背景與目的:NK4不僅具有HGF拮抗劑作用,而且具有抗血管生成作用。本實(shí)驗(yàn)在人卵巢癌細(xì)胞SKOV-3中轉(zhuǎn)染NK4cDNA片段,研究NK4在裸鼠體內(nèi)通過(guò)NK細(xì)胞抑制人卵巢癌的發(fā)展。方法:NK4和熒光霉素（Luciferase）表達(dá)的質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染人卵巢癌細(xì)胞SKOV-3,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后,得到實(shí)驗(yàn)組SKOV-3/NK4細(xì)胞和對(duì)照組（SKOV-3/LUC）細(xì)胞,再加上之前沒(méi)有做任何處理的SKOV-3細(xì)胞作為空白對(duì)照。將上述三種細(xì)胞在培養(yǎng)基中培養(yǎng),進(jìn)行如下檢測(cè):1.分別檢測(cè)三組細(xì)胞培養(yǎng)基中NK4蛋白的表達(dá)情況2.將SKOV-3細(xì)胞,分別在上述三種細(xì)胞（SKOV-3/NK4,SKOV-3/LUC和SKOV-3）的培養(yǎng)基當(dāng)中培養(yǎng)后,分別檢測(cè)三組細(xì)胞裂解液當(dāng)中c-Met以及其活化產(chǎn)物p-c-Met的表達(dá)情況。3.用三組腫瘤細(xì)胞（SKOV-3/NK4、SKOV-3/LUC和SKOV-3）分別注射于裸鼠皮下,建立皮下種植瘤模型,比較三組腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。4.將皮下腫瘤結(jié)節(jié)切除離體,用石蠟包埋、切片、免疫組化、CD49b標(biāo)記,在顯微鏡下觀察腫瘤組織當(dāng)中NK細(xì)胞的聚集情況并計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)。結(jié)果:在SKOV-3/NK4... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：34 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料與方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 NK4c DNA轉(zhuǎn)染
    2.3 三組細(xì)胞培養(yǎng)基中NK4 蛋白表達(dá)情況(western blot)
    2.4 c-Met及其活化產(chǎn)物p-c-Met的測(cè)定(western blot)
    2.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立
    2.6 種植瘤體積計(jì)算
    2.7 種植瘤組織中NK細(xì)胞的數(shù)量
    2.8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果用Student′st檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果
    3.1 三組細(xì)胞培養(yǎng)基中NK4蛋白表達(dá)情況
    3.2 NK4 通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性拮抗HGF以抑制c-Met活化
    3.3 裸鼠種植瘤生長(zhǎng)曲線
    3.4 種植瘤組織中NK細(xì)胞的數(shù)量
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述 卵巢癌的基因治療之研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腫瘤免疫逃逸機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 程吉華,趙德強(qiáng).  衛(wèi)生研究. 2018(02)
[2]Gene therapy in pancreatic cancer[J]. Si-Xue Liu,Zhong-Sheng Xia,Ying-Qiang Zhong.  World Journal of Gastroenterology. 2014(37)
[3]NK4基因轉(zhuǎn)染對(duì)人卵巢癌細(xì)胞SKOV-3生物學(xué)特性的影響[J]. 王冬冬,霍乃晨,耿東華,楊志亮,蔡峰,尹少尉,張淑蘭.  中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 2013(02)
[4]卵巢癌的治療現(xiàn)狀回顧[J]. 周璟,黃學(xué)惠.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2012(06)
[5]卵巢癌基因治療研究與進(jìn)展[J]. 席勇,鄧燕杰.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè)). 2007(03)



本文編號(hào)：3184806