焦熒光顯微鏡觀察，對(duì)照組HeLa細(xì)胞膜表面無(wú)標(biāo)記外泌體附著，Exo組HeLa細(xì)胞膜表面有標(biāo)記的外泌體附著。見圖3（插頁(yè)七）。2.3 2組HeLa細(xì)胞中侵襲細(xì)胞數(shù)

與對(duì)照組比較，Exo組HeLa細(xì)胞遷移距離明顯增加（P<0.01）。見表1和圖5。2.5 2組HeLa細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]食管癌細(xì)胞來(lái)源的外泌體對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移及侵襲能力的影響及機(jī)制研究[J]. 林鋒,王海娟,李春曉,李慧,王婷,南鵬,錢海利,詹啟敏.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2017(04)
[2]宮頸癌細(xì)胞分泌外泌體介導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化提高癌前細(xì)胞侵襲能力的體外研究[J]. 易紅艷,周琛斐,梁莉,王薇,魏文斐,陳曉靜,吳湘光,嚴(yán)瑞明,劉國(guó)炳,陳春林,鐘梅,余艷紅.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2017(03)
[3]腫瘤細(xì)胞外泌體在腫瘤免疫中的作用[J]. 張曉航,張淑雯,寧永玲,戚春建.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2017(02)



本文編號(hào)：3301547