本文關(guān)鍵詞：宮頸癌灶組織結(jié)構(gòu)的精細定性研究及其神經(jīng)纖維的分布情況，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目前,宮頸癌是僅次于乳腺癌的最常見的婦科惡性腫瘤,全世界每年新發(fā)病例近50萬人,死亡約23余萬人,嚴(yán)重威脅著婦女生命健康。發(fā)展中國家宮頸癌的每年新發(fā)病例及死亡病例均遠高于發(fā)達國家,其中我國就是宮頸癌高發(fā)地區(qū)之一。盡管HPV的持續(xù)感染是已知的導(dǎo)致宮頸癌的主要原因,許多國家開展大規(guī)模HPV疫苗接種來積極預(yù)防宮頸癌的發(fā)生；宮頸上皮細胞學(xué)檢查及HPV聯(lián)合檢測被較普遍應(yīng)用于有性生活婦女的宮頸癌篩查中,以助于疾病的早發(fā)現(xiàn)、早治療,但是我國宮頸癌的發(fā)病率及死亡率依然維持在較高水平,目前尚沒有一個完美的治療宮頸癌的方法,宮頸癌仍然是主要的公共健康問題。因此,進一步研究宮頸癌的進展機制,探討其可能的新的治療方向是十分必要的。腫瘤的發(fā)生發(fā)展與其所處內(nèi)外環(huán)境密切相關(guān),腫瘤細胞與其周圍環(huán)境的持續(xù)相互作用促進了腫瘤的發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)移。關(guān)于腫瘤與其所處環(huán)境的研究主要集中在以下幾種間質(zhì)成分,如：內(nèi)皮細胞、炎癥細胞、免疫因子等。然而除免疫分子、炎癥細胞等外,基本組織結(jié)構(gòu)也是腫瘤所處內(nèi)外環(huán)境的重要組成部分。目前關(guān)于腫瘤中基本組織結(jié)構(gòu)的研究,國內(nèi)外研究主要集中在血管、淋巴管方面,研究證實腫瘤中血管的生成與腫瘤的發(fā)病機制密切相關(guān),并對腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要作用。這一觀點已被國內(nèi)外學(xué)者普遍接受,同時進一步引起了人們對腫瘤中基本組織結(jié)構(gòu)的關(guān)注。在人體內(nèi),從解剖學(xué)角度看,神經(jīng)常與血管及淋巴管組織相伴行。盡管腫瘤的嗜神經(jīng)性(神經(jīng)浸潤)發(fā)生胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌等多種惡性腫瘤中已經(jīng)得到廣大學(xué)者的認同,然而傳統(tǒng)觀點認為腫瘤組織中并不存在神經(jīng)纖維。直到進入21世紀(jì)以來,國外研究者利用電鏡發(fā)現(xiàn)在膀胱癌、黑色素瘤等惡性腫瘤中存在神經(jīng)纖維的分布。此后,陸續(xù)有研究在前列腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)神經(jīng)纖維的分布,也有研究表明腫瘤中可能存在神經(jīng)新生。同時神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子與腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)系也逐漸被人們所認識。綜上所述,這些研究提示我們某些腫瘤組織中確實存在神經(jīng)纖維,且可能對腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性。然而,關(guān)于宮頸癌灶中的組織結(jié)構(gòu),國內(nèi)外已有研究證實其內(nèi)含有較豐富的血管及淋巴管,但是對于宮頸癌灶所處環(huán)境中神經(jīng)纖維的研究,僅有少量的報道集中在宮頸癌的神經(jīng)浸潤方面,尚無研究證實宮頸癌灶中是否含有神經(jīng)纖維及其與宮頸癌的相關(guān)性。因此我們有必要對宮頸癌灶的組織結(jié)構(gòu)進行詳細的定性研究,以全面了解組織成分,進一步探討其中神經(jīng)纖維的分布情況,以助于了解其與宮頸癌發(fā)病機制的相關(guān)性。我們的前期研究中對廣泛性子宮切除術(shù)后子宮主韌帶、骶韌帶及陰道旁組織復(fù)合體分別進行了組織結(jié)構(gòu)的定性定量研究,其中包括對神經(jīng)的定性及定量對比研究,這為本研究提供了一定的實驗經(jīng)驗及技術(shù)基礎(chǔ)。本研究分為三部分進行,具體如下：第一部分：宮頸癌灶組織結(jié)構(gòu)的精細定性研究本研究首先對宮頸癌灶中基本組織結(jié)構(gòu)進行定性分析,包括固有結(jié)締組織、脈管組織及神經(jīng)纖維。[目的]研究宮頸癌灶的組織結(jié)構(gòu),了解宮頸癌灶的組織成分。[方法]選取2014年6-10月在南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院行宮頸活檢及廣泛性子宮切除術(shù)后的新鮮宮頸癌灶標(biāo)本33例,每塊標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定、常規(guī)石蠟包埋、切片后分別采用HE染色、特殊染色及多種免疫組織化學(xué)染色對宮頸癌灶進行定性研究。