【目的】本研究旨在探索Ep300（巴豆�；D(zhuǎn)移酶）在卵丘細(xì)胞（CCs）成熟過(guò)程中介導(dǎo)的EGFR（表皮生長(zhǎng)因子受體）Kcr（巴豆�；揎棧┑淖饔靡约跋嚓P(guān)的調(diào)控分子機(jī)制�！痉椒ā�1)檢測(cè)Ep300對(duì)CCs增殖凋亡的影響:我們采用siRNA技術(shù)敲低Ep300的表達(dá)和特異性激活劑CTPB激活Ep300,Dot Blot（點(diǎn)雜交）檢測(cè)細(xì)胞總Kcr的水平;其次,在Ep300低表達(dá)或激活的情況下,采用Annexin V-FITC/PI染色（細(xì)胞凋亡雙染色）以及Western Blot檢測(cè)凋亡標(biāo)志物Fox-01A、Fox-03A驗(yàn)證Ep300是否抑制細(xì)胞的凋亡,同時(shí),CCK8實(shí)驗(yàn)（細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)）檢測(cè)Ep300是否促進(jìn)細(xì)胞增殖。2)篩選Ep300的底物并驗(yàn)證:對(duì)兩組Kcr修飾的靶蛋白及位點(diǎn)取交集,KEGG通路分析,結(jié)果是巴豆�；揎椀鞍着c卵母細(xì)胞減數(shù)分裂相關(guān),其中EGFR做為卵丘調(diào)控卵母細(xì)胞的關(guān)鍵因子可也被Kcr修飾,可能是Ep300的底物。首先,r-EGFR（重組EGFR）和Kcr-CoA（巴豆�；�-輔酶A）共孵育驗(yàn)證EGFR是否存在Kcr修飾,免疫共沉淀（Co-IP）驗(yàn)證內(nèi)源EGFR是否存在Kcr... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 前言
第二章 材料、技術(shù)路線與方法
第三章 結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3242997