目的:探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（AD-MSCs,Adipose-derived mesenchymal stem cells）調(diào)節(jié)EZH2促進(jìn)卵巢癌的轉(zhuǎn)移、侵襲的機(jī)制。方法:（1）體外分離、培養(yǎng)健康人大網(wǎng)膜脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,形態(tài)學(xué)和流式細(xì)胞儀檢測獲得原代細(xì)胞是否是脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,收集制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基（ADSCs-CM）。（2）建立穩(wěn)定增殖的卵巢癌細(xì)胞系SKOV3、HO8910和ES2,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基處理上述細(xì)胞株,所有細(xì)胞置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培育。（3）Real-time PCR（實(shí)時(shí)定量PCR）及Western blot檢測經(jīng)條件培養(yǎng)基處理后上述卵巢癌細(xì)胞EZH2表達(dá)水平的變化。Cell Counting Kit-8、細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測卵巢癌細(xì)胞增殖及遷移能力,Transwell小室檢測卵巢癌細(xì)胞侵襲能力的變化。（4）EZH2shRNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染SKOV3、HO8910和ES2卵巢癌細(xì)胞系,獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。（5）條件培養(yǎng)基處理穩(wěn)定轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞,Cell Counting Kit-8增殖、細(xì)胞劃痕試驗(yàn)和Transwell小室檢測其EZH2表達(dá)水平、遷移... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一部分 大網(wǎng)膜脂肪來源的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定
    材料和方法
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備
            2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
            2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        3 主要溶液配制
            3.1 濃縮膠和分離膠的配置方法
        4 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征
        2 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨及成脂鑒定
        3 流式細(xì)胞學(xué)表面
    討論
    結(jié)論
第二部分 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞提高卵巢癌EZH2 表達(dá)
    材料和方法
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 主要試劑及儀器
        3 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1 卵巢癌細(xì)胞株基因水平檢測結(jié)果
        2 卵巢癌細(xì)胞株蛋白水平檢測結(jié)果
        3 構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株
    討論
    結(jié)論
第三部分 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對卵巢癌增殖、遷移及侵襲能力的影響
    材料和方法
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 主要試劑及儀器
        3 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第四部分 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞激活卵巢癌EZH2 促進(jìn)其遷移和侵襲的體外研究
    材料與方法
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        3 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    結(jié)論
第五部分 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞通過激活卵巢癌EZH2促進(jìn)其增殖和侵襲的體內(nèi)研究
    材料與方法
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        3 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞表
攻讀學(xué)位期間研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脂肪來源的干細(xì)胞移植對大鼠腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表達(dá)的影響[J]. 林小惠,劉楠,肖迎春,陳榮華,杜厚偉,王杰華,張逸仙,劉德山.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(01)



本文編號(hào)：2912818