原代人滋養(yǎng)層干細胞維持培養(yǎng)與分化能力鑒定以及TEAD4、CDX2、GATA3在人滋養(yǎng)層分化過程中的作用研究
發(fā)布時間:2021-04-12 12:44
正常發(fā)育的胎盤是維持正常妊娠的必要條件。在胎盤發(fā)育過程中,或者說從滋養(yǎng)外胚層細胞分化為終末滋養(yǎng)層細胞的過程中,任何一步異常都有可能引起妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生。因此,建立合適的滋養(yǎng)層發(fā)育研究模型,有助于揭示發(fā)育過程相關(guān)的基因表達調(diào)控機制,闡明異常妊娠時的病理生理學(xué)過程,以及提供產(chǎn)科疾病診療相關(guān)的新亮點;而在此我們提出的人滋養(yǎng)層干細胞模型,在相關(guān)研究中將有可能產(chǎn)生更多優(yōu)勢。人滋養(yǎng)層干細胞模型的建立由日本科學(xué)家在近期首次報道,而國內(nèi)尚未有報道。對此,我們利用已建成的人滋養(yǎng)層干細胞系,在國內(nèi)首次進行人滋養(yǎng)層干細胞維持培養(yǎng)與分化能力鑒定的研究。具體為,利用日本學(xué)者分離的人滋養(yǎng)層干細胞系hTSblast,我們先建立專門的細胞維持培養(yǎng)體系,再對期間持續(xù)培養(yǎng)的細胞進行人滋養(yǎng)層干細胞特征的鑒定,內(nèi)容包括人滋養(yǎng)層細胞特征的鑒定,以及相應(yīng)干細胞特征的鑒定。對于人滋養(yǎng)層細胞特征鑒定,我們發(fā)現(xiàn),hTSblast符合若干人滋養(yǎng)層細胞判別標準,包括表達KRT7、GATA3,以及表達19號染色體miRNA簇(C19MC)的miRNA;對于相應(yīng)干細胞特征的鑒定,我們發(fā)現(xiàn),hTSblast具有一定增殖能力,也能發(fā)生向絨毛外滋...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2_2?TEAD4缺失的人胚胎干細胞向滋養(yǎng)層分化能力下降Hl-rf/f/M^hESCs?undergoes??attenuated?trophoblast?transition?(?a:??
。勹?[Ti??Fe:|J_l*?::MIj?e:Lii?Li??o'???PGF?HCGB?.?KRT7??????????*?U??2???^^?^"I?0.015?_?m*cv?4〇〇?“?**??I.?6-?I?■?0.010?.?j?IEE:r3?|?300?|?Hi?=H::i^c^??!藝?4?__-匪?■?I?200?B?■???H1.7SM^*GArA3??令?令??色?<s^??HCGA?HLA-G?HCG?D9??圖2-5過表達CDX2/GATA3能使m-TEAD4_/_?hESCs向滋養(yǎng)層分化能力回升Impaired??trophoblast?transition?from?Hl-r^D^"7?hESCs?could?also?be?restored?by?overexpressing??Gd7>^orC7)A7?(?a:?qRT-PCR?確定?CDA7/Gj7^?過表達效果,GJPZ)//為內(nèi)參,Hl+EV??和?HlTEAD4-’-+EVhESCs?為對照,*P<0.05;?b:?BAP?分化?DO、D7、D9?5?倍鏡下細胞形??態(tài)圖,標尺為l〇〇f_im,以及D9?10倍7/07、077染色免疫熒光圖,標尺為50阿,Hl+EV??53??