對神經(jīng)纖維的研究中我們以神經(jīng)特異性抗體s-100標(biāo)記總神經(jīng),檢測宮頸癌灶中是否存在神經(jīng)纖維,進一步對神經(jīng)纖維的性質(zhì)和種類進行研究,分別以生長相關(guān)蛋白GAP-43抗體檢測新生神經(jīng),以髓鞘特殊染色檢測自主神經(jīng),并對自主神經(jīng)進行交感及副交感神經(jīng)(分別用酪氨酸羥化酶TH抗體、腸血管活性多肽VIP抗體標(biāo)記)的檢測分析。[結(jié)果]1宮頸癌灶中常見組織染色結(jié)果1.1 HE染色結(jié)果33例標(biāo)本中均可見大量不同分化程度的癌細胞,大量的血管組織,包含細小動靜脈及微血管。此外,癌間質(zhì)中尚可見豐富纖維結(jié)締組織,包繞癌巢。33例標(biāo)本中未能清晰辨認淋巴管及神經(jīng)纖維等組織結(jié)構(gòu)。1.2固有結(jié)締組織染色結(jié)果改良的Masson三色染色法顯示33例癌灶中均含有豐富的染色為深綠色膠原纖維,膠原纖維圍繞癌巢,分布在癌間質(zhì)中。未見染色為鮮紅色的平滑肌纖維。醛品紅染色法顯示33例癌灶中均含有染色為深紫色的彈力纖維,彈力纖維圍繞癌巢,分布在癌間質(zhì)中,其中大部分深紫色彈力纖維在動脈上顯色。1.3血管染色結(jié)果特異性標(biāo)記血管內(nèi)皮細胞的CD-34抗體免疫組化染色顯示33例標(biāo)本癌間質(zhì)中均含有豐富的染色為棕色的血管,部分血管管腔內(nèi)可見癌細胞浸潤。進一步用比醛品紅染色法顯示彈力纖維為深紫色的動脈。1.4淋巴管染色結(jié)果D2-40特異性標(biāo)記淋巴管,見33例癌灶中均含有較多染色為棕色的淋巴管,其分布在癌間質(zhì)中。部分淋巴管腔內(nèi)可見癌細胞浸潤。2神經(jīng)纖維染色結(jié)果2.1總神經(jīng)染色特異性標(biāo)記神經(jīng)的S-100抗體免疫組化染色顯示宮頸癌灶中總神經(jīng)染色陽性的有14例,陰性的有19例,總神經(jīng)陽性率為42.42%(14/33)。神經(jīng)纖維分布在癌間質(zhì)中。2.2新生神經(jīng)染色特異性標(biāo)記新生神經(jīng)的GAP-43抗體染色法顯示宮頸癌灶中新生神經(jīng)染色陽性的有11例,陽性率為33.33%(11/33)。新生神經(jīng)分布在癌間質(zhì)中,其所占神經(jīng)陽性數(shù)比例為78.57%(11/14)。2.3自主神經(jīng)染色變色酸2R亮綠法特異性染色法顯示宮頸癌灶中神經(jīng)髓鞘染色均為陰性。進一步用TH和VIP特異性抗體分標(biāo)記交感神經(jīng)和副交感神經(jīng),染色結(jié)果顯示交感神經(jīng)染色陽性有7例,副交感神經(jīng)染色陽性有5例,其中交感及副交感神經(jīng)均染色陽性有3例,兩者陽性率分別為21.21%(7/33)、15.15%(5/33)。交感神經(jīng)及副交感神經(jīng)占S-100陽性數(shù)的比例分別是50%(7/14)、35.71%(5/14)。[結(jié)論]本研究發(fā)現(xiàn),宮頸癌灶中除大量癌細胞外,尚有膠原纖維、彈力纖維、血管及淋巴管等常見組織結(jié)構(gòu),未見平滑肌纖維。此外還發(fā)現(xiàn)部分宮頸癌灶中存在神經(jīng)纖維,且在神經(jīng)的性質(zhì)上,神經(jīng)纖維以新生神經(jīng)為主；在神經(jīng)的種類上,均為無髓鞘神經(jīng),其中以自主神經(jīng)為主,交感神經(jīng)高于副交感神經(jīng)。第二部分：宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織中神經(jīng)纖維分布的對比研究[目的]比較宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織中神經(jīng)纖維的分布情況,探討宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布種類。[方法]收集南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院行廣泛性子宮切除術(shù)后的新鮮宮頸癌灶對側(cè)宮頸組織標(biāo)本11例,因“子宮肌瘤”、“子宮腺肌病”行全子宮切除術(shù)后新鮮宮頸標(biāo)本21例,所有標(biāo)本均經(jīng)組織病理學(xué)檢測為無癌及無癌前病變的宮頸組織。第一部分實驗的33例宮頸癌灶標(biāo)本也納入本次研究,共收集65例標(biāo)本。每塊標(biāo)本經(jīng)固定、脫水、石蠟包埋、切片后分別采用特異性標(biāo)記神經(jīng)纖維的S-100抗體、標(biāo)記新生神經(jīng)的GAP-43抗體、標(biāo)記交感神經(jīng)的TH抗體及標(biāo)記副交感神經(jīng)的VIP抗體進行免疫組織化學(xué)染色。將完成染色的玻片置于顯微鏡系統(tǒng)進行圖片拍攝并分析,分別記錄宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸玻片中S.100.GAP-43、TH及VIP染色陽性的例數(shù)。