我國癌癥的發(fā)病率和死亡率近年來均保持上升趨勢。越來越多的研究發(fā)現(xiàn),長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）在多種組織的癌變、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要功能,扮演著腫瘤抑制基因或致癌基因的角色。近年來隨著細(xì)胞分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)許多長鏈非編碼RNAs廣泛參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展和化療耐藥等過程。LncRNAs是長度大于200個核苷酸的非編碼RNAs（ncRNAs）。LncRNAs在劑量補償效應(yīng)、表觀遺傳調(diào)控、細(xì)胞周期調(diào)控和細(xì)胞分化調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮重要作用。LncRNAs作為能夠直接影響細(xì)胞信號傳導(dǎo)、細(xì)胞增殖分化的基因,在許多生物學(xué)過程中起重要的調(diào)控作用。對于此類新興分子標(biāo)記的研究不僅能使我們對于腫瘤的了解更近一步,甚至還有希望使之成為腫瘤診斷的生物學(xué)標(biāo)記和治療的細(xì)胞內(nèi)靶點。鑒于lncRNAs在腫瘤臨床診斷和治療方面具有廣闊的前景,以lncRNAs為靶點開發(fā)抗腫瘤新藥必將成為未來抗腫瘤藥物研發(fā)的新趨勢。首先通過文獻(xiàn)篩選出的lncRNAs,采用RT-qPCR技術(shù),并將CCAT2、LINC00511、LINC01133分別在正常人和結(jié)直腸癌患者血清組中進(jìn)行驗證,... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
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中文摘要
Abstract
第一部分 長鏈非編碼RNAs作為結(jié)直腸癌候選腫瘤標(biāo)志物的診斷價值研究
    前言
    材料與方法
        一、主要儀器
        二、主要試劑及耗材
        三、實驗方法
    實驗結(jié)果
        一、候選LncRNAs的確定
        二、研究對象的臨床資料
        三、候選血清長鏈非編碼RNAs在正常對照組和結(jié)直腸癌患者中的表達(dá)差異
        四、3種長鏈非編碼RNAs作為結(jié)直腸癌血清標(biāo)志物的ROC分析
        五、血清長鏈非編碼RNAs與結(jié)直腸癌臨床特征的相關(guān)性分析
    討論
第二部分 LncRNAs作為宮頸癌候選腫瘤標(biāo)志物的診斷價值研究
    前言
    材料與方法
    實驗結(jié)果
        一、研究對象的臨床資料
        二、候選血清長鏈非編碼RNAs在宮頸癌患者和正常對照組中的表達(dá)差異
        三、3種長鏈非編碼RNAs作為宮頸癌血清標(biāo)志物的ROC分析
        四、血清長鏈非編碼RNAs診斷模型與宮頸癌臨床特征的相關(guān)性分析
        五、正常對照、宮頸上皮樣瘤變與宮頸癌患者血清之間的差異性表達(dá)
        六、2種長鏈非編碼RNAs對宮頸上皮樣瘤變的ROC分析
        七、2種長鏈非編碼RNAs對宮頸上皮樣瘤變與宮頸癌的ROC分析
    討論
第三部分 LINC00673在宮頸癌中的功能研究
    前言
    實驗材料
        一、宮頸癌患者血清標(biāo)本
        二、細(xì)胞系
        三、主要試劑
        四、主要儀器
        五、計算機(jī)分析軟件
        六、主要溶液的配制
    實驗方法
        一、血清的收集和總RNA的提取
        二、細(xì)胞總RNA的提取
        三、cDNA合成
        四、實時定量PCR分析
        五、細(xì)胞系及其培養(yǎng)
        六、感受態(tài)細(xì)菌的制備
        七、感受態(tài)細(xì)菌的轉(zhuǎn)化
        八、質(zhì)粒中提
        九、慢病毒表達(dá)載體pLVX-Puro LINC00673構(gòu)建
        十、慢病毒制備及穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系的構(gòu)建
        十一、MTT法測定細(xì)胞生長曲線
        十二、平板克隆形成實驗
        十三、流式檢測細(xì)胞周期實驗
        十四、細(xì)胞遷移實驗
        十五、細(xì)胞侵襲實驗
        十六、裸鼠皮下成瘤實驗
        十七、Western blot
        十八、統(tǒng)計方法
    實驗結(jié)果
        一、LINC00673在宮頸癌患者及宮頸上皮樣瘤變患者血清中表達(dá)升高
        二、LINC00673過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系建立
        三、LINC00673對宮頸癌細(xì)胞惡性表型的影響
        四、順鉑處理后的HeLa細(xì)胞中LINC00673表達(dá)變化
        五、過表達(dá)LINC00673對宮頸癌細(xì)胞順鉑化療耐受情況的影響
        六、過表達(dá)LINC00673促進(jìn)HeLa細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤能力
        七、與LINC00673表達(dá)相關(guān)的信號通路檢測
    討論
第四部分 SLC25A25-AS1在宮頸癌中的功能研究
    前言
    材料與方法
    實驗結(jié)果
        一、SLC25A25-AS1在宮頸癌患者及宮頸上皮樣瘤變患者血清中表達(dá)降低
        二、SLC25A25-AS1對宮頸癌細(xì)胞系惡性表型的影響
        三、順鉑處理后的HeLa細(xì)胞中SLC25A25-AS1表達(dá)變化
        四、過表達(dá)SLC25A25-AS1對宮頸癌細(xì)胞順鉑化療耐受情況的影響
        五、過表達(dá)SLC25A25-AS1抑制HeLa的遷移能力
        六、過表達(dá)SLC25A25-AS1抑制HeLa的侵襲能力
        七、過表達(dá)SLC25A25-AS1抑制HeLa在裸鼠體內(nèi)的成瘤能力
        八、與SLC25A25-AS1相關(guān)的信號通路
    討論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
基金資助
個人簡歷
致謝



本文編號：3200598