發(fā)布時間：2020-07-24 04:18

【摘要】：第一部分兩種參數(shù)檢測妊娠期糖尿病羊水板層小體的比較目的比較用自動細(xì)胞計數(shù)儀在兩個參數(shù)設(shè)置下檢測羊水板層小體數(shù)目(LBC),并探討妊娠期糖尿病(GDM)對胎肺成熟度的影響。方法選擇從2015.07?2016.09住院分娩的孕婦共98例,無并發(fā)癥者納入對照組(n=30),確診為GDM者納入GDM組(n=68)。行剖宮產(chǎn)術(shù)時采集羊水。使用自動細(xì)胞計數(shù)儀,設(shè)置兩個參數(shù)(1?10μm、1?30μm)測定羊水LBC值并隨訪新生兒結(jié)局。結(jié)果(1)采用1?10μm測定時對照組、GDM組LBC值分別為(5.19±2.28)×104/μl、(3.25±1.28)×104/μl,均低于1-30μm設(shè)定之測定值(7.61±1.22)×104/μl、(6.57±1.65)×104/μl(P0.05)。(2)采用1?10μm測定時,GDM組LBC值低于對照組(P0.05)。采用1?30μm測定時,GDM組與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。(3)GDM組新生兒呼吸窘迫綜合征(RDS)發(fā)生率高于對照組(P0.05)。結(jié)論采用1?10μm參數(shù)測定LBC值時結(jié)果準(zhǔn)確;GDM時LBC降低,RDS發(fā)生率增加,提示胎肺成熟度延遲。第二部分大鼠妊娠期糖尿病胰島素治療對胎肺成熟無促進(jìn)效應(yīng)目的探討GDM大鼠模型中胎肺成熟情況、及使用胰島素治療對胎肺成熟度的影響。方法(1)SD大鼠在孕2.5D注射鏈脲佐菌素建立GDM模型。實(shí)驗(yàn)分為對照組、GDM組、Ins組(GDM接受人胰島素治療)。(2)動態(tài)監(jiān)測孕鼠靜脈血糖水平;孕20.5D測定孕鼠和胎鼠血漿中血糖、內(nèi)源性胰島素和外源性胰島素。(3)光鏡和透射電鏡觀察胎鼠肺組織結(jié)構(gòu)改變。(4)鉬藍(lán)比色法測定胎肺組織總磷脂含量。結(jié)果(1)GDM組孕鼠血糖升高;Ins組孕9.5D前血糖可降至正常水平。(2)GDM組孕鼠、胎鼠血糖高于對照組和Ins組(P0.05)。GDM組孕鼠、胎鼠內(nèi)源性胰島素低于對照組和Ins組(P0.05)。Ins組孕鼠、胎鼠人胰島素水平高于對照組和GDM組(P0.05)。(3)光鏡下GDM組胎鼠肺泡數(shù)目減少、肺泡腔縮小、細(xì)胞間質(zhì)增厚,肺泡周圍結(jié)締組織增多;胰島素治療后胎肺組織形態(tài)學(xué)恢復(fù)。電鏡下GDM組和Ins組胎肺組織中AECII變小,細(xì)胞內(nèi)LB減少,大量糖原顆粒堆積,細(xì)胞表面的微絨毛稀疏,部分消失。(4)GDM組和Ins組胎肺中總磷脂含量低于對照組(P0.05)。結(jié)論GDM延遲了胎肺的發(fā)育,胰島素治療不能促進(jìn)胎肺成熟。第三部分大鼠妊娠期糖尿病胰島素治療對SREBP-1、SCAP、INSIG-1的影響目的探討胰島素治療對GDM胎肺脂質(zhì)合成的影響、及對SREBP-1、SCAP、INSIG-1表達(dá)的影響。方法(1)油紅O染色檢測肺泡灌洗液細(xì)胞和胎肺組織中脂質(zhì)。(2)電鏡觀察胎肺AECII內(nèi)脂質(zhì)。(3)免疫組化檢測SREBP-1、SCAP、INSIG-1蛋白在胎肺的表達(dá)。(4)RT-PCR檢測SREBP-1、SCAP、INSIG-1 m RNA在胎肺的表達(dá)。(5)Western blot檢測SREBP-1、SCAP、INSIG-1蛋白在胎肺的表達(dá)。結(jié)果(1)GDM組和Ins組肺泡灌洗液細(xì)胞中脂滴少于對照組(P0.05),GDM組肺泡灌洗液細(xì)胞中脂滴與Ins組比較無差異。GDM組和Ins組胎肺組織中脂滴與對照組相比減少(P0.05),GDM組胎肺組織中脂滴與Ins組相比無差異。(2)電鏡觀察到GDM組和Ins組AECII內(nèi)脂滴消失。(3)免疫組化提示SREBP-1、SCAP、INSIG-1蛋白在GDM組胎肺組織中表達(dá)降低(P0.05);Ins組SREBP-1表達(dá)升高(P0.05),SCAP和INSIG-1表達(dá)仍低于對照組(P0.05)。(4)SREBP-1、SCAP、INSIG-1 m RNA在GDM組胎肺組織中表達(dá)低于對照組(P0.05)。Ins組SREBP-1 m RNA水平升高(P0.05),而SCAP和INSIG-1 m RNA水平無改變。(5)SREBP-1、SCAP、INSIG-1蛋白表達(dá)在GDM胎肺組織中降低(P0.05)。Ins組SREBP-1蛋白水平升高(P0.05),SCAP和INSIG-1蛋白水平未升高。結(jié)論GDM胎肺中SREBP-1、SCAP、INSIG-1表達(dá)減低,胎肺脂質(zhì)合成降低;胰島素治療后SREBP-1表達(dá)升高,但SCAP和INSIG-1仍處于低水平。第四部分胰島素治療未能糾正SREBP-1、SCAP和INSIG-1之間失衡目的探討胰島素治療對GDM胎肺中AECII中脂質(zhì)合成的影響、及對SREBP-1、SCAP、INSIG-1表達(dá)的影響。方法(1)從對照組、GDM組、Ins組原代培養(yǎng)AECII。(2)油紅O染色檢測AECII內(nèi)脂質(zhì)。(3)免疫組化檢測SREBP-1、SCAP、INSIG-1蛋白在AECII的表達(dá);觀察SREBP-1的細(xì)胞內(nèi)定位。(4)RT-PCR檢測SREBP-1、SCAP、INSIG-1 m RNA在AECII內(nèi)的表達(dá)。(5)Western blot檢測SREBP-1、SCAP、INSIG-1蛋白在AECII內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果(1)建立了分離、純化、原代培養(yǎng)AECII的方法,細(xì)胞純度96±2%。(2)對照組AECII內(nèi)有較多脂滴,GDM組和Ins組AECII內(nèi)脂滴稀少。(3)對照組AECII,SREBP-1漿、核雙染細(xì)胞比率較GDM組和Ins組高(P0.05),GDM組和Ins組無差異。除SREBP-1蛋白在Ins組AECII中表達(dá)升高外(P0.05),其余蛋白在GDM組、Ins組AECII中均降低(P0.05)。(4)GDM組AECII中SREBP-1、SCAP、INSIG-1 m RNA和蛋白均降低(P0.05)。Ins組AECII中SREBP-1 m RNA和蛋白均升高(P0.05),SCAP、INSIG-1 m RNA和蛋白仍低于對照組(P0.05)。結(jié)論胰島素治療使SREBP表達(dá)升高,但不能糾正SREBP-1、SCAP、INSIG-1間的失衡,成熟的SREBP不能入核,最終仍不能增加胎肺脂質(zhì)合成。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R714.256
【圖文】：

