Talin1/miR-1285-3p/PIPK1信號(hào)軸通過(guò)PI3K/AKT通路調(diào)控子宮內(nèi)膜粘附作用的分子機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-19 07:00
目的:探究Talin1對(duì)子宮內(nèi)膜粘附作用的影響及潛在的分子機(jī)制設(shè)計(jì):分析Talin1/miR-1285-3p/PIPK1信號(hào)軸對(duì)子宮內(nèi)膜粘附作用的影響及所涉及的相關(guān)信號(hào)通路方法:第一部分,運(yùn)用定量PCR(QPCR)、蛋白免疫印跡(WB)、免疫組織化學(xué)(IHC)方法檢測(cè)Talin1,FAK,Vinculin及整合素αvβ3在蛻膜及絨毛組織中的表達(dá)水平。第二部分,首先,在子宮內(nèi)膜細(xì)胞株及人滋養(yǎng)細(xì)胞株中,利用RNA干擾技術(shù)(RNAi)將Talin1及PIPK1沉默;PCR及WB方法檢測(cè)Talin1沉默(siTalin1)及PIPK1沉默(siPIPK1)對(duì)粘附相關(guān)分子(FAK/Vinculin/αvβ3)表達(dá)的影響;細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)探究siTalin1及siPIPK1對(duì)細(xì)胞粘附功能的影響;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)siTalin1及siPIPK1對(duì)細(xì)胞周期分布及凋亡水平的影響;PCR及WB方法檢測(cè)siTalin1及siPIPK1對(duì)周期相關(guān)分子(Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4)表達(dá)的影響。第三部分,通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)Talin1和PIPK1可共同結(jié)合的miRNAs,尋找可能存在的Talin...
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:100 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
QRT-PCR檢測(cè)Talin1、整合素αvβ3、FAK及Vinculin的表達(dá)水平(NAT:正常流產(chǎn)組織;MAT:稽留流產(chǎn)組織;Medain:中位數(shù))
圖 1-2 Western Blot 檢測(cè) Talin1、整合素αvβ3、FAK 及 Vinculin 的表達(dá)水平(N:正常流產(chǎn)組織;M:稽留流產(chǎn)組織)Figure 1-2. Expression of Talin1, αvβ3, FAK and Vinculin were measured via Western (NAT: normal abortion tissues; MAT: missed abortion tissues)疫組化檢測(cè) Talin1、整合素αvβ3、FAK 及 Vinculin 在絨毛組疫組化評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):疫組化染色結(jié)果的評(píng)分,需綜合考慮陽(yáng)性反應(yīng)染色強(qiáng)度和陽(yáng)。免疫組化的陽(yáng)性細(xì)胞顯示棕色信號(hào),染色指數(shù)是指染色強(qiáng)的乘積。染色強(qiáng)度的分?jǐn)?shù)劃分標(biāo)準(zhǔn)為:陰性,0 分;弱陽(yáng)性性,2 分;強(qiáng)陽(yáng)性,3 分。陽(yáng)性細(xì)胞頻率的劃分標(biāo)準(zhǔn)為:少
Talin1/miR-1285-3p/PIPK1 信號(hào)軸通過(guò) PI3K/AKT 通路調(diào)控子宮內(nèi)膜容受性的分子機(jī)制研究 2019 屆博士研究生學(xué)位論0 分;5%-25%,1 分;26%-50%,2 分;51%-75%,3 分;大于 75%,4 分當(dāng)染色異構(gòu)的時(shí)候,我們的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)會(huì)做出微調(diào),但評(píng)分準(zhǔn)則不變:每評(píng)分都是獨(dú)立的,結(jié)果是綜合的。如一個(gè)標(biāo)本包含 75%的陽(yáng)性細(xì)胞中等度染色(3*2=6 分),另外 25%陽(yáng)性細(xì)胞是弱強(qiáng)度的(1*1=1),最后得到結(jié)果是 6+1=7。0-7 分屬于是低表達(dá)范圍,8-12 分屬于高表達(dá)范圍。結(jié)果顯示:上述四個(gè)黏附因子與正常人工流產(chǎn)患者的組織比較,在留流產(chǎn)患者的絨毛組織中同樣表達(dá)下調(diào)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]哺乳動(dòng)物胚胎著床分子機(jī)制綜述的研究現(xiàn)狀[J]. 呂波,薛金鋒,祝獻(xiàn)民,曾橋,薛志剛. 中華生殖與避孕雜志. 2018(01)
本文編號(hào):2986550
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:100 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
QRT-PCR檢測(cè)Talin1、整合素αvβ3、FAK及Vinculin的表達(dá)水平(NAT:正常流產(chǎn)組織;MAT:稽留流產(chǎn)組織;Medain:中位數(shù))
圖 1-2 Western Blot 檢測(cè) Talin1、整合素αvβ3、FAK 及 Vinculin 的表達(dá)水平(N:正常流產(chǎn)組織;M:稽留流產(chǎn)組織)Figure 1-2. Expression of Talin1, αvβ3, FAK and Vinculin were measured via Western (NAT: normal abortion tissues; MAT: missed abortion tissues)疫組化檢測(cè) Talin1、整合素αvβ3、FAK 及 Vinculin 在絨毛組疫組化評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):疫組化染色結(jié)果的評(píng)分,需綜合考慮陽(yáng)性反應(yīng)染色強(qiáng)度和陽(yáng)。免疫組化的陽(yáng)性細(xì)胞顯示棕色信號(hào),染色指數(shù)是指染色強(qiáng)的乘積。染色強(qiáng)度的分?jǐn)?shù)劃分標(biāo)準(zhǔn)為:陰性,0 分;弱陽(yáng)性性,2 分;強(qiáng)陽(yáng)性,3 分。陽(yáng)性細(xì)胞頻率的劃分標(biāo)準(zhǔn)為:少
Talin1/miR-1285-3p/PIPK1 信號(hào)軸通過(guò) PI3K/AKT 通路調(diào)控子宮內(nèi)膜容受性的分子機(jī)制研究 2019 屆博士研究生學(xué)位論0 分;5%-25%,1 分;26%-50%,2 分;51%-75%,3 分;大于 75%,4 分當(dāng)染色異構(gòu)的時(shí)候,我們的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)會(huì)做出微調(diào),但評(píng)分準(zhǔn)則不變:每評(píng)分都是獨(dú)立的,結(jié)果是綜合的。如一個(gè)標(biāo)本包含 75%的陽(yáng)性細(xì)胞中等度染色(3*2=6 分),另外 25%陽(yáng)性細(xì)胞是弱強(qiáng)度的(1*1=1),最后得到結(jié)果是 6+1=7。0-7 分屬于是低表達(dá)范圍,8-12 分屬于高表達(dá)范圍。結(jié)果顯示:上述四個(gè)黏附因子與正常人工流產(chǎn)患者的組織比較,在留流產(chǎn)患者的絨毛組織中同樣表達(dá)下調(diào)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]哺乳動(dòng)物胚胎著床分子機(jī)制綜述的研究現(xiàn)狀[J]. 呂波,薛金鋒,祝獻(xiàn)民,曾橋,薛志剛. 中華生殖與避孕雜志. 2018(01)
本文編號(hào):2986550
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