發(fā)布時(shí)間：2021-05-17 23:26

　　目的:探究P53突變體R175H對(duì)HELA細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制分析方法:1.Western Blot法檢測(cè)HPV E6對(duì)P53野生型及突變體（R273H、R175H）的作用。2.以野生型P53與R175H質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染進(jìn)HELA細(xì)胞的組別為實(shí)驗(yàn)組,余單獨(dú)轉(zhuǎn)染VR、野生型P53、P53 R175H質(zhì)粒入HELA細(xì)胞為對(duì)照組,細(xì)胞計(jì)數(shù)法、MTS法檢測(cè)HELA細(xì)胞的活力、增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HELA細(xì)胞的凋亡率。3.Western Blot法檢測(cè)在不同細(xì)胞系中（HEK293T和HELA細(xì)胞）,P53R175H對(duì)HPV E6降解野生型P53的影響。4.免疫共沉淀法檢測(cè)在H1299細(xì)胞系（無(wú)P53基因）中,R175H對(duì)HPV E6/E6AP異二聚體的影響。結(jié)果:1.P53 R175H不能被HPV E6降解,同時(shí)HPV E6表達(dá)量增加。2.P53 R175H抑制HELA細(xì)胞的活力及增殖能力,并誘導(dǎo)其凋亡3.P53 R175H抑制HPV E6降解野生型P53,同時(shí)HPV E6表達(dá)量增加4.P53 R175H有效阻斷HPV E6/E6AP結(jié)合從而抑制HPV E6降解P53結(jié)論:P53 R17... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
英文縮略詞
第1章 引言
第2章 綜述
    2.1 高危型HPV E6蛋白的主要生物學(xué)特性
        2.1.1 鋅指結(jié)構(gòu)
        2.1.2 PDZ結(jié)合域
        2.1.3 HPV E6的晶體結(jié)構(gòu)
    2.2 高危型HPV E6在宮頸癌中的作用及機(jī)制
        2.2.1 高危型HPV E6蛋白與P53相互作用介導(dǎo)細(xì)胞凋亡
        2.2.2 高危型HPV E6蛋白激活端粒酶活性致細(xì)胞永生化
        2.2.3 高危型HPV E6促使細(xì)胞凋亡信號(hào)衰減
    2.3 高危型HPV E6作為抗癌治療的新靶點(diǎn)
    2.4 結(jié)語(yǔ)
第3章 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 細(xì)胞株、病毒及耗材
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 質(zhì)粒
        3.1.4 主要儀器
        3.1.5 主要試劑配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第4章 結(jié)果
    4.1 P53 R175H不能被HPV E6降解，同時(shí)HPV E6表達(dá)量增加
    4.2 P53 R175H抑制HELA細(xì)胞的活力及增殖能力，并誘導(dǎo)其凋亡
    4.3 P53 R175H抑制HPV E6降解野生型P53，同時(shí)HPV E6表達(dá)量增加
    4.4 P53 R175H有效阻斷HPV E6與E6AP結(jié)合，抑制HPV E6降解P53
第5章 討論
    5.1 P53 R175H在HPV E6降解P53信號(hào)通路的作用機(jī)制
    5.2 P53 R175H對(duì)HELA細(xì)胞的影響
    5.3 P53 R175H在HPV E6/E6AP/P53異三聚體中作用機(jī)制
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在讀期間取得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3192657