目的1、了解宮頸脫落細胞人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染狀況,探究高危型人乳頭瘤病毒（high risk-HPV,HR-HPV）感染與宮頸細胞病理學特征之間的關(guān)系。2、利用人乳頭瘤病毒58突變型E6E7（Mutant type E6E7,m E6E7）融合基因為靶點,以對人無致病性的巨細胞病毒株（Towne株）細菌人工染色體（SW102Towne bacterial artificial chromosome,SW102-T-BAC）為載體,構(gòu)建攜帶HPV58m E6E7融合基因的重組病毒,鑒定HPV58m E6E7轉(zhuǎn)化活性,為HPV58型治療性疫苗研究奠定基礎(chǔ)。方法1、收集體檢普查女性宮頸脫落細胞,以所提DNA為模板,用HPV L1區(qū)通用引物MY09/11,進行PCR擴增,檢測宮頸脫落細胞總感染率;利用HPV E6型特異性引物檢測宮頸脫落細胞中具體感染型別;統(tǒng)計分析HPV感染與臨床病理特征的關(guān)系。2、PCR擴增帶有50bp Towne開放讀碼框（open reading frame,ORF）75左右同源臂的Galk、HPV58 E6E7融合基因,采... 

【文章來源】：華北理工大學河北省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

用β-actin引物檢測標本質(zhì)量的結(jié)果

第1章宮頸脫落細胞HPV58型感染狀況分析-15-1)利用熒光定量PCR法，對總感染率為陽性的標本DNA進行擴增檢測，檢測到HPV16型42例；HPV18型15例；HPV31型9例；HPV33型15例；HPV35型6例；HPV39型20例；HPV45型3例；HPV51型21例；HPV52型80例；HPV56型18例；HPV58型78例；HPV59型19例；HPV68型16例；HPV66型28例；HPV82型10例。感染率排在前三位的為HPV52型占13.96%，HPV58型占13.61%，HPV16型占7.33%。2）驗證實驗設(shè)置陰性對照組為未感染HPV的293細胞DNA。另外，檢測過程還設(shè)置陽性對照組，分別為含有HPV16的Caski細胞、含有HPV18的Hele細胞、含有HPV58的質(zhì)粒DNA，用以檢測HPV16、HPV18、HPV58的感染率。引物分別為表1中列出的HPV16/18/58的E6區(qū)引物。PCR擴增檢測標本DNA，用1%瓊脂糖凝膠電泳對擴增反應的產(chǎn)物進行檢測，凝膠成像儀用于產(chǎn)物條帶的觀察。檢測到42例HPV16型陽性（圖3）,15例HPV18型陽性（圖4）,78例HPV58型陽性（圖5）。經(jīng)檢測，42例標本可以擴增出目的條帶，說明有42例標本為HPV16陽性，陽性率為7.33%（42/573）。圖3PCR擴增檢測HPV16感染狀況M：DL2000DNALadder，Neg：陰性對照，Caski：陽性對照，1-7：標本PCR擴增檢測HPV16感染狀況。圖4PCR擴增檢測HPV18感染狀況M：DL2000DNALadder,Neg代表陰性對照，Hela代表陽性對照，1-7分別為標本HPV18感染狀況的檢測。

第1章宮頸脫落細胞HPV58型感染狀況分析-15-1)利用熒光定量PCR法，對總感染率為陽性的標本DNA進行擴增檢測，檢測到HPV16型42例；HPV18型15例；HPV31型9例；HPV33型15例；HPV35型6例；HPV39型20例；HPV45型3例；HPV51型21例；HPV52型80例；HPV56型18例；HPV58型78例；HPV59型19例；HPV68型16例；HPV66型28例；HPV82型10例。感染率排在前三位的為HPV52型占13.96%，HPV58型占13.61%，HPV16型占7.33%。2）驗證實驗設(shè)置陰性對照組為未感染HPV的293細胞DNA。另外，檢測過程還設(shè)置陽性對照組，分別為含有HPV16的Caski細胞、含有HPV18的Hele細胞、含有HPV58的質(zhì)粒DNA，用以檢測HPV16、HPV18、HPV58的感染率。引物分別為表1中列出的HPV16/18/58的E6區(qū)引物。PCR擴增檢測標本DNA，用1%瓊脂糖凝膠電泳對擴增反應的產(chǎn)物進行檢測，凝膠成像儀用于產(chǎn)物條帶的觀察。檢測到42例HPV16型陽性（圖3）,15例HPV18型陽性（圖4）,78例HPV58型陽性（圖5）。經(jīng)檢測，42例標本可以擴增出目的條帶，說明有42例標本為HPV16陽性，陽性率為7.33%（42/573）。圖3PCR擴增檢測HPV16感染狀況M：DL2000DNALadder，Neg：陰性對照，Caski：陽性對照，1-7：標本PCR擴增檢測HPV16感染狀況。圖4PCR擴增檢測HPV18感染狀況M：DL2000DNALadder,Neg代表陰性對照，Hela代表陽性對照，1-7分別為標本HPV18感染狀況的檢測。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2977129