【摘要】：宮頸癌(cervical cancer)嚴重危害現(xiàn)代女性的身心健康,目前其發(fā)病率居女性惡性腫瘤的第四位。盡管隨著目前宮頸癌篩查工作的實施有助于顯著降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率,但宮頸癌篩查僅可盡早檢查出部分宮頸癌前病變,不能篩查全部的宮頸病變,也不能篩查具有風險因素的高危人群。故尋找影響宮頸病變的相關(guān)因素并進一步研究其致宮頸癌發(fā)生的分子機制,可避免對相應良性病變進行檢測和不必要的治療,并可且為提出宮頸癌新的預防措施提供理論依據(jù)。葉酸屬于水溶性B族維生素,其參與DNA的合成,并能通過影響表觀遺傳修飾來調(diào)控基因的表達。葉酸近年來被發(fā)現(xiàn)在多種上皮惡性腫瘤的進展和預防方面發(fā)揮重要作用。這些研究一致地提示葉酸攝入量(膳食和膳食補充)或葉酸的血液測量值與這些惡性腫瘤呈反向關(guān)聯(lián)。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)可以通過各種機制引起器官纖維化及在腫瘤發(fā)生與發(fā)展中起著重要的作用。EMT賦予宮頸癌細胞遷移和侵襲特性,誘導間充質(zhì)干細胞特性,防止細胞凋亡和衰老,并可逃逸免疫應答。本實驗通過使用不同濃度的葉酸干預宮頸癌Siha細胞,分析未經(jīng)葉酸干預后與經(jīng)葉酸干預后的宮頸癌Siha細胞中EMT相關(guān)蛋白E-鈣粘蛋白及波形蛋白的表達情況,分析葉酸、EMT及宮頸病變之間的關(guān)系,為宮頸癌的防控提供可靠依據(jù)。目的:探討葉酸是否可以影響宮頸癌Siha細胞中EMT的標志物E-鈣粘蛋白與波形蛋白的表達,分析葉酸是否參與宮頸上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,進而影響宮頸癌細胞的生長、侵襲及轉(zhuǎn)移。方法:1.對宮頸癌Siha細胞進行培養(yǎng),并用不同濃度的葉酸進行干預;2.運用MTT實驗方法檢測培養(yǎng)基中含有葉酸的Siha細胞的增殖速率與未經(jīng)葉酸干預的空白對照組即A組的細胞增殖速率;3.運用劃痕實驗方法檢測培養(yǎng)基中含有葉酸的Siha細胞的轉(zhuǎn)移能力與未經(jīng)葉酸干預的空白對照組即A組的細胞轉(zhuǎn)移能力;4.運用Transwell侵襲實驗檢測培養(yǎng)基中含葉酸的Siha細胞的遷徙能力與空白對照組中Siha細胞的遷徙能力;5.運用Western Blotting方法檢測培養(yǎng)基中含葉酸的Siha細胞波形蛋白、E-鈣粘蛋白的表達量與未經(jīng)葉酸干預的空白對照組中Siha細胞波形蛋白、E-鈣粘蛋白的表達量。6.統(tǒng)計方法均采用SPSS22.0軟件進行,組間差異采用單因素方差分析進行統(tǒng)計,所有的計量資料符合正態(tài)分布均采用均數(shù)±標準差(X±S)形式表示,P0.05為差異存在統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1.MTT實驗方法檢測到培養(yǎng)基中含有葉酸的Siha細胞的增殖速率低于不含葉酸的空白對照組,并且隨著葉酸濃度的升高Siha細胞增殖的速率逐漸降低。2.劃痕實驗檢測到培養(yǎng)基中含有葉酸的Siha細胞的轉(zhuǎn)移能力低于不含葉酸的空白對照組,并且隨著葉酸濃度的升高Siha細胞轉(zhuǎn)移能力逐漸降低。3.Transwell侵襲實驗檢測到培養(yǎng)基中含葉酸的Siha細胞的遷徙能力低于未經(jīng)葉酸干預的空白對照組,并且隨著葉酸濃度的升高Siha細胞遷徙能力逐漸降低。4.Western Blotting方法檢測結(jié)果顯示:培養(yǎng)基中含葉酸的Siha細胞波形蛋白的表達量低于未經(jīng)葉酸干預的空白對照組,并且隨著葉酸濃度的升高Siha細胞波形蛋白的表達逐漸降低;而培養(yǎng)基中含葉酸的Siha細胞E-鈣粘蛋白的表達量均高于未經(jīng)葉酸干預的空白對照組,并且隨著葉酸濃度的升高Siha細胞E-鈣粘蛋白的表達量逐漸升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結(jié)論:1.葉酸對宮頸癌細胞的增殖與侵襲能力具有抑制作用。2.葉酸可促進宮頸癌Siha細胞中E-鈣粘蛋白的表達,抑制波形蛋白的表達而抑制宮頸癌細胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),從而抑制宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R737.33
【圖文】：

