【摘要】：目的:本實驗研究通過建立大鼠子宮韌帶機(jī)械性損傷模型,利用子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化潛能,使損傷的韌帶組織進(jìn)行再生修復(fù),檢測在修復(fù)前后韌帶中彈性蛋白表達(dá)的情況,初步探討干細(xì)胞在韌帶組織損傷修復(fù)過程中的部分再生或完全再生功能。方法:選擇體重為300±10g的清潔級SD雌性大鼠建立第一次普通大鼠子宮韌帶機(jī)械性損傷模型,分別取術(shù)后3天、6天、9天、12天、15天以及正常的大鼠子宮韌帶,每組取材后將組織進(jìn)行福爾馬林浸泡,后石蠟包埋組織,采用蘇木素染色法分析不同時間點瘢痕愈合情況,確定最佳的瘢痕修復(fù)時間點。第二次建立注射干細(xì)胞的大鼠子宮韌帶機(jī)械性損傷模型,此次于損傷的韌帶部位局部注射未標(biāo)記的人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞,分別于術(shù)后3天、6天、9天、12天取材,用小鼠抗人細(xì)胞核抗體(mAb1281)進(jìn)行核標(biāo)記,陽性細(xì)胞即為移植細(xì)胞,以此利用免疫熒光技術(shù)觀察移植的人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠體內(nèi)存活情況。通過兩次造模,最終選定瘢痕修復(fù)最佳時間點。以該時間點為基礎(chǔ),建立瘢痕組、干細(xì)胞組以及正常對照組模型,利用蘇木素染色、免疫組織化學(xué)法和westen-blot比較三組間損傷子宮韌帶在瘢痕修復(fù)過程中彈性蛋白的表達(dá)情況,從而探討干細(xì)胞在韌帶組織損傷修復(fù)過程中的部分再生或完全再生功能。結(jié)果:1.蘇木素染色法瘢痕修復(fù)最佳時間點的選取:術(shù)后3天、6天、9天、12天、15天、正常大鼠子宮韌帶進(jìn)行HE染色,結(jié)果發(fā)現(xiàn),術(shù)后3天韌帶組織中明顯可見大量新生壁薄的毛細(xì)血管、炎細(xì)胞、成纖維細(xì)胞,膠原纖維少,隨時間推移損傷組織中新生血管、炎細(xì)胞、成纖維細(xì)胞逐漸減少,網(wǎng)狀纖維及膠原纖維逐漸增多,12天與15天組織瘢痕修復(fù)無明顯差別,遂取12天為實驗時間節(jié)點。2.免疫熒光染色檢測人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的存活情況:用小鼠抗人核抗體(mAb1281)標(biāo)記注射人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞后,觀察術(shù)后3天、6天、9天、12天大鼠子宮韌帶中干細(xì)胞存活情況,發(fā)現(xiàn)12天免疫熒光反應(yīng)仍呈陽性,表明此時間點間充質(zhì)干細(xì)胞仍存活。3.術(shù)后12天瘢痕組、干細(xì)胞及正常對照組之間的的比較:(1)免疫組化結(jié)果顯示:瘢痕組、干細(xì)胞組及正常組的OD值分別為分別為0.09±0.01、0.23±0.04、0.22±0.02;彈性蛋白在瘢痕組中的陽性表達(dá)比干細(xì)胞組低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),干細(xì)胞組與正常對照組相比彈性蛋白抗體陽性表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)免疫印跡法檢測結(jié)果顯示:彈性蛋白在瘢痕組、干細(xì)胞組、正常對照組中的灰度值分別于β-Actin灰度值的比值為:0.17±0.01、0.34±0.12、0.32±0.10,彈性蛋白在瘢痕組中的表達(dá)比干細(xì)胞組中低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),干細(xì)胞組與正常對照組相比彈性蛋白抗體陽性表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:彈性蛋白在干細(xì)胞組中的表達(dá)較瘢痕組明顯增高,表明干細(xì)胞在損傷的韌帶組織修復(fù)過程中發(fā)揮了其分化潛能,可向成纖維細(xì)胞分化,或通過其他途徑,如外泌體、旁分泌作用等促進(jìn)彈性蛋白的分泌,進(jìn)一步組裝成成熟的彈性纖維,使組織部分或完全再生。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R711.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 嚴(yán)冰浩;張燕;方碩;王越;劉厚奇;;間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體的制備方法及應(yīng)用[J];解剖學(xué)雜志;2016年05期

2 鐘玉蘭;淦鑫;;間充質(zhì)干細(xì)胞源外泌體在肺部疾病中的應(yīng)用與作用[J];中國組織工程研究;2019年13期

3 劉超;張麗君;陶昊;杜心潔;王芮;李文菁;丁淑梅;王怡;姜磊;黃玉香;;基于細(xì)胞生物學(xué)方法比較5種不同組織來源間充質(zhì)干細(xì)胞的特征[J];中國組織工程研究;2019年33期

4 徐鄭美;邵立宇;孫宏亮;王瑤;許美花;魯文賡;;間充質(zhì)干細(xì)胞在動物臨床上的應(yīng)用前景[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2019年08期

5 阿諾得 卡普蘭;廖聯(lián)明;王萍;譚建明;;間充質(zhì)干細(xì)胞更改名稱的時候到了[J];中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版);2017年05期

6 邱坤銀;廖雄宇;郭淑儀;祁皓寧;藍(lán)菁菁;方建培;黃科;黎陽;徐宏貴;周敦華;;間充質(zhì)干細(xì)胞治療兒童難治性遲發(fā)性出血性膀胱炎療效和安全性的臨床研究[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2018年03期

7 陳俊秋;黃梁滸;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其外泌體促血管再生的分子機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2018年06期

