目的:子宮內(nèi)膜異位癥是一種常見的良性婦科疾病,具有惡性腫瘤的生長特征,但該病的發(fā)病機制仍不清楚。眾所周知,微小核糖核酸（miRNA）參與了與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)展有關(guān)的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。本研究探索了miR-34c-5p在子宮內(nèi)膜異位癥中的作用。方法:高通量測序（HTS）結(jié)果顯示,子宮內(nèi)膜異位癥（后簡稱內(nèi)異癥）患者異位內(nèi)膜（ecEM）中miR-34c-5p表達降低。劃痕愈合試驗和transwell入侵試驗表明,miR-34c-5p抑制Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞的侵襲和遷移。雙熒光素酶基因報告系統(tǒng)證明miR-34c-5p與Notch1 3’UTR的靶向調(diào)控關(guān)系,Western blot顯示miR-34c-5p促進Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞中E-鈣黏蛋白的表達,并抑制Notch1,N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達。miR-34c-5p被敲減后,得到與上述相反的結(jié)果。使用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot測定內(nèi)異癥患者的ecEM和在位子宮內(nèi)膜（euEM）中Notch1,E-鈣黏蛋白,N-鈣黏蛋白和波形蛋白表達水平。結(jié)果:1.HTS和qR... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

聚類分析顯示6例內(nèi)異癥患者的euEM和ecEM中差異表達的miRNA其中共有217個miRNA表達存在差異，其中包括96個miRNA上調(diào)以及121個下調(diào)

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14意義）。圖2.euEM和ecEM中差異表達的miRNA圖A.火山圖顯示了兩種不同組織之間的差異表達miRNA。紅點表示上調(diào)，綠點表示下調(diào)。圖B.通過qRT-PCR在euEM和ecEM組織中miR-34c-5p的表達水平。***P<0.00013.2miR-34c-5p對內(nèi)異癥中EMT的調(diào)節(jié)使用miR-34c-5pmimics，miR-NC，miR-34c-5pinhibitor和inhibitor-NC轉(zhuǎn)染Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞系，以研究EEC中miR-34c-5p對EMT的調(diào)控作用。Westernblot檢測E-鈣黏蛋白，N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達。如圖3所示，與對照組相比，miR-34c-5p敲除組的E-鈣黏蛋白表達降低，N-鈣黏蛋白和波形蛋白表達增加。在miR-34c-5p過表達組中，兩種細(xì)胞系中E-鈣黏蛋白的水平均升高，而N-鈣黏蛋白和波形蛋白的水平降低。圖3.Westernblot分析miR-34c-5p在Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞中的過度表達和敲低以及E-鈣黏蛋白，N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達。*P<0.05，**P<0.01。

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14意義）。圖2.euEM和ecEM中差異表達的miRNA圖A.火山圖顯示了兩種不同組織之間的差異表達miRNA。紅點表示上調(diào)，綠點表示下調(diào)。圖B.通過qRT-PCR在euEM和ecEM組織中miR-34c-5p的表達水平。***P<0.00013.2miR-34c-5p對內(nèi)異癥中EMT的調(diào)節(jié)使用miR-34c-5pmimics，miR-NC，miR-34c-5pinhibitor和inhibitor-NC轉(zhuǎn)染Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞系，以研究EEC中miR-34c-5p對EMT的調(diào)控作用。Westernblot檢測E-鈣黏蛋白，N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達。如圖3所示，與對照組相比，miR-34c-5p敲除組的E-鈣黏蛋白表達降低，N-鈣黏蛋白和波形蛋白表達增加。在miR-34c-5p過表達組中，兩種細(xì)胞系中E-鈣黏蛋白的水平均升高，而N-鈣黏蛋白和波形蛋白的水平降低。圖3.Westernblot分析miR-34c-5p在Ishikawa和End1/E6E7細(xì)胞中的過度表達和敲低以及E-鈣黏蛋白，N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達。*P<0.05，**P<0.01。


本文編號：3070887