目的探討染色體微陣列分析（chromosomal microarray analysis,CMA）在先天性心臟病（congenital heart disease,CHD）胎兒遺傳學(xué)診斷中的臨床應(yīng)用價值,為推薦全基因組CMA技術(shù)作為CHD胎兒產(chǎn)前常規(guī)分子診斷方法提供數(shù)據(jù)支持。方法1.收集2016年2月至2017年5月在福建省婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心因胎兒超聲心動圖診斷CHD而接受侵入性產(chǎn)前診斷的72例胎兒羊水或臍血樣本,同時進(jìn)行染色體核型分析和CMA檢測。并根據(jù)單一心臟結(jié)構(gòu)畸形、多發(fā)心臟結(jié)構(gòu)畸形不合并心外異常、心內(nèi)合并心外異常分為3組;2.使用Bio Chain試劑盒對羊水細(xì)胞提取基因組DNA,使用QIAamp DNA Blood Mini Kit試劑盒對外周血和臍帶血樣本提取基因組DNA,并用Nanodrop 2000微量紫外分光光度計測定DNA的濃度與純度;3.按照Affymetrix公司提供的Cyto Scan 750K芯片標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗操作流程對樣本DNA進(jìn)行消化、連接、擴(kuò)增、純化、片段化、標(biāo)記信號、與芯片雜交、洗片染色及掃描芯片操作;4.使用試劑盒配套的Ch AS軟件對掃描結(jié)果中的.... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實(shí)驗技術(shù)路線圖

圖 1.2 CMA 實(shí)驗操作流程4.5.1 實(shí)驗準(zhǔn)備1）取出-20℃保存的 10×Nsp I buffer（藍(lán)色管蓋）、100×BSA（白色黑圈管蓋）、試劑盒中提供的基因組 DNA，室溫融化；2）將 Chilled Affymetrix Nuclease-Free Water（簡稱 NF 水），分裝到 1.5ml EP 管備用（NF 水分裝在超凈工作臺進(jìn)行，用時置于冰上，平時 4℃保存）；3）打開 9700PCR 儀，選定消化程序，待熱蓋升溫完畢，暫停程序待用，見圖 1.3；圖 1.3 消化程序4）待測樣本 DNA 濃度若低于 10 ng/μl 應(yīng)放棄使用，或重新提取；高于 50 ng/μl，

圖 1.2 CMA 實(shí)驗操作流程 10×Nsp I buffer（藍(lán)色管蓋）、100×BSA因組 DNA，室溫融化；metrix Nuclease-Free Water（簡稱 NF 水），超凈工作臺進(jìn)行，用時置于冰上，平時 4℃儀，選定消化程序，待熱蓋升溫完畢，暫停

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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