8 賴秀藍(lán);馬廉;;間充質(zhì)干細(xì)胞的臨床應(yīng)用及產(chǎn)業(yè)化前景[J];中國小兒血液與腫瘤雜志;2016年06期

9 申曉靖;劉海蓉;劉新燕;趙鵬;鄭建金;盧恕來;王超;;阿司匹林影響人牙髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的新型藥理研究[J];中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版);2017年01期

10 陶一昕;馬鋼;;皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中國科學(xué):生命科學(xué);2017年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 白雪;霍波;;面積約束情況下形狀對間充質(zhì)干細(xì)胞分化的影響[A];第十一屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議暨第十三屆全國生物流變學(xué)學(xué)術(shù)會議會議論文摘要匯編[C];2015年

2 李坦;劉卓;徐運;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)3型的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編（上）[C];2015年

3 陳可;王丁;韓之波;朱德林;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外發(fā)揮免疫活性的研究[A];第12屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

4 金明順;張毅;賈秀芬;周燕華;閆妍;劉慧雯;;小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)以及多潛能分化的研究[A];中國解剖學(xué)會第十一屆全國組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2009年

5 張彥;李尚珠;;間充質(zhì)干細(xì)胞在血管工程中的機(jī)制及應(yīng)用[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合周圍血管疾病學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2009年

6 石玉;戴\戎;;周期性拉應(yīng)力對間充質(zhì)干細(xì)胞分化影響的研究[A];第九屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

7 黎嬌;朱爭艷;杜智;駱瑩;王鵬;高英堂;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌物對肝細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第30次學(xué)術(shù)年會暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會論文集[C];2010年

8 余慧;黃紅云;陳琳;王洪美;;生物反應(yīng)器培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

9 覃永亮;曾慧蘭;卜欠欠;鐘啟;韓新愛;;尼古丁誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[A];第13屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2011年

10 喬淑敏;陳廣華;王易;吳德沛;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（下冊）[C];2012年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 見習(xí)記者 卜葉;科學(xué)家勾勒間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用“路線圖”[N];中國科學(xué)報;2019年

2 本報記者 劉艷芳;牙髓間充質(zhì)干細(xì)胞填補了干細(xì)胞研究的空白[N];廣東科技報;2017年

3 上海生科院 上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所 曹楷;間充質(zhì)干細(xì)胞：干細(xì)胞中的孫悟空[N];上�？萍紙�;2014年

4 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細(xì)胞研究又見新方法[N];健康報;2013年

5 劉道安;細(xì)胞產(chǎn)品國家工程研究中心啟用間充質(zhì)干細(xì)胞庫[N];健康報;2007年

6 記者　陳建強;首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫在津建成[N];光明日報;2006年

7 南方日報記者 嚴(yán)慧芳;選擇干細(xì)胞儲存須謹(jǐn)慎[N];南方日報;2016年

8 記者 李素鋒;我市首例間充質(zhì)干細(xì)胞移植手術(shù)取得成功[N];臨汾日報;2009年

9 馮國梧;全球首個臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫規(guī)�；\營[N];科技日報;2008年

10 劉瑩清;全球首個臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫泰達(dá)規(guī)模運營[N];北方經(jīng)濟(jì)時報;2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳曉;IFN-β基因?qū)腴g充質(zhì)干細(xì)胞對非小細(xì)胞肺癌遷移增殖的作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2019年

2 馬彩云;間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞修復(fù)肺損傷研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2018年

3 浦雯雯;人小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞體外快速成肝誘導(dǎo)相關(guān)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2018年

4 韓兵;脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞旁分泌因子抗病理性瘢痕成纖維細(xì)胞纖維化的作用及分子機(jī)制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2018年

5 亓立峰;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞及細(xì)胞因子共移植治療腦損傷的分子機(jī)理研究[D];山東大學(xué);2018年

6 鄧鑫;PIWIL2在食管癌發(fā)生發(fā)展中的作用和機(jī)制以及脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離鑒定的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2018年

7 朱永朝;人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞特性及其生物學(xué)功能的研究[D];寧夏大學(xué);2015年

8 段妍;細(xì)胞膜片技術(shù)的成骨微環(huán)境的研究及新型成骨材料的研發(fā)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

9 易東曄;膠質(zhì)瘤相關(guān)間充質(zhì)干細(xì)胞在膠質(zhì)瘤微環(huán)境中向血管周細(xì)胞分化及其血管生成能力的研究[D];華中科技大學(xué);2018年

10 張穎穎;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對臭氧誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病小鼠作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 薛婧;低劑量地西他濱增強間充質(zhì)干細(xì)胞對2型糖尿病小鼠胰島修復(fù)效應(yīng)的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2018年

2 張志慧;順鉑對腫瘤間充質(zhì)干細(xì)胞IL-6表達(dá)的影響及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2019年

3 楊格;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞微泡對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞組蛋白乙�；接绊懙难芯縖D];山西醫(yī)科大學(xué);2019年

4 王玲玲;LOX和Fibulin-5在人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)大鼠子宮韌帶損傷中表達(dá)的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2019年

5 韓曉瑾;人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定及生長因子對其向韌帶成纖維細(xì)胞分化作用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2019年

6 袁瑞利;人子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞在修復(fù)大鼠子宮韌帶損傷過程中彈性蛋白的表達(dá)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2019年

7 林瑤;間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體改善骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外衰老的初步研究[D];深圳大學(xué);2018年

8 張霞;基于合成基因回路的尿酸調(diào)控評價研究[D];安徽大學(xué);2019年

9 魏真真;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎小鼠腸黏膜通透性的影響及相關(guān)作用機(jī)制探討[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

10 楊作峰;人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞對妊娠期糖尿病大鼠血糖及胰島細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響的研究[D];沈陽醫(yī)學(xué)院;2019年

本文編號：2746931