細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶在miR-193a5p調(diào)控卵巢癌細(xì)胞增殖及上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)變中的作用
發(fā)布時間:2021-03-10 01:03
目的:探討miR-193a-5p靶向CDK14并調(diào)控卵巢癌細(xì)胞OVAC的增殖和上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)變(EMT)的作用。方法:通過Target Scan Human分析miR-193a-5p與CDK14的匹配情況,通過熒光素酶報告系統(tǒng)檢測miR-193a-5p靶向CDK14情況;在miR-193a-5p mimics過表達(dá)或者miR-193a-5p inhibitor基因沉默miR-193a-5p的情況下,采用免疫印跡檢測CDK14,EMT相關(guān)蛋白質(zhì)E-cadherin、vimentin、fibronectin和N-cadherin的表達(dá)量,采用CCK-8檢測卵巢癌細(xì)胞OVAC增殖情況,MMT檢測卵巢癌細(xì)胞OVAC的細(xì)胞活力。結(jié)果:miR-193a-5p靶向CDK14的3‘UTR;過表達(dá)miR-193a-5后,CDK14的表達(dá)下降,EMT相關(guān)蛋白質(zhì)E-cadherin的表達(dá)上升,vimentin、fibronectin和N-cadherin的表達(dá)下降,卵巢癌細(xì)胞OVAC的增殖和細(xì)胞活力均增加;同時,基因沉默miR-193a-5p后,CDK14的表達(dá)上升,EMT相關(guān)蛋白質(zhì)E-cadherin的表達(dá)...
【文章來源】:中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2020,36(02)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 熒光素酶報告試驗檢測miR-193a-5p靶向CDK14
1.3 細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
1.4 實時熒光定量PCR檢測miR-193a-5p的相對表達(dá)量
1.5 免疫印跡檢測CDK14、E-cadherin、vimentin、fibronectin、TUBULIN的表達(dá)
1.6 MTT試驗檢測UVAC細(xì)胞活力
1.7 CCK-8實驗檢測UVAC細(xì)胞增殖
1.8 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 轉(zhuǎn)染miR-193a-5p mimic后對CDK14 3’UTR的熒光素酶相對活性的影響
2.2 過表達(dá)miR-193a-5p后對卵巢癌細(xì)胞OVAC的增殖、細(xì)胞活力和EMT的影響
2.3 基因沉默miR-193a-5p后對卵巢癌細(xì)胞OVAC的增殖、細(xì)胞活力和EMT的影響
3 討論
本文編號:3073781
【文章來源】:中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2020,36(02)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 熒光素酶報告試驗檢測miR-193a-5p靶向CDK14
1.3 細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
1.4 實時熒光定量PCR檢測miR-193a-5p的相對表達(dá)量
1.5 免疫印跡檢測CDK14、E-cadherin、vimentin、fibronectin、TUBULIN的表達(dá)
1.6 MTT試驗檢測UVAC細(xì)胞活力
1.7 CCK-8實驗檢測UVAC細(xì)胞增殖
1.8 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 轉(zhuǎn)染miR-193a-5p mimic后對CDK14 3’UTR的熒光素酶相對活性的影響
2.2 過表達(dá)miR-193a-5p后對卵巢癌細(xì)胞OVAC的增殖、細(xì)胞活力和EMT的影響
2.3 基因沉默miR-193a-5p后對卵巢癌細(xì)胞OVAC的增殖、細(xì)胞活力和EMT的影響
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