研究背景:子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma,EC）是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤,是世界各地婦女癌癥致死的重要原因,為女性生殖道三大惡性腫瘤之一,占女性生殖道惡性腫瘤的20%-30%。近期研究顯示,子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率不斷上升,且有明顯的年輕化趨勢。盡管目前對(duì)子宮內(nèi)膜癌經(jīng)過規(guī)范化治療后,5年生存率有所提升,但對(duì)晚期、低分化子宮內(nèi)膜癌或復(fù)發(fā)型子宮內(nèi)膜癌的治療效果仍不顯著。因此,探究子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生和進(jìn)展的細(xì)胞及分子機(jī)制,新的診斷和預(yù)后標(biāo)記物以及子宮內(nèi)膜癌新的治療策略對(duì)于改善子宮內(nèi)膜癌患者的臨床診斷及預(yù)后具有迫切而現(xiàn)實(shí)的意義。目前大量研究表明,子宮內(nèi)膜癌與肥胖、糖尿病、高血壓或者是長期暴露于無抵抗的雌激素等因素有關(guān),但是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生和發(fā)展的具體機(jī)制仍不明確,基因調(diào)控異常如基因表觀遺傳等不足以完全解釋子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展。因此,尋找新的可替代的靶向策略,對(duì)于子宮內(nèi)膜癌的診斷、病人的治療及預(yù)后的預(yù)測是迫在眉睫的。近年來研究發(fā)現(xiàn),micro RNA（miRNA）在包括子宮內(nèi)膜癌等多種癌癥的分子生物進(jìn)程中起到至關(guān)重要的作用。成熟微小RNA（micro RNA,簡寫為miRN... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
    1.1 子宮內(nèi)膜癌的研究進(jìn)展
        1.1.1 子宮內(nèi)膜癌的疾病發(fā)展現(xiàn)狀
        1.1.2 子宮內(nèi)膜癌的流行病學(xué)
        1.1.3 子宮內(nèi)膜癌的治療方式
    1.2 MIR-29B概述
        1.2.1 miRNA與腫瘤發(fā)生的研究進(jìn)展
        1.2.2 miR-29b與腫瘤發(fā)生的研究進(jìn)展
    1.3 VEGFA與子宮內(nèi)膜癌的研究進(jìn)展
    1.4 本課題的研究思路及意義
第2章 子宮內(nèi)膜癌組織中MIR-29B的表達(dá)及其與臨床病理特征和MVD的關(guān)系
    2.1 背景
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
        2.2.4 主要試劑及配置
        2.2.5 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.6 細(xì)胞傳代
        2.2.7 細(xì)胞凍存
        2.2.8 組織和細(xì)胞系總RNA的提取
        2.2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Reverse Transcription PCR，q RT-PCR）
        2.2.10 免疫組化
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 臨床相關(guān)資料
        2.3.2 qRT-PCR檢測子宮內(nèi)膜癌組織及細(xì)胞中miR-29b的水平
        2.3.3 子宮內(nèi)膜癌組織中miR-29b的表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系
        2.3.4 子宮內(nèi)膜癌組織miR-29b的表達(dá)與微血管密度（MVD）的相關(guān)性
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第3章 MIR-29B調(diào)控子宮內(nèi)膜癌血管新生的作用和機(jī)制
    3.1 背景
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
        3.2.4 主要試劑及配置
        3.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.6 質(zhì)粒及寡核苷酸構(gòu)建
        3.2.7 慢病毒感染目的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        3.2.8 組織和細(xì)胞系總RNA的提取
        3.2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）
        3.2.10 靶基因預(yù)測和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3.2.11 載體構(gòu)建
        3.2.12 lipo3000脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        3.2.13 雙熒光報(bào)告
        3.2.14 Western blot檢測蛋白表達(dá)
        3.2.15 裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)及分組
        3.2.16 裸鼠接種腫瘤后生長狀況的觀察
        3.2.17 免疫組化
        3.2.18 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 生物信息學(xué)軟件預(yù)測miR-29b的靶基因
        3.3.2 miR-29b調(diào)節(jié)VEGFA的表達(dá)
        3.3.3 雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)驗(yàn)證mi R-29b的靶基因
        3.3.4 子宮內(nèi)膜癌組織中VEGFA的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系
        3.3.5 細(xì)胞中miR-29b與VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 的mRNA水平
        3.3.6 細(xì)胞中miR-29b與VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 的蛋白水平
        3.3.7 成功建立裸鼠子宮內(nèi)膜癌移植瘤模型
        3.3.8 miR-29b對(duì)裸鼠移植腫瘤生長的影響
        3.3.9 miR-29b對(duì)裸鼠移植腫瘤血管新生的影響
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
第4章 全文小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3159957