發(fā)布時間：2020-11-04 15:37

　　 目的:探討ANXA5、KDR基因啟動子單核苷酸多態(tài)性在重慶地區(qū)原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)的作用機制,期望闡明候選基因高危突變誘發(fā)臍帶內皮損傷、引起血栓形成而導致復發(fā)性流產(chǎn)的分子過程。建立并完善遺傳性血栓風險致原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)發(fā)生的臨床模型,為患者制定完善的診療指南和安全可靠的臨床干預方案。方法:在本研究中納入非孕期原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)患者142例、健康體檢女性107例,檢測基因啟動子單核苷酸多態(tài)性與原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)遺傳風險關聯(lián)性。構建不同基因型的重組質粒進行雙熒光素酶檢測驗證基因啟動子單核苷酸多態(tài)性對基因轉錄活性的影響。運用生物信息學方法預測分子二維結構是否發(fā)生改變及結合的具體的轉錄因子。結果:病例組ANXA5(rs1050606)、KDR(rs55713360)突變純合型等位基因頻率均明顯增高,rs1050606位點中G等位基因是原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)發(fā)病的危險因素,T等位基因降低了患病風險。rs55713360位點中C等位基因是原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)發(fā)病的危險因素,T等位基因降低了患病風險。ANXA5、KDR野生型之間存在相互作用。不同基因型(6個位點全野生純合、全突變純合、單個位點突變純合其余位點野生純合)共6個重組質粒構建成功。ANXA5、KDR基因雙熒光素酶報告系統(tǒng)顯示突變基因型相比野生型啟動子上游調控序列轉錄活性明顯降低。預測出ZBTB33、RELA、INSM1、REL這4個轉錄因子可能與ANXA5(rs1050606)結合,TEAD4、NOTO、VSX1可能與KDR(rs55713360)結合,分子二維結構發(fā)生了改變。結論:ANXA5(rs1050606)、KDR(rs55713360)突變基因型顯著增加原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)遺傳風險,為其危險因素。ANXA5、KDR基因啟動子單核苷酸多態(tài)性對基因轉錄活性有抑制作用,可能是由于基因高級結構的改變。
【學位單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R714.21
【部分圖文】：

26 1.1 ANXA5-pGL3-Basic 重組質粒酶切驗證圖 digestion figure of recombinant plasmid ANXarker；ic 重組質粒（SNP1-SNP6 全野生純合）；ic 重組質粒（SNP1-SNP6 全突變純合）；ic 重組質粒（SNP5 突變純合其余位點野生純合）；GL3-Basic 質粒，短片段為目的片段。

1.2 KDR-pGL3-Basic 重組質粒酶切驗證e digestion figure of recombinant plasmarker；組質粒（SNP1-SNP6 全野生純合）；組質粒（SNP1-SNP6 全突變純合）；組質粒（SNP1 突變純合其余位點野生純合GL3-Basic 質粒，短片段為目的片段。果

圖 2.4 KDR1-pGL3-Basic 重組質粒（SNP1-SNP6 全野生純合）Fig 2.4 The sequencing results of recombinant plasmid KDR1-pGL3-Basic (SNP1-SNP6major)SNP1: T>CSNP6: TT
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1 劉桂岑;ANXA5、KDR基因啟動子單核苷酸多態(tài)性與原因不明復發(fā)性自然流產(chǎn)關聯(lián)性的分子機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2018年

本文編號：2870279