本文關(guān)鍵詞：孕激素、基質(zhì)金屬蛋白酶10、瘦素受體與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景:妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)提出,已有半個(gè)世紀(jì)的歷史。研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗、脂肪因子、炎性因子、遺傳因素以及自身免疫因素等都與GDM發(fā)病密切相關(guān)。脂肪因子之一的瘦素(Leptin,LEP),自發(fā)現(xiàn)以來,國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者研究結(jié)果證實(shí)是參與糖脂代謝關(guān)鍵因子。瘦素生物學(xué)功能的實(shí)現(xiàn),一是與體內(nèi)瘦素濃度有關(guān),二是與體內(nèi)瘦素受體含量及分布有關(guān)。脂肪組織是瘦素合成和分泌的主要場(chǎng)所。在對(duì)妊娠期代謝性疾病的研究發(fā)現(xiàn),除脂肪組織外,胎盤組織是另一個(gè)可合成和分泌瘦素的重要組織。研究還發(fā)現(xiàn)胎盤組織除了合成瘦素外,還可表達(dá)瘦素受體。胎盤瘦素功能異�？蓪�(dǎo)致GDM發(fā)生。瘦素受體分型眾多(a,b,c,d,e,f),存在形式多樣(長(zhǎng)型跨膜瘦素受體、短型跨膜瘦素受體和可溶性瘦素受體),目前瘦素受體的研究主要集中在長(zhǎng)型跨膜瘦素受體(b型,long form of leptin receptor,Ob-R)和可溶性瘦素受體(e型,soluble form of leptin receptor,SLR)上。長(zhǎng)型跨膜瘦素受體主要集中于中樞神經(jīng)系統(tǒng),胎盤組織也可表達(dá)Ob-R。SLR主要存在血清中,參與調(diào)控血清瘦素濃度。國(guó)外學(xué)者研究證實(shí)SLR在2型糖尿病人群的表達(dá)量低于正常人群。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)SLR在GDM組表達(dá)低于正常妊娠組。胎盤組織可分泌多種激素參與糖代謝的調(diào)節(jié),研究證實(shí)妊娠期糖耐量異常的孕婦血孕激素水平顯著高于正常妊娠的孕婦,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)糖耐量異常的孕婦血瘦素水平與孕酮呈正相關(guān),孕激素為GDM發(fā)病的高危因子。國(guó)內(nèi)外學(xué)者分別證實(shí)孕激素可影響瘦素的生物學(xué)功能,有學(xué)者提出基質(zhì)金屬蛋白酶10(A Disintegrin And Metalloprotease domain 10,ADAM10)可通過裂解長(zhǎng)型跨膜瘦素受體(Ob-R)產(chǎn)生可溶性瘦素受體(SLR)。又有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)基質(zhì)金屬蛋白酶的激活在一定程度上受到孕激素的影響。因此,我們推測(cè)孕激素可影響ADAM10,而ADAM10可通過裂解Ob-R,影響SLR的合成,干擾瘦素功能發(fā)揮,導(dǎo)致孕期糖代謝異常,參與GDM發(fā)病。目的:一、了解ADAM10在胎盤組織的表達(dá)情況;二、檢測(cè)不同濃度孕激素對(duì)早孕人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)ADMA10、Ob-R、SLR和LEP的影響,探索孕激素、ADMA10、slr在gdm發(fā)病中的作用機(jī)制。方法:1、收集15例足月單胎gdm孕婦胎盤組織作為研究組,15例足月單胎正常妊娠孕婦胎盤組織作為對(duì)照組。所有納入研究對(duì)象均參照國(guó)際糖尿病協(xié)會(huì)和妊娠研究組(internationalassociationofdiabetesandpregnancystudygroups,iadpsg)診斷標(biāo)準(zhǔn),于妊娠24-28周行75g口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(oralglucosetolerancetest,ogtt),滿足該診斷標(biāo)準(zhǔn)的為gdm組,不滿足為正常妊娠組。分別采用westernblotting法、qrt-pcr法檢測(cè)adam10蛋白及其mrna在2組胎盤組織相對(duì)表達(dá)量,比較2組胎盤adam10的表達(dá)是否存在差異性。2、收集我院婦產(chǎn)科門診,正常妊娠6-10周,經(jīng)超聲證實(shí)為宮內(nèi)妊娠,自愿選擇人工流產(chǎn)終止妊娠且健康女性的早孕胚胎人絨毛組織,進(jìn)行早孕人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)課題組關(guān)于孕激素與妊娠期糖代謝的相關(guān)性研究,分組給予不同濃度孕激素(0ng/ml、100ng/ml、150ng/ml、200ng/ml)培養(yǎng)早孕人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞,收集細(xì)胞及上清液,行westernblotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞adam10和ob-r蛋白的表達(dá),行酶免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elisa)檢測(cè)上清液中slr、lep的含量。