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miR-34c-5p/Notch在子宮內(nèi)膜異位癥上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)中的作用

發(fā)布時(shí)間:2021-03-08 10:17
  目的:子宮內(nèi)膜異位癥是一種常見的良性婦科疾病,具有惡性腫瘤的生長特征,但該病的發(fā)病機(jī)制仍不清楚。眾所周知,微小核糖核酸(miRNA)參與了與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)展有關(guān)的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。本研究探索了miR-34c-5p在子宮內(nèi)膜異位癥中的作用。方法:高通量測序(HTS)結(jié)果顯示,子宮內(nèi)膜異位癥(后簡稱內(nèi)異癥)患者異位內(nèi)膜(ecEM)中miR-34c-5p表達(dá)降低。劃痕愈合試驗(yàn)和transwell入侵試驗(yàn)表明,miR-34c-5p抑制Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞的侵襲和遷移。雙熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)證明miR-34c-5p與Notch1 3’UTR的靶向調(diào)控關(guān)系,Western blot顯示miR-34c-5p促進(jìn)Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞中E-鈣黏蛋白的表達(dá),并抑制Notch1,N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)。miR-34c-5p被敲減后,得到與上述相反的結(jié)果。使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot測定內(nèi)異癥患者的ecEM和在位子宮內(nèi)膜(euEM)中Notch1,E-鈣黏蛋白,N-鈣黏蛋白和波形蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.HTS和qR... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

miR-34c-5p/Notch在子宮內(nèi)膜異位癥上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)中的作用


聚類分析顯示6例內(nèi)異癥患者的euEM和ecEM中差異表達(dá)的miRNA其中共有217個(gè)miRNA表達(dá)存在差異,其中包括96個(gè)miRNA上調(diào)以及121個(gè)下調(diào)

火山,蛋白,波形蛋白


中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14意義)。圖2.euEM和ecEM中差異表達(dá)的miRNA圖A.火山圖顯示了兩種不同組織之間的差異表達(dá)miRNA。紅點(diǎn)表示上調(diào),綠點(diǎn)表示下調(diào)。圖B.通過qRT-PCR在euEM和ecEM組織中miR-34c-5p的表達(dá)水平。***P<0.00013.2miR-34c-5p對內(nèi)異癥中EMT的調(diào)節(jié)使用miR-34c-5pmimics,miR-NC,miR-34c-5pinhibitor和inhibitor-NC轉(zhuǎn)染Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞系,以研究EEC中miR-34c-5p對EMT的調(diào)控作用。Westernblot檢測E-鈣黏蛋白,N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)。如圖3所示,與對照組相比,miR-34c-5p敲除組的E-鈣黏蛋白表達(dá)降低,N-鈣黏蛋白和波形蛋白表達(dá)增加。在miR-34c-5p過表達(dá)組中,兩種細(xì)胞系中E-鈣黏蛋白的水平均升高,而N-鈣黏蛋白和波形蛋白的水平降低。圖3.Westernblot分析miR-34c-5p在Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞中的過度表達(dá)和敲低以及E-鈣黏蛋白,N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)。*P<0.05,**P<0.01。

蛋白,波形蛋白,細(xì)胞,細(xì)胞系


中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14意義)。圖2.euEM和ecEM中差異表達(dá)的miRNA圖A.火山圖顯示了兩種不同組織之間的差異表達(dá)miRNA。紅點(diǎn)表示上調(diào),綠點(diǎn)表示下調(diào)。圖B.通過qRT-PCR在euEM和ecEM組織中miR-34c-5p的表達(dá)水平。***P<0.00013.2miR-34c-5p對內(nèi)異癥中EMT的調(diào)節(jié)使用miR-34c-5pmimics,miR-NC,miR-34c-5pinhibitor和inhibitor-NC轉(zhuǎn)染Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞系,以研究EEC中miR-34c-5p對EMT的調(diào)控作用。Westernblot檢測E-鈣黏蛋白,N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)。如圖3所示,與對照組相比,miR-34c-5p敲除組的E-鈣黏蛋白表達(dá)降低,N-鈣黏蛋白和波形蛋白表達(dá)增加。在miR-34c-5p過表達(dá)組中,兩種細(xì)胞系中E-鈣黏蛋白的水平均升高,而N-鈣黏蛋白和波形蛋白的水平降低。圖3.Westernblot分析miR-34c-5p在Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞中的過度表達(dá)和敲低以及E-鈣黏蛋白,N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)。*P<0.05,**P<0.01。


本文編號:3070887

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