目的探討miR-34a-5p及CDK6對滋養(yǎng)層細胞增殖,浸潤和凋亡的作用和下游機制以及二者的調(diào)節(jié)關系。方法培養(yǎng)滋養(yǎng)層細胞HTR-8/Svneo和人絨毛膜癌細胞系BeWo和JEG-3HTR-8/Svneo,使用RTqPCR法檢測3種細胞中miR-34a-5p的表達差異。根據(jù)對HTR-8/Svneo細胞的不同處理進行如下分組:無處理的HTR-8/Svneo細胞（對照組）;miR-34a-5p擬似物mimic轉染細胞（mimic組）,pcDNA-CDK6和mimic共轉染HTR-8/Svneo細胞（pcDNA-CDK6+mimic組）,miR-34a-5p抑制劑inhibitor轉染HTR-8/Svneo細胞（inhibitor組）。MTT法檢測細胞增殖,ELISA法測定caspase 3活性檢測細胞凋亡水平,Transwell實驗檢測細胞浸潤能力;Western blot檢測細胞周期依賴性蛋白激酶CDK6,凋亡標記物cleaved-caspase 3,浸潤標記物MMP-9的表達;熒光素酶報告基因實驗確認miR-34a-5p對CDK-6的直接靶向關系。結果過表達miR-34a-5p抑制HTR... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學學報. 2020年01期 北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 細胞轉染和細胞處理
        1.2.3 實時熒光定量
        1.2.4 MTT檢測細胞增殖活性g
        1.2.5 Western blot檢測
        1.2.6 檢測細胞的caspase 3活性
        1.2.7 Transwell實驗檢測
        1.2.8 螢光素酶報告基因分析
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 miR-34a-5p在滋養(yǎng)層細胞中表達下調(diào)
    2.2 miR-34a-5p-mimic抑制HTR-8/Svneo的增殖活性
    2.3 miR-34a-5p-mimic促進HTR-8/Svneo細胞的凋亡
    2.4 miR-34a-5p-mimic抑制HTR-8/Svneo細胞的浸潤
    2.5 CDK6是miR-34a-5p的靶基因之一
    2.6 PI3K/AKT信號通路參與調(diào)控miR-34a-5p介導的滋養(yǎng)層細胞增殖、凋亡和浸潤
3討論



本文編號：2956304