目的探討miR-34a-5p及CDK6對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖,浸潤(rùn)和凋亡的作用和下游機(jī)制以及二者的調(diào)節(jié)關(guān)系。方法培養(yǎng)滋養(yǎng)層細(xì)胞HTR-8/Svneo和人絨毛膜癌細(xì)胞系BeWo和JEG-3HTR-8/Svneo,使用RTqPCR法檢測(cè)3種細(xì)胞中miR-34a-5p的表達(dá)差異。根據(jù)對(duì)HTR-8/Svneo細(xì)胞的不同處理進(jìn)行如下分組:無(wú)處理的HTR-8/Svneo細(xì)胞（對(duì)照組）;miR-34a-5p擬似物mimic轉(zhuǎn)染細(xì)胞（mimic組）,pcDNA-CDK6和mimic共轉(zhuǎn)染HTR-8/Svneo細(xì)胞（pcDNA-CDK6+mimic組）,miR-34a-5p抑制劑inhibitor轉(zhuǎn)染HTR-8/Svneo細(xì)胞（inhibitor組）。MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖,ELISA法測(cè)定caspase 3活性檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平,Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞浸潤(rùn)能力;Western blot檢測(cè)細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶CDK6,凋亡標(biāo)記物cleaved-caspase 3,浸潤(rùn)標(biāo)記物MMP-9的表達(dá);熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)確認(rèn)miR-34a-5p對(duì)CDK-6的直接靶向關(guān)系。結(jié)果過(guò)表達(dá)miR-34a-5p抑制HTR... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020年01期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和細(xì)胞處理
        1.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量
        1.2.4 MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖活性g
        1.2.5 Western blot檢測(cè)
        1.2.6 檢測(cè)細(xì)胞的caspase 3活性
        1.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
        1.2.8 螢光素酶報(bào)告基因分析
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-34a-5p在滋養(yǎng)層細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)
    2.2 miR-34a-5p-mimic抑制HTR-8/Svneo的增殖活性
    2.3 miR-34a-5p-mimic促進(jìn)HTR-8/Svneo細(xì)胞的凋亡
    2.4 miR-34a-5p-mimic抑制HTR-8/Svneo細(xì)胞的浸潤(rùn)
    2.5 CDK6是miR-34a-5p的靶基因之一
    2.6 PI3K/AKT信號(hào)通路參與調(diào)控miR-34a-5p介導(dǎo)的滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、凋亡和浸潤(rùn)
3討論



本文編號(hào)：2956304