目的:通過測定Nrf2、GPX3及膠原代謝相關(guān)蛋白在盆腔器官脫垂（Pelvic organ prolapse,POP）組及對照組陰道壁組織中的表達(dá)情況,分析Nrf2、GPX3與膠原蛋白之間的相關(guān)性,初步探討Nrf2信號通路在盆腔器官脫垂患者陰道壁組織中的作用機(jī)制,為研究POP的發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:本研究選取2018年3月-2018年9月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院接受手術(shù)治療的患者100例,其中POP患者（病例組）50例,因子宮良性病變行全子宮切除的患者（對照組）50例,POP患者分期均為Ⅲ-Ⅳ度。收集兩組患者陰道壁組織,應(yīng)用免疫組化（SP）法、Western-blot法以及RT-PCR法檢測兩組患者的陰道壁組織中Nrf2、GPX3、MMP-2、TIMP-1、COLⅠ及COLⅢ的表達(dá)情況,并分析Nrf2與GPX3、COLⅠ及COLⅢ的表達(dá)情況是否存在相關(guān)性。選取POP組及對照組陰道壁組織各3例進(jìn)行成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng),應(yīng)用Western-blot法以及RT-PCR法檢測Nrf2、GPX3、MMP-2、TIMP-1、COLⅠ及COLⅢ的表達(dá)情況。利用MTT法檢測兩組成纖維細(xì)胞的增殖能力。... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器與設(shè)備
        2.1.3 主要試劑的制備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 研究對象
        2.2.2 標(biāo)本制備
        2.2.3 免疫組織化學(xué)法檢測蛋白表達(dá)水平
        2.2.4 Western-blot方法檢測各指標(biāo)蛋白的表達(dá)水平
        2.2.5 RT-PCR法檢測m RNA表達(dá)水平
    2.3 陰道壁組織成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)、純化、鑒定、傳代及凍存:
        2.3.1 細(xì)胞原代培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞的純化
        2.3.3 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
        2.3.4 免疫細(xì)胞化學(xué)對陰道壁成纖維細(xì)胞的鑒定
        2.3.5 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇
    2.4 細(xì)胞活力檢測MTT
    2.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.5.1 RT-PCR法檢測轉(zhuǎn)染效率
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 患者一般資料
    3.2 免疫組化法檢測蛋白水平
    3.3 Western-Blot法檢測各蛋白表達(dá)情況
    3.4 RT-PCR法檢測各指標(biāo)的m RNA表達(dá)情況
    3.5 對免疫組化結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析
    3.6 免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定結(jié)果
    3.7 MTT法檢測兩組成纖維細(xì)胞增殖能力
    3.8 轉(zhuǎn)染siRNA Nrf2
    3.9 MTT法檢測轉(zhuǎn)染si RNA Nrf2 后陰道壁成纖維細(xì)胞的增殖活力
3 討論
參考文獻(xiàn)
本研究創(chuàng)新性自我評價
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]中國成年女性盆腔臟器脫垂的流行病學(xué)調(diào)查研究[D]. 李志毅.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2019



本文編號：3022071