發(fā)布時間：2021-04-14 00:20

　　目的:探討在妊娠期糖尿�。℅DM）患者中miR-138-5p對胰島β細胞功能的影響及其相關作用機制。方法:通過RT-qPCR對比15例GDM患者與15例的正常健康孕婦外周血中miR-138-5p的表達差異; miR-138-5p mimic及inhibitor分別轉染入β細胞系INS-1細胞中,過表達或抑制其在該細胞中的表達水平,并通過RT-qPCR驗證轉染效率;利用MTT增殖實驗、Annexin V-FITC凋亡實驗及胰島素釋放實驗分別檢測miR-138-5p對INS-1細胞的增殖、凋亡和胰島素釋放能力的影響;通過miRNA靶基因預測軟件Target Scan篩選miR-138-5p的目標靶基因,并利用雙熒光素酶基因報告及Western blot實驗進行驗證;功能挽救實驗證實miR-138-5p是否通過靶向調(diào)控其目標基因而發(fā)揮對INS-1細胞的增殖、凋亡及胰島素釋放能力影響; Western blot實驗檢測miR-138-5p在INS-1細胞中作用的分子信號通路。結果:與正常健康孕婦相比,GDM患者外周血中miR-138-5p的表達顯著低表達;在INS-1細胞中轉染miR-138-... 

【文章來源】：中國臨床藥理學與治療學. 2020,25(05)CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 臨床標本
    1.2 細胞系及主要試劑
    1.3 細胞培養(yǎng)和轉染
    1.4 RT-qPCR實驗
    1.5 Ed U染色檢測細胞增殖實驗
    1.6 Ki67法檢測細胞增殖
    1.7 凋亡實驗
    1.8 胰島素釋放實驗
    1.9 雙熒光素酶報告基因檢測
    1.1 0 Western blot
    1.1 1 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 GDM患者外周血中miR-138-5p表達
    2.2 轉染后β細胞中miR-138-5p的表達
    2.3 miR-138-5p對β細胞增殖的影響
    2.4 miR-138-5p對β細胞凋亡的影響
    2.5 miR-138-5p對β細胞胰島素分泌的影響
    2.6 miR-138-5p與HIF-1α的靶向關系
    2.7 功能挽救實驗
    2.8 miR-138-5p對β細胞中PI3K/AKT信號通路的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]妊娠期糖尿病的兩種不同診斷標準對圍產(chǎn)期母嬰結局的影響[J]. 王蕓,石中華.  南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2013(11)
[2]妊娠期糖尿病病因學研究進展[J]. 張婭,徐先明.  中國實用婦科與產(chǎn)科雜志. 2013(04)
[3]HIF-1α、VEGF在妊娠期糖尿病胎盤組織中的表達及其與胎兒缺氧的關系[J]. 楊曉菊,楊宗利,王學芹,戴淑真.  實用婦產(chǎn)科雜志. 2012(11)
[4]妊娠期糖尿病胎盤組織缺氧誘導因子1α及血管內(nèi)皮生長因子的表達與妊娠結局的關系[J]. 楊曉菊,徐琳,楊宗利,戴淑真.  中華糖尿病雜志. 2013 (05)



本文編號：3136284