.ev??_?flL?。〇?〇?*1?H1*COX2??ILuiillLiLJ??/?/?/?"、、///?/""??d?〇cT4?SOX17?e?KRT7?KRT7?KRT7?KRH??PAX6?CALPONIN?GATA3?GATA3?CDX2?C0X2??DAPI?DAPI?DAPI?DAPI?DAPI?DAPI??H■國?■■?■■??一?__?■■圃■??-_■?■國■■??H}*GATA3?H1*EV?H1.05X2?HUEV??圖2-7過表達GATA3而不是CDX2能引起HI自發(fā)滋養(yǎng)層分化(7d7^-overexpressed?hESCs??undergo?spontaneous?and?non-directional?trophoblast?transition?in?absence?of?BMP4??的81:111611((3:5倍鏡下細胞形態(tài)圖,標尺為200屮11,1^1+£\/'為對照;1):91^。?01確??定G^7^/CDA2過表達效果,GJPD//為內(nèi)參,*P<0.05;?c:?qRT-PCR檢測多能性基因??OCT4、SOX2、NANOG,EM層分化_?PAX6、SOXI、T、RUNXI、FOXA2、SOX17?及滋??養(yǎng)層分化雜因尺/?77、//以-(7、《7水CC^表達水平,GJPD//為內(nèi)參;cl:?10倍鏡免疫熒??光圖,多能性基因OCR及外沖/內(nèi)三胚層基因以別、C4LPOAWV、50\77染色,H1+EV??57??
本文編號:3133318
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2_2?TEAD4缺失的人胚胎干細胞向滋養(yǎng)層分化能力下降Hl-rf/f/M^hESCs?undergoes??attenuated?trophoblast?transition?(?a:??
。勹?[Ti??Fe:|J_l*?::MIj?e:Lii?Li??o'???PGF?HCGB?.?KRT7??????????*?U??2???^^?^"I?0.015?_?m*cv?4〇〇?“?**??I.?6-?I?■?0.010?.?j?IEE:r3?|?300?|?Hi?=H::i^c^??!藝?4?__-匪?■?I?200?B?■???H1.7SM^*GArA3??令?令??色?<s^??HCGA?HLA-G?HCG?D9??圖2-5過表達CDX2/GATA3能使m-TEAD4_/_?hESCs向滋養(yǎng)層分化能力回升Impaired??trophoblast?transition?from?Hl-r^D^"7?hESCs?could?also?be?restored?by?overexpressing??Gd7>^orC7)A7?(?a:?qRT-PCR?確定?CDA7/Gj7^?過表達效果,GJPZ)//為內(nèi)參,Hl+EV??和?HlTEAD4-’-+EVhESCs?為對照,*P<0.05;?b:?BAP?分化?DO、D7、D9?5?倍鏡下細胞形??態(tài)圖,標尺為l〇〇f_im,以及D9?10倍7/07、077染色免疫熒光圖,標尺為50阿,Hl+EV??53??
.ev??_?flL?。〇?〇?*1?H1*COX2??ILuiillLiLJ??/?/?/?"、、///?/""??d?〇cT4?SOX17?e?KRT7?KRT7?KRT7?KRH??PAX6?CALPONIN?GATA3?GATA3?CDX2?C0X2??DAPI?DAPI?DAPI?DAPI?DAPI?DAPI??H■國?■■?■■??一?__?■■圃■??-_■?■國■■??H}*GATA3?H1*EV?H1.05X2?HUEV??圖2-7過表達GATA3而不是CDX2能引起HI自發(fā)滋養(yǎng)層分化(7d7^-overexpressed?hESCs??undergo?spontaneous?and?non-directional?trophoblast?transition?in?absence?of?BMP4??的81:111611((3:5倍鏡下細胞形態(tài)圖,標尺為200屮11,1^1+£\/'為對照;1):91^。?01確??定G^7^/CDA2過表達效果,GJPD//為內(nèi)參,*P<0.05;?c:?qRT-PCR檢測多能性基因??OCT4、SOX2、NANOG,EM層分化_?PAX6、SOXI、T、RUNXI、FOXA2、SOX17?及滋??養(yǎng)層分化雜因尺/?77、//以-(7、《7水CC^表達水平,GJPD//為內(nèi)參;cl:?10倍鏡免疫熒??光圖,多能性基因OCR及外沖/內(nèi)三胚層基因以別、C4LPOAWV、50\77染色,H1+EV??57??
本文編號:3133318
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/3133318.html
最近更新
教材專著