目的:建立基于孕酮的精子優(yōu)選方法并且研究相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制。方法:設(shè)計(jì)制作了一種模擬人類女性生殖系統(tǒng)的長(zhǎng)距離通道裝置,用不同的孕酮濃度及其位置制備精子優(yōu)選條件,并通過檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)不同位置處的精子濃度加以驗(yàn)證。用Diff-quik染色、染色質(zhì)擴(kuò)散法和膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶染色法分別檢測(cè)精子優(yōu)選前后的形態(tài)、DNA片段和凋亡狀態(tài),評(píng)價(jià)所建立方法的效果。用熱休克蛋白90（Hsp90）特異性抑制劑格爾德霉素處理孕酮誘導(dǎo)的人精子,然后分別經(jīng)金霉素染色評(píng)價(jià)獲能、計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀（CASA）分析運(yùn)動(dòng)參數(shù)和超激活運(yùn)動(dòng)百分率。用間接免疫熒光染色分別檢測(cè)Hsp90與細(xì)胞分裂周期蛋白Cdc37（Cdc37）、內(nèi)皮型一氧化碳合酶（eNOS）共定位情況;通過免疫共沉淀技術(shù)證明Hsp90與其共伴侶Cdc37的相互作用。用免疫印跡方法分析Hsp90在人精子獲能期間表達(dá)情況以及格爾德霉素處理對(duì)其影響;分析蛋白激酶A（PKA）抑制劑H-89和蛋白激酶C（PKC）抑制劑Go6983在精子獲能期間對(duì)Hsp90的絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸磷酸化影響,Hsp90抑制劑17-AAG對(duì)人精子酪氨酸蛋白激酶Src活性位點(diǎn)Y4... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：127 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文摘要
縮略詞索引表
引言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 基于孕酮建立的優(yōu)選方法提高人精子質(zhì)量
    1.1 材料和方法
    1.2 結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 孕酮調(diào)節(jié)人精子功能受Hsp90介導(dǎo)
    2.1 材料與方法
    2.2 結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 Hsp90在精子獲能期間的調(diào)節(jié)機(jī)制
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)論
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷及在讀期間取得成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]熱休克蛋白90與人精子氧化應(yīng)激相關(guān)性的初步研究[J]. 謝海鋒,李坤,陳愛君,倪崖.  醫(yī)學(xué)研究雜志. 2014(07)
[2]Cryopreservation-induced decrease in heat-shock protein 90 in human spermatozoa and its mechanism[J]. <author>Wen-Lei CAO, Yi-Xin WANG, Zu-Qiong XIANG, Zheng LI Shanghai Institute of Andrology, Renji Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200001, China.  Asian Journal of Andrology. 2003(01)



本文編號(hào)：2997980