目的探討基于精子前向運動性和溫度趨向性的新型篩選方法在提高人精子質(zhì)量的效果。方法將密度梯度離心后獲能的精子置于不同長度（2、5和8 cm）條狀液滴的一端,同時設(shè)置不同的環(huán)境溫度條件（恒溫32℃、恒溫37℃、32℃～37℃溫度梯度）,孵育60 min后,從液滴的另一端收集精子樣本,比較不同距離及溫度條件下篩選獲得精子的濃度、活力、正常形態(tài)率及DNA碎片率等指標(biāo)的差異。結(jié)果在相同的環(huán)境溫度條件下,經(jīng)過長距離（5、8 cm）篩選獲得的精子比初始精子（0 cm）具有更高的正常形態(tài)率（P<0.05）;隨著距離的延長,精子活力未見顯著性改變,但精子的濃度則呈極顯著下降趨勢（P<0.01）。長距離（5、8 cm）條件下,32℃～37℃溫度梯度環(huán)境獲得的精子濃度高于無溫度差值組（恒溫32℃和恒溫37℃）（P<0.01）,且精子DNA碎片率更低（P<0.05）。結(jié)論長距離水平游動能淘汰大量形態(tài)異常的精子,但過長的距離將導(dǎo)致精子濃度急劇下降,溫度梯度的設(shè)置能富集得到更多DNA完整性較好的具有正常趨熱應(yīng)答能力的精子。5 cm,32℃～37℃條件下優(yōu)選精子效果較好,可降低體外受精過程中... 

【文章來源】：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,40(08)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同距離-溫度聯(lián)合篩選條件下精子DNA碎片率的比較

選取直徑為100 mm的培養(yǎng)皿,用記號筆在圓皿外底面標(biāo)記不同長度(2、5和8 cm)的刻度線,再用加樣器吸取恒定液體量(500 μL)的G-GAMETE培養(yǎng)液并沿背面刻度線加注并拉出寬度相同的條狀液滴,最后在液滴表面覆蓋石蠟油。將恒溫培養(yǎng)箱溫度分別設(shè)置為32 ℃和37 ℃,將裝有條狀液滴的培養(yǎng)皿分別放入不同溫度的培養(yǎng)箱內(nèi)。其中,32 ℃培養(yǎng)箱中部分培養(yǎng)皿底部一側(cè)墊有37 ℃恒溫電熱片,保證皿內(nèi)3條液滴的右側(cè)對齊并位于電熱片導(dǎo)熱區(qū)的正上方,同時使用微滴溫度檢測儀對培養(yǎng)皿中條狀液滴的不同區(qū)段進行溫度測定,以驗證形成32 ℃～37 ℃的溫度梯度(圖1)。培養(yǎng)液均需在箱中平衡4 h以上,從而形成A1(2 cm,32 ℃)、A2(5 cm,32 ℃)、A3(8 cm,32 ℃)、B1(2 cm,37 ℃)、B2(5 cm,37 ℃)、B3(8 cm,37 ℃)、C1(2 cm,32 ℃～37 ℃)、C2(5 cm,32 ℃～37 ℃)、C3(8 cm,32 ℃～37 ℃)9組不同的距離-溫度聯(lián)合篩選條件。將離心后的獲能精子分成體積相等(50 μL)的10份,留存1份作為初始樣本I組(0 cm,37 ℃),其余9份添加到各條狀液滴的一端,孵育60 min后,從液滴的另一端收集精子樣本進行后續(xù)實驗。1.2.3 精子濃度、活力的測定:

在進行距離-溫度聯(lián)合篩選之前,使用密度梯度離心法處理后得到的獲能精子,其活動精子百分率(PR+NP)顯著性高于精液原液的活動精子百分率(P<0.01)。32 ℃、37 ℃、32 ℃～37 ℃條件下,隨著距離的延長,精子活力無明顯提高(圖2)。2.3 精子形態(tài)正常率的比較

【參考文獻】：
期刊論文
[1]人類體外受精-胚胎移植實驗室操作專家共識（2016）[J]. Embryologist Group,China Society of Reproduction Medicine,Chinese Medical Association;.  生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2017(01)



本文編號：3211612