發(fā)布時間：2021-01-08 09:37

　　目的：研究孕激素對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞和孕激素耐藥Ishikawa細胞PI3K/Akt信號通路的影響,探討孕激素治療子宮內(nèi)膜癌的機制；研究PI3K/mTOR雙重抑制劑NVP-BEZ235對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞及孕激素耐藥Ishikawa細胞體外增殖能力的抑制作用,探討NVP-BEZ235能否增強孕激素對Ishikawa細胞的抑制作用,能否改善或逆轉(zhuǎn)孕激素耐藥Ishikawa細胞的耐藥性。方法：Western Blot方法檢測孕激素處理前后Ishikawa細胞和孕激素耐藥Ishikawa細胞中Akt蛋白磷酸化水平（p-Akt/Akt）的改變；NVP-BEZ235和醋酸甲地孕酮聯(lián)合應(yīng)用對Ishikawa細胞及孕激素耐藥Ishikawa細胞Akt蛋白磷酸化水平的影響；CCK-8、MTT法檢測醋酸甲地孕酮單藥或聯(lián)合NVP-BEZ235對兩株細胞體外增殖能力的影響；流式細胞儀檢測醋酸甲地孕酮單藥或聯(lián)合NVP-BEZ235對兩株細胞細胞周期分布及凋亡情況的影響。結(jié)果：醋酸甲地孕酮作用于子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞可使Akt磷酸化水平下調(diào),藥物作用15min、30min、1h、... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

樣品RNA電泳圖

圖14醋酸甲地孕酮和NVP-BEZ235對[shikawa和progestin-R Ishikawa細胞Akt _酸化水平的影響。NVP-BEZ235和醋酸甲地孕酮作用于Ishikawa細胞（A)和孕激素耐藥丨shikawa細胞（B)不同時間后Westernblot方法檢測pAkt，total Akt和P -actin表達。*與未用藥物處理時比較，*P<0.05, **P<0.01。(二）10^lM醋酸甲地孕酮和50nM NVP-BEZ235聯(lián)合作用于子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞及孕激素耐藥Ishikawa細胞2h、24h后，細胞內(nèi)Akt磷酸化水平分別與醋酸甲地孕酮單獨用藥2h、24h后比較（研究第一部分醋酸甲地孕酮作用2h、24h后內(nèi)細胞Akt憐酸化水平與第二部分兩藥聯(lián)合作用2h、24h后細胞內(nèi)Akt隣酸化水平進行比較）。N VP-BEZ23 5與醋酸甲地孕酮聯(lián)合作用于子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞2h后細胞內(nèi)Akt磷酸化水平顯著低于醋酸甲地孕酮單獨用藥（P=0.002)。兩藥聯(lián)合作用于Ishikawa細胞24h后細胞內(nèi)Akt磷酸化水平顯著低于醋酸甲地孕酮單獨用藥（P=0.013)(圖18)。說明在Ishikawa細胞中，NVP-BEZ235顯著增強了孕激素介導(dǎo)的PDK/Akt通路的抑制。

【參考文獻】：
期刊論文
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