目的探討敲低YTH結(jié)構(gòu)域N⁶甲基腺嘌呤（m⁶A）RNA結(jié)合蛋白2（YTHDF2）對人宮頸癌細(xì)胞增殖、周期和凋亡的影響。方法利用人蛋白圖譜（Human Protein Atlas）數(shù)據(jù)庫分析YTHDF2在宮頸癌中表達(dá)及與生存時間的關(guān)系。收集宮頸癌和正常宮頸組織各31例,采用免疫組織化學(xué)法檢測YTHDF2的蛋白表達(dá)差異;利用敲低YTHDF2的短發(fā)夾RNA（shRNA）及空載質(zhì)粒包裝慢病毒,并感染至宮頸癌HeLa細(xì)胞和SiHa細(xì)胞,實(shí)時熒光定量PCR及Western blot法檢測YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活性,集落形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞集落形成能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果檢測數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)YTHDF2在宮頸癌中表達(dá)越高生存時間越短,與正常宮頸組織相比, YTHDF2在宮頸癌組織高表達(dá)。敲低YTHDF2后,抑制宮頸癌細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,使細(xì)胞阻滯于S期。結(jié)論 YTHDF2在宮頸癌組織中高表達(dá),敲低后抑制宮頸癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡。 

【文章來源】：細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

YTHDF2敲低后對宮頸癌細(xì)胞增殖和集落形成的影響

分別處理各組細(xì)胞, 檢測細(xì)胞凋亡比例, 結(jié)果顯示, HeLa細(xì)胞對照組、 HeLa細(xì)胞YTHDF2-sh1、 HeLa細(xì)胞YTHDF2-sh2、 SiHa細(xì)胞對照組、 SiHa細(xì)胞YTHDF2-sh1、 SiHa細(xì)胞YTHDF2-sh2凋亡細(xì)胞比例分別為(3.52±0.49)%、 (17.06±1.74)%、 (15.03±0.3)%、 (3.72±0.35)%、 (13.13±1.56)%、 (13.09±1.57)%。與對照組細(xì)胞相比, 敲低YTHDF2的表達(dá)后的宮頸癌細(xì)胞凋亡率顯著增加, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01, 圖6)。 說明宮頸癌細(xì)胞YTHDF2敲低后能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡。3 討論

利用HPA數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)YTHDF2高表達(dá)患者生存期的95%置信區(qū)間(cofidence interval, CI)為7.63 ～10.87 年, YTHDF2低表達(dá)患者生存期的95% CI為10.01 ～15.69 年, 高表達(dá)的宮頸癌患者總生存時間比YTHDF2低表達(dá)的宮頸癌患者短(P<0.05, 圖1), 說明YTHDF2的高表達(dá)會縮短宮頸癌患者的生存期。2.2 YTHDF2在宮頸癌組織高表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]敲低MGC-803胃癌細(xì)胞YTHDF2抑制其增殖并促進(jìn)其凋亡[J]. 張杰,皮靜楠,劉越,余佳,馮濤.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(12)



本文編號：3236820