錄不同濃度的葉酸干預后連續(xù) 48h，不同線圖 2-1（以時間為橫坐標、細胞個數(shù)為同濃度葉酸干預后，Siha 細胞的增殖能力酸干預）相比，隨著葉酸濃度的升高（Bml），Siha 細胞增殖速率逐漸減少,表明細能力具有抑制作用。Cell Count-C20:00 20:00:00Cell Count-C3Time0:00:00 2:00:00 4:00:00 6:00:00 8:00:00 10:00:00 12:00:00 14:00:00 16:00:00 18:00:00 20:00:003603804004204404604805005200:00:00 2:00:00 4:00:00 6:00300320340360380400420440460B 組

D 組圖 2-3：Transwell 侵襲實驗檢測不同濃度葉酸干預后 48h Siha 細胞侵襲能力2.4 Western Blotting 檢測不同濃度葉酸對 Siha 細胞中 E-cadherin 蛋白、Vimentin 蛋白表達水平的影響Western Blotting 方法檢測結(jié)果顯示：A 組（未經(jīng)葉酸干預的 Siha 細胞）細胞中 E-cadherin 蛋白的表達水平低于經(jīng)葉酸干預組（葉酸濃度：B 組 0.1mol/ml；C 組 0.5mol/ml；D 組 1mol/ml），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。而 A 組（未經(jīng)任何處理的 Siha 細胞）細胞中 Vimentin 蛋白的表達水平高于經(jīng)葉酸干預組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。進一步說明經(jīng)過葉酸干預后能夠使宮頸癌 Siha

D 組圖 2-4 ： MTT 檢測四組 Siha 細胞 12h、24h、48h 增殖情況Figure2β-actin β-actinE-鈣粘蛋白 波形蛋白圖 A 圖 B圖 2-5：圖 A、B 為四組 Siha 細胞中 E-鈣粘蛋白、波形蛋白的表達（從左到右依次為 A 組、B 組、C 組、D 組）

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱伶俐;葉迅;;雷公藤內(nèi)酯醇對足細胞EMT相關(guān)蛋白mRNA表達的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2016年31期

2 常芬;肖貴華;李琪;楊進;;慢性阻塞性肺病及其相關(guān)非小細胞肺癌進程與EMT的相關(guān)性研究[J];中國免疫學雜志;2017年04期

3 南寧;寨旭;王宇;陳琦;;藥物治療后腎癌EMT相關(guān)基因表達譜分析及對預后的影響[J];實用癌癥雜志;2017年04期

4 吳池華;李一;楊麟翰;黃婷;喻淵;;雙氫青蒿素作用于乳腺癌細胞抑制EMT和轉(zhuǎn)移的作用及機制[J];臨床和實驗醫(yī)學雜志;2017年13期

5 陳倩云;張麗娟;范恒;楊佳;徐萌;彭穎;;EMT與炎癥性腸病和結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)直腸癌的研究進展[J];世界華人消化雜志;2016年16期

6 叢寧寧;張慶瑜;;EMT在消化系腫瘤中的研究進展[J];世界華人消化雜志;2013年03期

7 朱碧輝;劉成武;劉珂路;姚勝華;楊朝陽;佘建強;劉曉燕;夏佳磊;;電動汽車EMT系統(tǒng)分析與故障診斷研究[J];湖北汽車工業(yè)學院學報;2017年01期

8 曹正策;岳翔;張旭;張振闖;楊奎;;基于EMT純電動公交車的行駛工況研究和構(gòu)建[J];汽車技術(shù);2016年04期

9 強勇;陳鐘;;EMT相關(guān)分子標志物在膽管癌侵襲轉(zhuǎn)移中的研究進展[J];世界華人消化雜志;2015年25期

10 劉yN;梁朝朝;;前列腺癌EMT機制研究進展[J];北方藥學;2014年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 王亞鵬;;上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變(EMT)在百草枯誘導肺纖維化中的作用及機制探討[A];中國毒理學會第七次全國毒理學大會暨第八屆湖北科技論壇論文集[C];2015年

2 李艷;王曉鈺;王麗京;徐濤;盧曉曄;蔡冬青;耿建國;楊雪松;;PTEN抑制胚胎原腸胚形成期EMT的過程[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術(shù)大會論文摘要集[C];2011年

