TGF-β1對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
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【摘要】:目的:宮頸癌是最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤,轉(zhuǎn)移是影響宮頸癌患者預(yù)后的重要因素。本研究用5ng/mL轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)作用SiHa細(xì)胞72 h,通過(guò)倒置顯微鏡、CCK-8實(shí)驗(yàn)、單細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)分別觀察TGF-β1作用前后Siha細(xì)胞形態(tài)、增殖能力、克隆形成能力、粘附能力、遷移及侵襲能力的改變;分析宮頸癌SiHa細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的相關(guān)性;闡明TGF-β1導(dǎo)致宮頸癌SiHa細(xì)胞發(fā)生EMT的可能分子機(jī)制,為以TGF-β1為靶點(diǎn)的宮頸癌的治療提供系統(tǒng)的理論依據(jù)。方法:1:研究TGF-β1對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。用5ng/mL TGF-β1作用Siha細(xì)胞72 h,通過(guò)倒置顯微鏡、CCK-8實(shí)驗(yàn)、單細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)分別觀察TGF-β1作用前后SiHa細(xì)胞形態(tài)、增殖能力、克隆形成能力、粘附能力、遷移及侵襲能力的改變。2:研究TGF-β1體外誘導(dǎo)宮頸癌SiHa細(xì)胞對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)降解及血管生成的影響。Western blot檢測(cè)TGF-β1作用SiHa細(xì)胞前后基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2, MMP-2), MMP-9及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)表達(dá)的改變。3:分析宮頸癌SiHa細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的相關(guān)性,闡明TGF-β1導(dǎo)致宮頸癌SiHa細(xì)胞發(fā)生EMT的可能分子機(jī)制。Western blot檢測(cè)TGF-β1作用SiHa細(xì)胞前后囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR), P50, p65, E-cadherin及Vimentin蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:1:5ng/mL TGF-β1作用SiHa細(xì)胞72 h后,SiHa細(xì)胞出現(xiàn)上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)轉(zhuǎn)變、粘附能力減弱、遷移和侵襲能力增強(qiáng),但對(duì)SiHa細(xì)胞的增殖和克隆形成沒(méi)有明顯影響。2:5ng/mL TGF-β1作用SiHa細(xì)胞72 h后,SiHa細(xì)胞表達(dá)MMP-2,MMP-9和VEGF上調(diào)。3:5ng/mL TGF-β1作用SiHa細(xì)胞72 h后,SiHa細(xì)胞表達(dá)CFTR, P50, P65和Vimentin上調(diào),E-cadherin表達(dá)下調(diào)。結(jié)論:1:體外研究表明TGF-β1與宮頸癌的進(jìn)展和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。TGF-β1主要參與SiHa細(xì)胞的粘附、侵襲和遷移等過(guò)程。2:TGF-β1可能通過(guò)誘導(dǎo)SiHa細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及上調(diào)MMP-2, MMP-9和VEGF的表達(dá),促進(jìn)SiHa細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。
【關(guān)鍵詞】:轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 SiHa細(xì)胞 遷移 侵襲 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R737.33
【目錄】:
- 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-12
- 前言12-14
- 1 材料14-18
- 2 方法18-24
- 3 結(jié)果24-28
- 4 討論28-31
- 全文總結(jié)31-32
- 參考文獻(xiàn)32-36
- 文獻(xiàn)綜述36-45
- 參考文獻(xiàn)40-45
- 致謝45-46
- 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文46
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本文編號(hào):285099
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