目的:卵巢癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一,是女性生殖系統(tǒng)腫瘤中死亡率最高的腫瘤。大多數(shù)患者就診時已是晚期,51%的患者為FIGO III期、29%的患者為FIGO IV期,而Ⅲ、Ⅳ期患者5年生存率僅為27%。腫瘤轉移是影響卵巢癌患者生存率的主要因素。腫瘤細胞生長依賴于腫瘤微環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),腫瘤細胞可以募集包括間充質干細胞（mesenchymal stem cell,MSC）在內的細胞進入腫瘤微環(huán)境發(fā)揮作用。脂肪源性干細胞（adipose derived stem cell,ADSC）是間充質干細胞家族的重要成員,ADSC已被證明參與多種腫瘤細胞的惡性進程,例如乳腺癌、肺癌、骨肉瘤、膠質細胞瘤、前列腺癌等。有報道ADSC通過旁分泌方式影響Wnt信號通路增強結腸癌細胞的轉移能力。因此,本研究提取人ADSC制備條件培養(yǎng)基（conditioned medium,CM）培養(yǎng)卵巢癌SK-OV-3細胞,模擬其在腫瘤微環(huán)境中的作用,觀察并研究腫瘤特性變化,探索ADSC在卵巢癌發(fā)展中的作用及其潛在機制,為卵巢癌的治療提供新方向。研究方法:1.ADSC的分離、培養(yǎng)及鑒定。（1）運用膠原酶消化法提取網(wǎng)膜脂肪組... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 溶液配置
3 實驗方法
    3.1 細胞培養(yǎng)
        3.1.1 細胞復蘇
        3.1.2 細胞傳代
        3.1.3 細胞凍存
    3.2 ADSC的分離培養(yǎng)及鑒定
        3.2.1 原代細胞分離培養(yǎng)
        3.2.2 ADSC細胞表型鑒定
        3.2.3 ADSC體外成脂誘導分化鑒定
        3.2.4 ADSC體外成骨誘導分化鑒定
        3.2.5 制備ADSC條件培養(yǎng)基
    3.3 CCK-8法檢測細胞增殖
    3.4 PI染色法檢測細胞周期
    3.5 Annexin-V/PI熒光雙染法檢測細胞凋亡
    3.6 Wound healing實驗檢測細胞遷移
    3.7 Transwell遷移實驗
    3.8 Transwell侵襲實驗
    3.9 RT-PCR實驗
        3.9.1 細胞總RNA提取
        3.9.2 PCR引物設計及擴增
    3.10 Western Blot實驗
        3.10.1 細胞總蛋白提取
        3.10.2 SDS PAGE凝膠電泳
    3.11 細胞免疫熒光實驗
    3.12 RNA干擾
    3.13 XAV-939處理
    3.14 統(tǒng)計學分析
4 結果
    4.1 人脂肪源性干細胞(ADSC)的表征
    4.2 ADSC促進卵巢癌SK-OV-3細胞增殖并抑制其凋亡
    4.3 ADSC促進卵巢癌SK-OV-3細胞的遷移和侵襲
    4.4 ADSC促進卵巢癌SK-OV-3細胞上皮間質轉化
    4.5 ADSC促進卵巢癌SK-OV-3細胞中SALL4的表達并激活Wnt/β-catenin信號通路
5 討論
6 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3189527