【目的】探討mTOR/RPS6信號通路在多囊卵巢綜合征（PCOS）卵巢中的作用及機(jī)制�！痉椒ā看菩許D大鼠40只,隨機(jī)分為正常對照組、生理鹽水對照組和來曲唑?qū)嶒?yàn)組。來曲唑?qū)嶒?yàn)組用來曲唑灌胃三周建立PCOS大鼠模型。定期監(jiān)測三組大鼠體重和動情周期。三周后檢測大鼠血清中雌二醇（E₂）、睪酮（T）、胰島素（I）等的含量,記錄卵巢重量,觀察卵巢組織形態(tài)學(xué)變化,以確認(rèn)PCOS建模成功。應(yīng)用免疫組化和Western blot檢測大鼠卵巢中mTOR、RPS6的表達(dá)及磷酸化水平以及PCNA蛋白在卵巢內(nèi)的表達(dá)情況,TUNEL法檢測卵泡細(xì)胞的凋亡情況。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測體外培養(yǎng)人卵巢顆粒細(xì)胞（KGN）中mTOR、RPS6的表達(dá)及其磷酸化水平,分別觀察mTOR的抑制劑-雷帕霉素和激動劑-MHY1485對KGN凋亡的影響�！窘Y(jié)果】來曲唑?qū)嶒?yàn)組大鼠動情周期紊亂,體重增加明顯,血清激素水平紊亂,卵巢質(zhì)量增加且呈多囊樣改變,提示PCOS模型構(gòu)建成功;來曲唑?qū)嶒?yàn)組大鼠卵巢中mTOR的表達(dá)及磷酸化水平明顯上升,而RPS6的磷酸化顯著下降（P<0.05）;此外,來曲唑?qū)嶒?yàn)組大鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡增... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要英文縮略語
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)動物
    2.2 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞株
    2.3 主要器械和藥品
    2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.5 試劑
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 試劑配制方法
    3.2 動物分組和造模方法
    3.3 大鼠動情周期以及體重監(jiān)測
    3.4 瑞氏染色
    3.5 人卵巢顆粒細(xì)胞(KGN)培養(yǎng)
    3.6 卵巢石蠟切片的制作和HE染色
    3.7 免疫組織化學(xué)染色
    3.8 Westernblot免疫印跡
    3.9 細(xì)胞爬片及免疫細(xì)胞化學(xué)
    3.10 TUNEL凋亡檢測
    3.11 圖像分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 大鼠動情周期改變
    4.2 大鼠體重、卵巢體積和體質(zhì)量指數(shù)的改變
    4.3 大鼠血清激素水平和血糖血脂含量的檢測
    4.4 卵巢形態(tài)學(xué)改變
    4.5 mTOR信號通路相關(guān)蛋白在大鼠卵巢組織中的表達(dá)
    4.6 大鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡檢測
    4.7 大鼠卵巢膜細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞增殖結(jié)果
    4.8 人卵巢顆粒細(xì)胞相關(guān)蛋白的檢測
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的科研成果
課題資助
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]下丘腦-垂體-腎上腺軸和下丘腦-垂體-卵巢軸在多囊卵巢綜合征神經(jīng)內(nèi)分泌功能紊亂中的作用[J]. 王凡,張正紅,肖開轉(zhuǎn),王正朝.  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(05)
[2]短期使用雷帕霉素聯(lián)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可延長小鼠移植心臟時間但不能抑制受體腫瘤發(fā)生[J]. 閆挺,駱晨,楊先模,季磊,羅詩樵.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(02)
[3]來曲唑和脫氫表雄酮建立腎虛痰濕特征信息肥胖PCOS大鼠動物模型的對比研究[J]. 徐曉娟,黃映紅,姚莉娟,鄧琳雯,李宛靜,王秋香,何蘊(yùn)良.  中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志. 2015(05)

博士論文
[1]基于PI3K/AKT信號通路研究新加歸腎丸調(diào)節(jié)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞增殖、凋亡的分子機(jī)制[D]. 龍旭.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2015



本文編號：3181468