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Nrf2、GPX3在盆腔臟器脫垂患者陰道壁組織中的表達(dá)及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-02-07 10:13
  目的:通過(guò)測(cè)定Nrf2、GPX3及膠原代謝相關(guān)蛋白在盆腔器官脫垂(Pelvic organ prolapse,POP)組及對(duì)照組陰道壁組織中的表達(dá)情況,分析Nrf2、GPX3與膠原蛋白之間的相關(guān)性,初步探討Nrf2信號(hào)通路在盆腔器官脫垂患者陰道壁組織中的作用機(jī)制,為研究POP的發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:本研究選取2018年3月-2018年9月在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院接受手術(shù)治療的患者100例,其中POP患者(病例組)50例,因子宮良性病變行全子宮切除的患者(對(duì)照組)50例,POP患者分期均為Ⅲ-Ⅳ度。收集兩組患者陰道壁組織,應(yīng)用免疫組化(SP)法、Western-blot法以及RT-PCR法檢測(cè)兩組患者的陰道壁組織中Nrf2、GPX3、MMP-2、TIMP-1、COLⅠ及COLⅢ的表達(dá)情況,并分析Nrf2與GPX3、COLⅠ及COLⅢ的表達(dá)情況是否存在相關(guān)性。選取POP組及對(duì)照組陰道壁組織各3例進(jìn)行成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng),應(yīng)用Western-blot法以及RT-PCR法檢測(cè)Nrf2、GPX3、MMP-2、TIMP-1、COLⅠ及COLⅢ的表達(dá)情況。利用MTT法檢測(cè)兩組成纖維細(xì)胞的增殖能力。... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】:50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器與設(shè)備
        2.1.3 主要試劑的制備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 研究對(duì)象
        2.2.2 標(biāo)本制備
        2.2.3 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)蛋白表達(dá)水平
        2.2.4 Western-blot方法檢測(cè)各指標(biāo)蛋白的表達(dá)水平
        2.2.5 RT-PCR法檢測(cè)m RNA表達(dá)水平
    2.3 陰道壁組織成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)、純化、鑒定、傳代及凍存:
        2.3.1 細(xì)胞原代培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞的純化
        2.3.3 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
        2.3.4 免疫細(xì)胞化學(xué)對(duì)陰道壁成纖維細(xì)胞的鑒定
        2.3.5 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇
    2.4 細(xì)胞活力檢測(cè)MTT
    2.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.5.1 RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 患者一般資料
    3.2 免疫組化法檢測(cè)蛋白水平
    3.3 Western-Blot法檢測(cè)各蛋白表達(dá)情況
    3.4 RT-PCR法檢測(cè)各指標(biāo)的m RNA表達(dá)情況
    3.5 對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析
    3.6 免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定結(jié)果
    3.7 MTT法檢測(cè)兩組成纖維細(xì)胞增殖能力
    3.8 轉(zhuǎn)染siRNA Nrf2
    3.9 MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染si RNA Nrf2 后陰道壁成纖維細(xì)胞的增殖活力
3 討論
參考文獻(xiàn)
本研究創(chuàng)新性自我評(píng)價(jià)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]丹參素通過(guò)調(diào)節(jié)Nrf2/HO-1和NF-κκB/IκBα信號(hào)通路發(fā)揮抗大鼠肝纖維化的作用[J]. 王蓉,王靜,宋復(fù)興,李勝男,原永芳.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2019(10)
[2]地爾硫卓對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的大鼠心肌纖維化的保護(hù)作用研究[J]. 范麗,姚亞妮,李瑜.  心肺血管病雜志. 2019(07)
[3]黃芪總黃酮對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞氧化應(yīng)激和炎癥因子分泌的影響[J]. 任偉亮,焦永偉,張健,王響,齊立卿,杜雙慶.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019(04)
[4]氧化應(yīng)激對(duì)宮旁韌帶成纖維細(xì)胞細(xì)胞彈性蛋白及轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2表達(dá)的影響[J]. 聶明朝,王小花,葉文嬌.  廣東醫(yī)學(xué). 2018(07)
[5]關(guān)節(jié)鏡清理聯(lián)合玻璃酸鈉關(guān)節(jié)腔注射對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液Wnt/β-catenin通路的影響[J]. 李剛,高超,張鵬,王小武,田大為,戴繁林.  海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(04)
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[8]氧化應(yīng)激對(duì)盆底器官脫垂患者子宮旁韌帶組織細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)代謝的影響[J]. 楊青,劉成,李秉樞,張琦釩,李洋,胡鳴,趙楊,洪莉.  中國(guó)計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科. 2016(01)
[9]TLR4和Nrf2與子宮脫垂發(fā)生的相關(guān)性[J]. 黃金玲,丁錦麗,王曉航,程艷香.  中國(guó)老年學(xué)雜志. 2013(22)
[10]機(jī)械壓應(yīng)力通過(guò)TGF-β1通路治療增生性瘢痕的分子機(jī)制研究[J]. 申寬宏,黃東,吳偉熾,黃永軍,牟勇.  中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志. 2013(03)

博士論文
[1]中國(guó)成年女性盆腔臟器脫垂的流行病學(xué)調(diào)查研究[D]. 李志毅.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2019



本文編號(hào):3022071

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