3 毛宇彬;張妮妮;徐謹斐;;Twist家族在乳腺癌EMT中的功能研究[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術(shù)大會論文摘要集[C];2011年

4 王雅倩;孫佳楠;王小英;倪瑤瑤;蔡凱;竇駿;;下調(diào)ZEB1表達對黑色素瘤干細胞EMT及致瘤性影響[A];第九屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2014年

5 徐向明;林建江;;EMT和腫瘤進展[A];2011年浙江省肛腸外科學術(shù)大會暨結(jié)直腸肛門疾病診治新進展學習班論文匯編[C];2011年

6 趙志偉;黃立維;苗婭莉;文繼銳;吳江;;低剪應力誘導卵巢癌SKOV3細胞發(fā)生EMT及其相關(guān)的分子機制[A];第十二屆全國生物力學學術(shù)會議暨第十四屆全國生物流變學學術(shù)會議會議論文摘要匯編[C];2018年

7 劉尊東;魏恒云;楊亞宗;馬艷虹;高子翔;鄒向陽;;褐藻多糖硫酸酯對腫瘤HepG2細胞EMT的影響[A];第十二屆海洋藥物學術(shù)年會會刊[C];2015年

8 何敏;許曉彥;;EMT逆問題與圖像重建算法研究[A];第六屆全國信息獲取與處理學術(shù)會議論文集（2）[C];2008年

9 楊波;高新;楊洪濤;;中醫(yī)藥防治腹膜間皮細胞EMT的研究進展[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學會腎臟疾病專業(yè)委員會2018年學術(shù)年會論文摘要匯編[C];2018年

10 張江;劉彩霞;譚眉靈;秦曉群;向陽;;臭氧應激的小鼠支氣管肺組織EMT模型建立及整合素β4的表達[A];中國生理學會第24屆全國會員代表大會暨生理學學術(shù)大會論文匯編[C];2014年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 記者 馬曉芳;揭秘華為架構(gòu)變動：與EMT并行 董事會走向臺前[N];第一財經(jīng)日報;2011年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 鐘安菁;結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的EMT改變和基因突變篩查[D];浙江大學;2016年

2 左建宏;Bcl-2高表達誘導頭頸部鱗癌細胞部分EMT、促進其侵襲和轉(zhuǎn)移機制研究[D];中南大學;2012年

3 高麗麗;甘草酸抑制糖基化修飾調(diào)控EMT的機制研究[D];大連醫(yī)科大學;2016年

4 冉青珍;EMT模型大鼠低妊娠功能及中藥治療機理的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2001年

5 王忠;原發(fā)性肝癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞的EMT分型及臨床意義[D];南方醫(yī)科大學;2017年

6 陳麗;從EMT角度探討六味地黃湯干預5/6腎切除大鼠慢性腎衰的機制[D];湖南中醫(yī)藥大學;2012年

7 王冬;黑素瘤MAGE-A1基因以及EMT相關(guān)miRNA功能研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

8 張婧;結(jié)直腸癌中EMT標志物的表達對預后的意義以及IGFBP-rP1在EMT和轉(zhuǎn)移中的作用及機制研究[D];浙江大學;2016年

9 張曉艷;SENP1促進前列腺癌細胞EMT的作用及機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2017年

10 張麗;BMP-2調(diào)控EMT促進伴微鈣化乳腺癌轉(zhuǎn)移的機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2016年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 楊樹星;葉酸誘導EMT在宮頸癌細胞中的作用研究[D];山西醫(yī)科大學;2019年

2 黃麓穎;鈣敏感受體在前列腺癌細胞耐藥和EMT中作用的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2018年

3 趙莉莉;亮菌多糖對GES-1細胞EMT的影響及相關(guān)機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2018年

4 張祥偉;YKL-40誘導人支氣管上皮細胞發(fā)生EMT效應及誘導HMGB-1表達的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

5 王海南;卵泡抑素樣蛋白1通過EMT通路在前列腺癌骨轉(zhuǎn)移中的研究[D];南京醫(yī)科大學;2015年

6 馬鵬程;腸道菌群失調(diào)與結(jié)直腸癌EMT的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 馮寧;腎透明細胞癌與EMT的相關(guān)性研究[D];南昌大學;2014年

8 王萍;維生素D通過抑制EMT延緩卵巢表面上皮細胞的惡性轉(zhuǎn)化[D];蘇州大學;2015年

9 姚盛慧;加味消癥飲癥對EMT患者術(shù)后復發(fā)率的影響[D];南京中醫(yī)藥大學;2004年

10 鄭靜娜;傳感器位置重組與多目標算法在EMT圖像重建中的應用[D];遼寧大學;2016年

本文編號：2747877