目的探討微小RNA-135b-5p（miR-135b-5p）通過(guò)靶向下調(diào)RECK（reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs）促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌（EC）順鉑耐藥性的分子機(jī)制。方法用順鉑處理Ishikawa細(xì)胞建立順鉑耐藥Ishikawa/CDDP細(xì)胞,將細(xì)胞分為4組:空白組、第1轉(zhuǎn)染組、第2轉(zhuǎn)染組以及第3轉(zhuǎn)染組。第1轉(zhuǎn)染組不做任何處理,第2轉(zhuǎn)染組、第3轉(zhuǎn)染組以及第4轉(zhuǎn)染組在細(xì)胞中分別轉(zhuǎn)染miR-135b-5p mimics、pcDNA-RECK和miR-135b-5p mimics+pcDNA-RECK。用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)順鉑敏感性和耐藥性患者組織中以及Ishikawa和Ishikawa/CDDP細(xì)胞中miR-135b-5p的表達(dá)情況;蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)RECK蛋白的表達(dá);克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲情況。結(jié)果空白組和第1轉(zhuǎn)染組中miR-135b-5p的表達(dá)分別為1.02±0.09,1.54±0.11;這2組的克隆形成結(jié)果分別為50.52±9.21,137.65±... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(15)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)[2]、分組和處置
        2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與分組
        2.3 以RT-qPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-135b-5p表達(dá)水平[2]
        2.4 以CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖情況[4]
        2.5 以細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆形成情況[5]
        2.6 以Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲情況[5]
        2.7 以雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)雙熒光素酶活性[4]
        2.8 以蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)RECK蛋白表達(dá)水平
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 不同濃度CDDP對(duì)Ishikawa和Ishikawa/CDDP細(xì)胞的增殖率影響
    2 過(guò)表達(dá)miR-135b-5p促進(jìn)Ishikawa/CDDP細(xì)胞的順鉑耐藥性
        2.1 2組間miR-221-3p的表達(dá)量比較
        2.2 2組間克隆形成結(jié)果比較
        2.3 2組間遷移和侵襲比較
    3 miR-135b-5p直接靶向抑制RECK表達(dá)
    4 miR-135b-5p通過(guò)調(diào)控RECK增加Ishikawa/CDDP細(xì)胞的順鉑耐藥性
        4.1 幾組RECK蛋白表達(dá)比較
        4.2 幾組克隆形成結(jié)果比較
        4.3 幾組遷移和侵襲結(jié)果比較
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-22-3p通過(guò)Snail1調(diào)控上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的遷移和侵襲[J]. 賀紅杰,李明亮,許廣松.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2019(18)
[2]微小RNA與結(jié)直腸癌化療敏感性的研究現(xiàn)狀[J]. 吳宏磊,賀雪,陳進(jìn)寶,袁澤婷,邱艷艷,徐可,殷佩浩.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2019(16)
[3]牛蒡子苷元對(duì)人Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖抑制的研究[J]. 徐軍娟,裘雅芬,馮燕.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2016(12)



本文編號(hào)：3050619