目的:1.觀察葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78）對卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移的影響。2.探討MEK/Erk信號通路在GRP78調(diào)控卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用。方法:1.免疫組化法檢測60例卵巢漿液性癌組織和40例卵巢漿液性囊腺瘤組織中GRP78的表達(dá)情況,并以western blot法檢測GRP78的表達(dá)水平;SPSS分析GRP78表達(dá)量和卵巢漿液性癌臨床指標(biāo)之間的關(guān)系。2.Western blot 法檢測 HO-8910 細(xì)胞和 HO-8910PM 細(xì)胞中 GRP78、p-MEK、MEK、p-Erk、Erk的表達(dá)水平。3.Transwell小室法檢測HO-8910細(xì)胞和HO-8910PM細(xì)胞侵襲、遷移能力。4.構(gòu)建pcDNA-GRP78和GRP78-shRNA真核表達(dá)質(zhì)粒載體,應(yīng)用LipofectamineM2000將其分別轉(zhuǎn)染至HO-8910細(xì)胞和HO-8910PM細(xì)胞中,分別過表達(dá)和沉默GRP78的表達(dá);采用western blot法檢測HO-8910細(xì)胞和HO-8910PM細(xì)胞中GRP78的表達(dá)水平,transwell法檢測HO-89... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＧＲＰ７８在卵巢漿液性癌組織和卵巢漿液性囊腺瘤組織中的表達(dá)

為進(jìn)一步證實(shí)ＧＲＰ７８在卵巢癌細(xì)胞中與其侵襲、遷移能力的關(guān)系，我們分別??在ＨＯ－８９１０細(xì)胞中過表達(dá)ＧＲＰ７８，在ＨＯ－８９１０ＰＭ細(xì)胞中干擾ＧＲＰ７８的表達(dá)。??結(jié)果如圖４Ａ－Ｆ，在ＨＯ－８９１０細(xì)胞中過表達(dá)ＧＲＰ７８，細(xì)胞的侵襲、遷移能力顯著??升高，升高比例分別為６８．３２％，７２．５３％?（尸＜０．０５）。而在ＨＯ－８９１０ＰＭ細(xì)胞中??干擾ＧＲＰ７８的表達(dá)，細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力顯著降低，降低比例分別為６２．４５％，??７０．１８％?（Ｐ＜０．０５）（見圖４Ｇ－Ｋ）。以上結(jié)果說明ＧＲＰ７８可調(diào)控卵巢癌細(xì)胞的侵??襲、遷移能力。??ｎｅｇａｔｉｖｅ??Ａ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｐｃＯＮＡ?ｐｃＯＮＡ－ＧＲＰ７８?ｑ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｈＲＮＡ－ＧＲＰ７８??ＧＲＰ７８?—－＊？?一晰?ｒｎｍｍｍ＊?ＧＲＰ７８?ｊｊＭｉ?？＇??Ｂ?Ｈ??２５?＊?１＊２?１?ｃｏ??２〇?ｆ—Ｉ?１－〇???ｒ－＾－，?＾??Ｉ?２０?Ｉ?８?％??Ｉ?１．５?ｗ?｜?Ｉ?Ｉ??筆?１．０???ｒ—Ｃ—ｌ?Ｉ?Ｓ?＇６?８?｜??０?９?Ｏ?．４?ｏ??Ｉ＿??Ｉ?Ｉ?１?．２?１?Ｉ??ｇａｓ．?８?Ｉ??〇．〇?????????０．０??????????ｃ?：：？?＾?－??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｐｃＯＮＡ?ｐ＜ｒｆＤＮＡ－ＧＲＰ７８?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｈＲＮＡ－ＧＲＰ７８??Ｄ１００?ｉ?８０??ｒ—Ｊ—

牐ǎ校跡埃?埃擔(dān)??崾荊停牛耍?牛潁胄藕磐?罰崳?被抑制。ＰＤ９８０５９抑制ＭＥＫ／Ｅｒｋ信號通路后，ＨＯ－８９１０ＰＭ細(xì)胞侵襲、迀移能力??顯著降低，降低比例分別為２０．１６％?，?３４．２８％?（見圖７Ｂ和Ｃ）（尸＜０．０５）。結(jié)果??提示，抑制ＭＥＫ／Ｅｒｋ信號通路可降低ＨＯ－８９１０ＰＭ細(xì)胞的侵襲、遷移能力（Ｐ＜０．０５）。??以上所有結(jié)果提示，在卵巢癌細(xì)胞中，ＧＲＰ７８可能是通過調(diào)節(jié)ＭＥＫ／Ｅｒｋ信號通??路的活性影響細(xì)胞的侵襲、遷移能力。??＊?ｃｏｎｔｒｏｌ?ＰＯ９８０５９??＿?一…??ＭＥＫ??Ｐ－Ｅｒｋ?楚??■ｐ＿ｉ＿??１１１Ｋ?ｍｍｍ??＾－ａｃｔｉｎ??Ｂ??８０??Ｔ??ｇ?６０?一＂＂?—?？??〇?２??Ｓ?§??？?４０?Ｑ??ａ?＾??＂２〇?Ｉ?ｒ－１－！??Ｉ??Ｕ??０?????＂．．．??侵襲??Ｃ??１２０??徹?￣Ｌ－１??Ｑ?＊〇??§?５０?｜??２?Ｑ??？６０?Ｉ??：?〇??２０?ｆ??ｕ??０????????遷移??圖７．?ＨＯ－８９１０ＰＭ細(xì)胞中阻斷ＭＥＫ／Ｅｒｋ信號通路后可顯著降低細(xì)胞的侵襲、遷移能力。（Ａ－Ｃ）??ＰＤ９８０５９細(xì)胞作用于ＨＯ－８９１０ＰＭ細(xì)胞２４小時(shí)后

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號：2928812