在成功交配后可見大鼠陰道分泌物內(nèi)有arance existence of sperms in the vaginal secretion 只孕鼠，注射 STZ 后 72 h 血糖均升高至≥1/L。在實(shí)驗(yàn)期間共有 8 只鼠死亡，存活 16 只顯的多飲，多尿，每日需更換墊料，孕鼠。只孕鼠，注射 STZ 后血糖升高并≥15.0mmol/間共有 4 只孕鼠死亡，存活 21 只，存活率下降，無明顯的多飲，多尿的表現(xiàn)。孕鼠，4.5D 血糖均值為 5.56±0.69 mol/L，間血糖變化.5D 時血糖為 24.15±3.05 mmol/L，在 20.5D

在孕 9.5 天前胰島素治療可將血糖控制在正常cs of the materal blood glucose. Insulin treatment deceasedl before the day G9.5, and afterward glucose was with a hig鼠、胎鼠血糖、鼠胰島素及外源性人胰島素的血糖高于 Ins 組、對照組(P<0.001，P<0.001)，GIns 組 (P<0.001，P<0.001)。GDM 組孕鼠鼠胰島 組及 Ins 組胎鼠胰島素低于對照組(P=0.002，P=0.0于對照組、GDM 組(P<0.001，P<0.001)，Ins 組胎 組(P<0.001，P<0.001) (表 1)。 分娩后孕鼠和胎鼠血漿中血糖、鼠胰島素及人胰島素比較cose and rat/human insulin in the maternal and neonatal plparturitionControlGDMIn

Glucose (mmol/L) 3.72 ± 1.29 19.47 ± 5.17*7.50 ± 4.61*§Rat insulin (mU/L) 13.31 ± 2.40 11.26 ± 1.32*11.54 ± 1.59*Human insulin (pmol/L) 1.37 ± 0.99 3.97 ± 2.47 10.51 ± 4.37*§*: vs. Ctrl, P<0.05; §: vs. GDM, P<0.05.2.4 胎肺組織學(xué)光鏡下可見對照組胎肺組織處于囊狀期，有較多的原始肺泡出現(xiàn)，肺泡囊已形成。肺泡腔大而圓，相鄰肺泡間質(zhì)薄，肺泡周圍結(jié)締組織少。在肺泡腔內(nèi)有明顯皺褶突起。GDM 組胎肺處于小管期，原始肺泡的數(shù)目少，肺泡間質(zhì)和肺泡周圍結(jié)締組織增厚，肺泡腔變小呈不規(guī)則。經(jīng)胰島素治療后胎肺組織結(jié)構(gòu)與對照組相似(圖 3)。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 譚劍平;郭仲杰;王蘊(yùn)慧;劉穎琳;張建平;;正常中晚期妊娠羊水板層小體增長特征及其判斷胎肺成熟的意義[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2010年09期

2 ;Maintaining cholesterol homeostasis: Sterol regulatory element-binding proteins[J];World Journal of Gastroenterology;2004年21期

本文編號：2768313