目的:探討線粒體靶向KillerRed （mtKR）增強輻射誘導HeLa細胞線粒體失能及細胞自噬作用,并闡明其相關分子機制。方法:線粒體靶向質粒PTEN誘導激酶1 （Pink1）-mtKR轉染HeLa細胞后,進行可見光和4Gy X射線照射,實驗分為對照組、空載體組、Pink1-mtKR組、對照+4Gy X射線照射組、空載體+4Gy X射線照射組和Pink1-mtKR+4Gy X射線照射組。X線照射后24h,采用流式細胞術檢測線粒體膜電位（MMP）和細胞自噬率,采用生化試劑盒檢測線粒體呼吸鏈復合物Ⅰ和Ⅲ水平,采用Western blotting法檢測自噬分子P62、Pink1、帕金蛋白（parkin）和線粒體外膜轉換酶20 （Tom20）的表達量。結果:Pink1-mtKR瞬時轉染HeLa細胞后,給予可見光聯(lián)合4Gy X射線照射,與對照組比較,Pink1-mtKR組細胞MMP、線粒體呼吸鏈復合物Ⅰ和Ⅲ水平均明顯降低（P<0.05）,細胞自噬率明顯升高（P<0.05）,Pink1-mtKR+4GyX射線照射組細胞MMP、線粒體呼吸鏈復合物Ⅰ和Ⅲ水平進一步降低（P<0.05... 

【文章來源】：吉林大學學報(醫(yī)學版). 2020,46(04)北大核心

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【部分圖文】：

可見光和4Gy X射線照射后流式細胞術檢測各組HeLa細胞MMP

與對照組比較，可見光照射后12h，空載體組和Pink1-mtKR組細胞自噬率明顯變化（P>0.05）；照射后24h,Pink1-mtKR組細胞自噬率明顯升高（P<0.05）�？梢姽夂�4Gy X射線聯(lián)合照射后12和24h，與對照組比較，對照+4Gy X射線照射組、空載體+4Gy X射線照射組和Pink1-mtKR+4Gy X射線照射組細胞自噬率均明顯升高（P<0.05）。與對照+4Gy X射線照射組比較，照射后24 h,Pink1-mtKR+4Gy X射線照射組細胞自噬率明顯升高（P<0.05）；照射后12和24 h,Pink1-mtKR+4Gy X射線照射組細胞自噬率明顯高于Pink1-mtKR組（P<0.05）。見表2和圖2。2.4 各組細胞中自噬相關蛋白表達量

在總蛋白中，各組細胞中Pink1、parkin和Tom20蛋白表達量無明顯變化，但Pink1-mtKR組P62蛋白表達量增加，Pink1-mtKR+4Gy X射線照射組增加更明顯；在線粒體蛋白中，Pink1-mtKR組和Pink1-mtKR+4Gy X射線照射組細胞中Pink1、parkin和Tom20蛋白表達量均增加。見圖3。3 討論

【參考文獻】：
期刊論文
[1]新型腫瘤靶向納米顆粒聯(lián)合光動力治療對人宮頸癌Hela細胞的體外殺傷作用[J]. 趙艷,張婷婷.  西安交通大學學報(醫(yī)學版). 2019(04)
[2]線粒體靶向KillerRed誘導的ROS增強輻射對HeLa細胞的增殖抑制作用[J]. 李鑫,馬云飛,唐庚,韋麒,紀紅池,田嘉安,申延男,王志成.  吉林大學學報(醫(yī)學版). 2018(04)



本文編號：2961521