背景宮頸癌是發(fā)病率僅次于乳腺癌的女性常見(jiàn)惡性腫瘤。高危型人乳頭瘤病毒（HPV）的持續(xù)性感染是宮頸癌及癌前病變發(fā)生的首要原因,其中80%以上宮頸癌的發(fā)生與高危型HPV16和18有關(guān)。當(dāng)患者持續(xù)性感染高危型HPV16/18時(shí),E6蛋白在宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)大量合成,并通過(guò)抑制抑癌因子P53活性、激活端粒酶等途徑引起宮頸上皮細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,最終導(dǎo)致宮頸癌前病變及宮頸癌。因此,通過(guò)檢測(cè)宮頸上皮脫落細(xì)胞內(nèi)HPV16/18型E6蛋白含量可為患者宮頸癌及癌前病變的早期篩查及輔助診斷提供依據(jù)。但由于以宮頸上皮脫落細(xì)胞為檢測(cè)樣本,受到取樣誤差的影響大,臨床上缺乏對(duì)其進(jìn)行快速定量檢測(cè)的方法。目的建立以管家蛋白β-Actin為內(nèi)參的人宮頸上皮細(xì)胞中HPV16/18型E6蛋白熒光免疫層析聯(lián)合定量快速檢測(cè)方法,為患者宮頸癌及癌前病變的早期篩查及輔助診斷提供一種靈敏度高,特異性好,操作簡(jiǎn)便成本低廉的檢測(cè)手段。方法1.HPV18 E6蛋白重組表達(dá)及純化:將p ET28a-HPV18E6質(zhì)粒轉(zhuǎn)入BL21（DE3）菌中,采用單因素變量法,對(duì)誘導(dǎo)劑濃度、誘導(dǎo)時(shí)間及誘導(dǎo)溫度進(jìn)行優(yōu)化并表達(dá)目的蛋白,利用Ni親和層析法純化。2.參... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果與分析
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào)：3188030