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析,以P0.05認為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。三組間神經(jīng)纖維陽性率的比較采用R×C表資料的卡方檢驗進行統(tǒng)計分析。[結(jié)果]1、三組間神經(jīng)纖維的染色結(jié)果(1)三組間總神經(jīng)的分布結(jié)果宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織間總神經(jīng)陽性率分別為42.42%、72.73%、76.19%。三組間總神經(jīng)分布具有顯著差異(x2=7.135,P=0.028),其中宮頸癌灶中總神經(jīng)的陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。(2)三組間新生神經(jīng)的分布結(jié)果宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織間新生神經(jīng)陽性率分別為33.33%、9.09%、4.76%。三組間新生神經(jīng)分布具有顯著差異(x2=7.532,P=0.023),其中宮頸癌灶中新生神經(jīng)的陽性率高于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。(3)三組間自主神經(jīng)的分布結(jié)果宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織間交感神經(jīng)陽性率分別為21.21%、54.55%、66.67%,副交感神經(jīng)陽性率分別為15.15%、18.18%、14.29%。(?) 三組間交感神經(jīng)的分布具有顯著差異(x2=11.841,P=0.003),其中宮頸癌灶中交感神經(jīng)的陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。(?) 三組間副交感神經(jīng)分布無明顯差異(x2=0.087,P=0.957)。2、三組間新生神經(jīng)及自主神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例分布結(jié)果(1)三組間新生神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例分布結(jié)果宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織三組間新生神經(jīng)占其總神經(jīng)陽性的比例分別為78.57%、12.5%、6.25%。三組間新生神經(jīng)占其總神經(jīng)陽性的比例分布具有顯著差異(x2=19.474,P=0.000),其中宮頸癌灶中新生神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例高于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。(2)三組間自主神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例分布結(jié)果(?) 三組間神經(jīng)中自主神經(jīng)均占大部分比例,其中交感神經(jīng)均高于同組副交感神經(jīng)。(?) 三組間交感神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例分布無顯著差異(x2=5.182,P=0.075)。(?) 三組間副交感神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例分布無明顯差異(x2=1.117,P=0.572)。[結(jié)論]宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布種類：(1)宮頸癌灶中總神經(jīng)的陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織,然而其中新生神經(jīng)的陽性率明顯高于其余兩組,宮頸癌灶中神經(jīng)纖維主要為新生神經(jīng)；(2)宮頸癌灶中交感神經(jīng)陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織,副交感神經(jīng)陽性率無明顯差異,然而三組間均以自主神經(jīng)為主,且交感及副交感神經(jīng)分布的比例是相同的,交感神經(jīng)均高于副交感神經(jīng)。第三部分：宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與臨床病理參數(shù)關(guān)系的研究[目的]探討宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。[方法]收集前期實驗行宮頸活檢術(shù)/廣泛性子宮切除術(shù)后31例ⅠA期—ⅡA期宮頸癌灶標(biāo)本,安徽省立醫(yī)院行全子宮切除術(shù)/廣泛性子宮切除術(shù)后ⅠA期—ⅡA期宮頸癌灶已包埋蠟塊組織108例,共139例。