目的:探討Sirtuin蛋白3（SIRT3）對宮頸癌細胞脂肪酸代謝的影響及可能機制。方法:（1）qRT-PCR方法,檢測SIRT3在宮頸鱗癌（CSCC）、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）、慢性宮頸炎組織中的轉(zhuǎn)錄水平;（2）免疫組化方法檢測SIRT3蛋白在上述三組及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達水平。（3）慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)分別上/下調(diào)宮頸癌SiHa和C33a細胞中SIRT3的表達,采用qRT-PCR、Western blotting技術(shù)驗證轉(zhuǎn)染效率;免疫沉淀和Western blotting相結(jié)合檢測乙酰輔酶A羧化酶（ACC1）和肉堿酯酰轉(zhuǎn)移酶（CPT1α）的蛋白及乙�；�。（4）慢病毒轉(zhuǎn)染細胞后通過細胞劃痕實驗、Transwell小室及裸鼠移植瘤造模技術(shù),檢測SIRT3的表達變化對腫瘤細胞的遷移、侵襲、增殖及轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果:（1）SIRT3 mRNA在CIN和CSCC組織中的表達明顯高于慢性宮頸炎組（P<0.001）。（2）SIRT3蛋白在慢性宮頸炎、CIN和CSCC組織中表達呈現(xiàn)一個遞增趨勢,特別是在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤組織中SIRT3的表達最高（χ²=56.63,P<... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

宮頸癌、CIN和正常宮頸組織中qRT-PCR實驗結(jié)果

圖 2 免疫組化檢測 SIRT3 蛋白在宮頸癌、CIN、癌旁宮頸和淋巴結(jié)組織中的表達(3100,3200)g.2 Immunohistochemical staining for the SIRT3 in cervical cancer、CIN、paired adjacentnormal and Lymph node tissues (×100,×200)表 4 正常宮頸組織、CIN、宮頸癌及淋巴結(jié)中 SIRT3 蛋白表達及臨床參數(shù)的統(tǒng)計分析Table4 SIRT3 expression in carcinoma of the cervical according to patient shistopathologic characteristic.分類 例數(shù) 陰性 弱 中 強 χ2P性宮頸炎 14 8 6 0 0CINⅠ-Ⅲ 36 3 9 22 2CSCC 53 0 8 24 21巴結(jié)組織 17 0 1 4 12 56.63 <0.001分化高 7 0 3 4 0中/低 46 0 6 18 22 5.776 0.039

圖 3 宮頸癌細胞 C33a、SiHa 和正常宮頸上皮細胞 H8 中 qRT-PCR 驗結(jié)果a)SIRT3 的擴增曲線；b)SIRT3 的溶解曲線；c)SIRT3 的熔解峰；d)計算并分析 SIRT3 mRNA 相對表達量，**P<0.001Fig.3 The result of qRT-PCR of C33a、SiHa and H8a)The Amplification of SIRT3；b)The curve plot of SIRT3；c)The Melt Peak of SIRT3；d)Statistical evaluation of the mRNA expression of SIRT3gene,**P<0.001

【參考文獻】：
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本文編號：3217411