目的:壬基酚（Nonylphenol,NP）是典型的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,同時也是強表面活性劑,廣泛應(yīng)用于化妝品、日用化學(xué)品、皮革、紡織產(chǎn)品和塑料制品中。研究已經(jīng)顯示NP暴露會引起多種神經(jīng)行為異常,例如認(rèn)知障礙,異常的發(fā)聲行為,焦慮樣行為,以及抑郁樣行為等。最近的研究顯示,環(huán)境因素在社交行為缺陷以及刻板重復(fù)樣行為的發(fā)生發(fā)展中有著重要的作用。孕哺期是神經(jīng)發(fā)育的關(guān)鍵時期,研究顯示在這個關(guān)鍵時期環(huán)境污染物暴露會引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)的損傷。但是,孕哺期暴露NP對仔鼠社交行為缺陷以及刻板重復(fù)樣行為的影響尚待研究。因此,本研究擬建立孕哺期NP暴露的大鼠模型,并采用孕期暴露丙戊酸（Valproic acid,VPA）的大鼠作為社交行為缺陷和重復(fù)刻板行為的陽性對照,觀察孕哺期NP暴露對仔鼠社交行為及重復(fù)刻板行為的影響,并深入研究這種社交行為和重復(fù)刻板行為可能的機制。研究方法:妊娠第0天至仔鼠出生后（Postnatal Day,PN）21天的母鼠灌以不同劑量的NP（0,10,50 mg/kg）玉米油溶液;妊娠第12.5天用腹腔注射的方式給予母鼠600 mg/kg的VPA鹽溶液。以孕哺期NP暴露和孕期VPA暴露... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：137 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

實驗流程示意圖

TCT在測試嚙齒類動物社會交往和社會新奇偏好行為研究中有著廣泛的應(yīng)用。實驗過程參考文獻并進行輕微修改,設(shè)備箱由中心室(25 cm×30 cm×35.5 cm)和兩個側(cè)室(25 cm×30 cm×35.5 cm)組成[59,61]。簡單地說,該任務(wù)包括四個10分鐘的小測試。第一個階段(使受試對象習(xí)慣中央室):每個受試對象都被引入中心房間,兩側(cè)小門關(guān)閉,使實驗鼠熟悉中心室10 min。第二階段(使受試對象習(xí)慣所有三個房間):打開兩個側(cè)門,讓實驗鼠探索所有三個空房間,一共10分鐘。未觀察到受試者有特殊位置偏好。第三個階段(社交能力測試),用一只手引導(dǎo)實驗鼠,并將其限制在中央室,輕輕關(guān)閉兩個側(cè)門。然后分別將新的物體(空鐵絲籠,空-“E”)和新的老鼠(年齡和性別匹配的陌生老鼠,陌生鼠1-“S1”)引入兩個側(cè)室。為了避免位置偏好,將新的物體和陌生大鼠的位置隨機分配。打開兩個門,讓實驗鼠自由探索所有三個房間10分鐘。使用Ethovision軟件測量實驗鼠每個房間的停留時間和嗅探陌生大鼠的時間。社會性偏好指數(shù)=100 x(S1-E)/(S1+E)。在最后一個階段(對社會新奇性的偏好測試)之前,實驗鼠被引導(dǎo)回中心室,關(guān)閉兩個側(cè)門,而另一只新的大鼠(年齡和性別匹配的陌生大鼠,陌生鼠2-‘S2’)被放在之前空的籠子里。在最后一階段,兩個側(cè)門被打開,實驗鼠自由探索三個房間10分鐘。用Ethovision軟件測量實驗鼠在各個房間停留時間和嗅探每個鼠的時間。社會新穎性偏好的偏好指數(shù)=100 x(S2-S1)/(S2+S1)。為了消除先前實驗鼠留下的氣味線索導(dǎo)致潛在偏差影響,在每次測試前,用5%乙醇溶液清潔裝置。2.3.5 曠場實驗(Open field task,OFT)

社會交往缺陷是自閉癥患者和VPA誘導(dǎo)的自閉癥模型最顯著的特征之一[3,63]。因此,我們用三箱實驗第三階段實驗(社交行為實驗)評價孕哺期NP暴露對社交行為的影響。在社交階段(第三階段),對照組、NP-10和NP-50組的仔鼠在陌生鼠1(S1)所在房間的停留時間明顯多于在空線杯所在房間的停留時間(圖3.1和圖3.2 A,P<0.05)。該結(jié)果表明對照組、NP-10和NP-50組的仔鼠沒有明顯的社交行為缺陷。然而,暴露VPA的仔鼠在陌生鼠1(S1)所在房間的停留時間和在空線杯所在房間的停留時間沒有明顯差異。該結(jié)果表明VPA組的仔鼠表現(xiàn)出明顯的社交行為缺陷(圖3.1和圖3.2 A)。有趣的是,與對照組相比,暴露50 mg/kg NP或VPA處理的仔鼠嗅探陌生鼠1(S1)的時間減少(圖3.2 C,P<0.05)。在10 mg/kg NP暴露組的仔鼠中,嗅探陌生鼠1(S1)的時間也略有減少,但差異不顯著(圖3.2C)。與對照組相比,NP暴露與VPA處理顯著降低仔鼠基于房間停留時間的偏好指數(shù)(圖3.2 B,P<0.05)。綜上所述,這些結(jié)果說明雖然孕哺期暴露NP不會造成仔鼠明顯嚴(yán)重的社會交往缺陷,但孕哺期暴露NP的確引起了仔鼠一定程度的社會交往異常。圖3.2孕哺期暴露NP導(dǎo)致仔鼠輕微的社會交往行為異常

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2932216