目的:一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝中的一個(gè)關(guān)鍵調(diào)控因子。輻射代謝組學(xué)研究顯示,活化的AMPKαThr172是增加腫瘤細(xì)胞放射敏感性的一個(gè)潛在靶標(biāo),已在乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多種腫瘤細(xì)胞得到證實(shí)。新近有研究證實(shí),水楊酸（Salicylic acid,SA）可直接活化AMPK。本文旨在研究SA放射治療是否增加對宮頸癌細(xì)胞的輻射增敏作用,以及其潛在的分子機(jī)制。方法:結(jié)晶紫法檢測水楊酸對人宮頸癌HeLa/Ca Ski細(xì)胞的生長抑制作用;γH2AX-Foci分析法檢測放射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞DNA損傷;克隆分析法檢測水楊酸對宮頸癌細(xì)胞的劑量存活分?jǐn)?shù)和放射生物學(xué)參數(shù);蛋白質(zhì)印跡（Western Blot）檢測AMPK、TSC2和mTOR的表達(dá)和活化;流式細(xì)胞術(shù)檢測宮頸癌細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡分布。結(jié)果:SA呈劑量（0.5-10mmol/L）和時(shí)間（24-72hr）依賴性地抑制宮頸癌Ca Ski、HeLa細(xì)胞的生長;SA增加了X-ray 8Gy照射后宮頸癌Ca Ski細(xì)胞DNA損傷的γH2AX foci形成,并使DNA修復(fù)延遲;細(xì)胞克隆分析顯示,SA顯著（P<0.05）降低... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１福射及藥物對ＡＭＰＫ信號通路調(diào)控的簡要作用機(jī)制??大量研究發(fā)現(xiàn)，抑制ＡＭＰＫ后細(xì)胞對電離福射的敏感性下降

細(xì)胞的存活率同樣隨濃度增加而下降，并分別在濃度為２、０．５ｍｍｏｌ化時(shí)即??出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；進(jìn)一步比較濃度為４ｍｍｏｌ／Ｌ時(shí)２４、４８與７２小時(shí)的細(xì)胞??存活率，其結(jié)果也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ｐ＜０．０５），詳見圖１．２，表１．２；??２０??

小時(shí)后對比ＨｅＬａ和Ｃａ?Ｓｋｉ細(xì)胞存活率差異。采用重復(fù)測量的方差分析。??結(jié)果顯示ｐ＝０．６０，即水楊酸作用２４小時(shí)后ＨｅＬａ和Ｃａ?Ｓｋｉ細(xì)胞存活率無統(tǒng)??計(jì)學(xué)差異，結(jié)果見圖１．３。??１．２??１０?？??《。８??凄。６??Ｄ．４?＿？?ｈｅｌａ??０．２?－Ａ－?ｃａｓｋｉ??０．０?Ｉ?????０．０?０．５?１．０?２．０?４．０?６．０?８．０?１０．０??水楊酸濃度ｍｍｏｌ／Ｌ??圖１．３：水楊酸作用２４小時(shí)后ＨｅＬａ和Ｃａ?Ｓｋｉ細(xì)胞存活率比較??１．４選擇合適的藥物濃度作用福巧增敏研究濃度??為了避免水楊酸本身對細(xì)胞的毒性作用，同時(shí)又可最大限度的增加對??腫瘤細(xì)胞的福射增敏作用，在隨后的實(shí)驗(yàn)中我們將采用藥物抑制濃度ＩＣ２０，??即細(xì)胞存活率為８０％時(shí)的藥物濃度來進(jìn)行福射增敏實(shí)驗(yàn)的研究。此外，考??慮到鱗癌是臨床上更常見的宮頸癌病理類型，而兩種細(xì)胞系對水楊酸的敏??感性差異不大，因此，我們選擇Ｃａ?Ｓｋｉ細(xì)胞作為福射增敏研究的對象。??根據(jù)Ｃａ?Ｓｋｉ細(xì)胞２４小時(shí)后濃度－存活率擬合細(xì)胞存活率曲線。擬合公??克?ｙ＝－０．０６６２ｘ＋１．０１３１?（民２＝０．９９４１６），代入公式計(jì)算，ＩＣ２０＝３．３ｍｍｏｌ／Ｌ，而當(dāng)??藥物濃度為４ｍｍｏｌ／Ｌ時(shí)，存活率為７５．８３％，故最后我們選擇４ｍｍ〇ｙＬ作??２２

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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