比較不同濃度孕激素對(duì)早孕人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞adam10、ob-r表達(dá)的影響及分泌slr、lep含量的影響,進(jìn)一步推測(cè)adam10與gdm發(fā)病是否存在相關(guān)性。結(jié)果:第一部分:westernblotting檢測(cè)證實(shí)adam10蛋白在gdm組的含量顯著低于正常妊娠組(0.98±0.26vs1.59±0.51,p0.01),qrt-pcr實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示adam10mrna在gdm組的表達(dá)低于正常妊娠組(0.37±0.25vs1.00±0.00,p0.01)。第二部分:(1)在0ng/ml、100ng/ml、150ng/ml和200ng/ml孕激素濃度下人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞adam10相對(duì)表達(dá)量分別為1.9411±0.4301、1.3700±0.3041、0.7743±0.1844、0.2433±0.6122,組間兩兩比較p0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)各組細(xì)胞表達(dá)ob-r相對(duì)表達(dá)量分別為0.5796±0.3197、0.7070±0.3155、1.2446±0.6636和1.5168±0.8224,組間比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(3)各組上清液中slr濃度分別為:9.4990±0.8068、7.3213±0.1496、5.8720±0.0180和3.8758±1.0690為(ng/ml),組間兩兩比較p0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)各組上清液中l(wèi)ep濃度為144.87±10.975、287.09±28.762、332.42±14.867、443.09±12.389(ng/ml),組間兩兩比較p0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.胎盤組織表達(dá)ADAM10,且GDM組胎盤組織ADAM10蛋白及其mRNA的含量低于正常妊娠組,ADAM10可能參與GDM的病理過程。2.孕激素作用于早孕人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞,隨著濃度增加ADAM10、SLR的表達(dá)量降低。提示:孕激影響ADAM10表達(dá)使SLR分泌量減少,瘦素生物學(xué)功能降低,糖脂代謝異常,參與GDM發(fā)生的病理過程。
【關(guān)鍵詞】：基質(zhì)金屬蛋白酶10 孕激素 瘦素受體 妊娠期糖尿病 胎盤
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R714.256
【目錄】：

• 縮略語表4-7
• 英文摘要7-10
• 中文摘要10-13
• 第一章 前言13-15
• 第二章 基質(zhì)金屬蛋白酶10在GDM胎盤組織中的表達(dá)15-28
• 2.1 材料和方法15-23
• 2.2 結(jié)果23-25
• 2.3 討論25-27
• 2.4 小結(jié)27-28
• 第三章 不同濃度孕激素影響早孕人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)ADAM10、Ob-R和分泌SLR28-45
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法28-37
• 3.2 結(jié)果37-42
• 3.3 討論42-44
• 3.4 小結(jié)44-45
• 全文結(jié)論45
• 本研究的創(chuàng)新之處45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 文獻(xiàn)綜述 胎盤活性物質(zhì)在GDM中的研究進(jìn)展49-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 附件59-60
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文60-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳正瓊;成婭;陳浩波;林桂蘭;;妊娠期糖耐量異�；颊哐錏2、P、PRL水平變化及其與瘦素水平的關(guān)系[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年06期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 周立巖;妊高征婦女胎盤瘦素、神經(jīng)肽Y及胰島素水平測(cè)定及其意義[D];青島大學(xué);2004年

  本文關(guān)鍵詞：孕激素、基質(zhì)金屬蛋白酶10、瘦素受體與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：323866