所有蠟塊組織經(jīng)連續(xù)切片后分別用神經(jīng)特異性抗體S-100、新生神經(jīng)特異性抗體GAP-43、自主神經(jīng)(交感神經(jīng)特異性抗體TH、副交感神經(jīng)特異性抗體VIP)進行免疫組織化學(xué)染色,將完成染色的玻片置于顯微鏡系統(tǒng)進行圖片拍攝并分析。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析,以P0.05認為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。采用獨立樣本t檢測分析宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與患者年齡之間的關(guān)系,采用R×C表資料的卡方檢驗分析宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與其余各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系,采用二分類Logistic回歸析宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與臨床病理參數(shù)的相關(guān)關(guān)系。[結(jié)果]1、神經(jīng)纖維染色結(jié)果139例宮頸癌標(biāo)本中總神經(jīng)染色陽性共有80例,陽性率為57.55%(80/139)；新生神經(jīng)染色陽性共有48例,陽性率為34.53%(48/139)；自主神經(jīng)中交感神經(jīng)染色陽性共有46例,副交感神經(jīng)染色陽性共有18例,其中交感及副交感神經(jīng)均染色陽性有11例,交感神經(jīng)陽性率為33.09%(46/139),副交感神經(jīng)陽性率為12.95%(18/139)。2、宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系2.1宮頸癌灶中總神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(?) 年齡與宮頸癌灶中總神經(jīng)的分布具有顯著差異(t=-2.713,P=0.008),其中總神經(jīng)陽性頸癌灶組患者的平均年齡低于總神經(jīng)陰性組。(?) 宮頸癌灶中總神經(jīng)的分布與其病理類型具有顯著相關(guān)性(x2=6.279,P=0.012),其中鱗癌的總神經(jīng)分布陽性率明顯高于腺癌。(?) 分期、分化程度、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均與宮頸癌灶中總神經(jīng)的分布無明顯差異,其P值分別為0.452、0.798、0.810、0.640、0.681。(?) 二分類Logistic回歸分析結(jié)果表明年齡與病理類型對宮頸癌灶的總神經(jīng)分布具有相關(guān)性,其中年齡為保護因素,年齡越大,宮頸癌灶中總神經(jīng)的陽性率越低(B=-0.64,P=0.033)；病理類型為保護因素,宮頸腺癌中總神經(jīng)陽性率低于鱗癌(B=-1.571,P=0.013)；而分期、分化程度、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均對宮頸癌灶的總神經(jīng)分布無顯著相關(guān)性。2.2宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(?) 宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布與患者的年齡無明顯差異(t=0.588,P=0.558)。(?) 宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布與其分期、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無顯著相關(guān)性,其P值分別為0.163、0.673、0.308、0.565、0.771、0.539。(?) 二分類Logistic回歸分析結(jié)果表明分期對宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布具有相關(guān)性,且分期為危險因素,分期越高宮頸癌灶中新生神經(jīng)陽性率越高(B=0.686,P=0.005)；而年齡、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均對宮頸癌灶的新生神經(jīng)分布無顯著相關(guān)性。2.3宮頸癌灶中自主神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系2.3.1宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(?) 年齡與宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布具有顯著差異(t=2.432,P=0.016),其中交感神經(jīng)陽性的宮頸癌灶組中患者平均年齡小于交感神經(jīng)陰性組。