目的:探索子宮內(nèi)膜腺癌來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞（Endometrial adenocarcinoma derived mesenchymal stem cell,ECMSC）對(duì)子宮內(nèi)膜癌發(fā)展的影響與作用機(jī)制。內(nèi)容:1.正常子宮內(nèi)膜組織與癌變組織來(lái)源MSC的分離培養(yǎng)與鑒定。2.體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)癌組織與正常組織來(lái)源MSC對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系HEC-1A的作用與機(jī)制。3.體內(nèi)裸鼠實(shí)驗(yàn)檢測(cè)癌組織與正常組織來(lái)源MSC對(duì)子宮內(nèi)膜癌發(fā)展的影響。方法:1.采用組織消化法分離培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜來(lái)源MSC（Endometrium derived mesenchymal stem cell,EMSC）和子宮內(nèi)膜腺癌來(lái)源MSC,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞表型,采用油紅O染色、堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）染色檢測(cè)細(xì)胞的成脂和成骨誘導(dǎo)分化能力,熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）檢測(cè)成脂分化過(guò)程中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子PPARγ和成骨分化的標(biāo)志性酶ALP的表達(dá)。2.為探討ECMSC和EM... 

【文章來(lái)源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1分離培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的形態(tài)觀察A:EMSCB:ECMSC

第 7 頁(yè)圖 1.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)兩種細(xì)胞的細(xì)胞表型A: EMSC B: ECMSC1.5.2 ECMSC 和 EMSC 成脂分化能力檢測(cè)ECMSC 和 EMSC 進(jìn)行成脂誘導(dǎo)分化，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng) 14d 后，油紅 O 染色，倒置顯微鏡下可見(jiàn)，誘導(dǎo)組細(xì)胞內(nèi)聚集成團(tuán)分布的大量空泡樣紅色脂滴，呈花環(huán)狀或串珠狀，脂滴數(shù)量多，相對(duì)較大而圓，且 EMSC 和 ECMSC 成脂誘導(dǎo)組的細(xì)胞內(nèi)形成的脂滴均多于自分組(圖 1.3，1.4) 。RT-PCR 檢測(cè)自分化組和成脂誘導(dǎo)組細(xì)胞表達(dá)成脂分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子 PPAR-γ的表達(dá)，結(jié)果顯示，誘導(dǎo)組細(xì)胞的PPAR-γ表達(dá)顯著高于對(duì)照組（圖 1.5，P<0.0001, P<0.005）。

圖 1.3 油紅 O 染色檢測(cè) EMSC 的成脂誘導(dǎo)分化A:自分化組 B：誘導(dǎo)分化組圖 1.4 油紅 O 染色檢測(cè) ECMSC 的成脂誘導(dǎo)分化A: 自分化組 B：誘導(dǎo)分化組


本文編號(hào)：3215735