(?) 宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布與其病理類型具有顯著相關(guān)性(x2=3.979,P=0.046),其中鱗癌的交感神經(jīng)的陽性率明顯高于腺癌。》宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布與其分期、分化程度、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無顯著相關(guān)性,其P值分別為0.229、0.972、0.548、0.709、0.837。(?) 二分類Logistic回歸分析方結(jié)果表明分期對宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布具有相關(guān)性,且分期為危險因素,分期越高宮頸癌灶中交感神經(jīng)陽性率越高(B=0.606,P=0.014)；而年齡、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均對宮頸癌灶的交感神經(jīng)分布無顯著相關(guān)性。2.3.2宮頸癌灶中副交感神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(?) 宮頸癌灶中副交感神經(jīng)的分布與患者的年齡無明顯差異(t=0.366,P=0.715)。(?) 宮頸癌灶中副交感神經(jīng)的分布與其分期、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無顯著相關(guān)性,其P值分別為0.081、0.681、0.354、0.631、0.258、0.538。(?) 二分類Logistic回歸分析結(jié)果表明分期對宮頸癌灶中副交感神經(jīng)的分布具有相關(guān)性,且分期為危險因素,分期越高宮頸癌灶中副交感神經(jīng)陽性率越高(B=0.710,P=0.020)；而年齡、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均對宮頸癌灶的副交感神經(jīng)分布無顯著相關(guān)性。[結(jié)論]宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與臨床病理參數(shù)的關(guān)系：(1)神經(jīng)纖維在年輕宮頸癌患者中分布陽性率較高,以交感神經(jīng)為主,而與副交感神經(jīng)及新生神經(jīng)不相關(guān)；(2)神經(jīng)纖維在宮頸鱗癌中分布陽性率較高,且以交感神經(jīng)為主,而與副交感神經(jīng)及新生神經(jīng)不相關(guān);(3)臨床分期分別是宮頸癌灶中新生神經(jīng)、交感神經(jīng)及副交感神經(jīng)分布的影響因素,其中分期越高,其神經(jīng)陽性率可能越高；(4)宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布與分化程度、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無明顯相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】：宮頸癌 神經(jīng)纖維 新生神經(jīng)
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 摘要3-12
• ABSTRACT12-26
• 前言26-29
• 第一部分 宮頸癌灶組織結(jié)構(gòu)的精細定性研究29-47
• 1 資料與方法29-37
• 2 結(jié)果37-43
• 3 結(jié)論43
• 4 討論43-47
• 第二部分 宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織與正常宮頸組織中神經(jīng)纖維分布的對比研究47-58
• 1 資料與方法47-49
• 2 結(jié)果49-54
• 3 結(jié)論54
• 4 討論54-58
• 第三部分 宮頸癌組織中神經(jīng)纖維的分布與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系58-70
• 1 資料與方法58-59
• 2 結(jié)果59-65
• 3 結(jié)論65
• 4 討論65-70
• 全文小結(jié)70-72
• 參考文獻72-77
• 附錄77-78
• 攻讀碩士期間取得的成果78-80
• 致謝80-82

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳楠;江靜;李小平;屠錚;魏麗惠;;宮頸癌分子靶向治療藥物研究進展[J];中國婦產(chǎn)科臨床雜志;2010年01期

  本文關(guān)鍵詞：宮頸癌灶組織結(jié)構(gòu)的精細定性研究及其神經(jīng)纖維的分布情況，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：276339