【摘要】：目的:生命早期(母體孕期和哺乳期)是子代生長發(fā)育中至關(guān)重要的時(shí)期。大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床回顧性研究提示,生命早期母體高脂飲食能夠?qū)е履阁w自身體內(nèi)代謝水平、炎癥水平及腸道菌群的變化,并可將其傳遞給子代產(chǎn)生相應(yīng)的影響,從而增加子代對(duì)肥胖及糖尿病等多種疾病的易感性。已有研究提示生命早期母體高脂飲食可能會(huì)增加子代患炎癥性腸病的概率,但其潛在機(jī)制仍未闡明。本研究擬建立生命早期母體高脂飲食模型,隨后評(píng)價(jià)子代小鼠生長發(fā)育、腸道菌群、腸粘膜屏障及腸道炎性狀態(tài),旨在探討生命早期母體高脂飲食對(duì)子代小鼠成年期結(jié)腸炎易感性的影響及其可能的機(jī)制。方法:C57BL/6妊娠小鼠隨機(jī)分為母體高脂飲食(maternal high fat diet,MHFD)組和正常飲食(maternal normal diet,MND)組,妊娠期(21天)和哺乳期(21天)分別給予高脂飲食和正常飲食。兩組孕鼠均自然分娩,出生時(shí)及出生后每周監(jiān)測子代小鼠體質(zhì)量直至8周。收集3周齡子代小鼠糞便并采用16S r DNA法評(píng)價(jià)腸道菌群變化。3周齡子代小鼠采用FITC-D(fluoresceinisothiocyanate-conjuagted dextran,FITC-D)灌胃法評(píng)價(jià)腸道通透性;HE染色評(píng)價(jià)小腸絨毛和結(jié)腸隱窩發(fā)育及炎癥情況;免疫組化法評(píng)價(jià)腸道細(xì)胞增值(Ki-67)及黏蛋白(MUC2)的表達(dá);PAS染色法評(píng)價(jià)杯狀細(xì)胞的數(shù)目;免疫熒光法評(píng)價(jià)腸道組織緊密連接蛋白(ZO-1)的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測腸道組織中炎癥因子和腸屏障相關(guān)蛋白m RNA的相對(duì)表達(dá)量。隨后2組子代小鼠均給予正常飲食喂養(yǎng)直至8周,連續(xù)給予2%葡聚糖硫酸鈉(Dextran Slfate Sodium,DSS)5天后建立結(jié)腸炎模型;運(yùn)用DAI評(píng)分、HE染色及鏡下病理評(píng)分及炎性因子m RNA的表達(dá)水平評(píng)價(jià)兩組小鼠的結(jié)腸炎嚴(yán)重程度。結(jié)果:1、MHFD組子代小鼠在出生后第2、3、4周體重顯著高于MND組,其他時(shí)間段兩組小鼠體質(zhì)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與3周齡MND組子代小鼠相比,MHFD組小鼠小腸絨毛長度及結(jié)腸隱窩深度明顯縮短;每個(gè)小腸絨毛中Ki-67陽性細(xì)胞數(shù)(18.00±4.74個(gè)vs 24.60±4.17個(gè),P0.01)明顯減少;每個(gè)結(jié)腸隱窩中杯狀細(xì)胞的數(shù)目(14.70±2.91個(gè)vs 28.10±4.95個(gè),P0.001)和MUC2陽性細(xì)胞數(shù)(20.60±3.13個(gè)vs 30.00±3.33個(gè),P0.001)均明顯減少。2、通過16S rDNA菌群測序發(fā)現(xiàn)2組3周齡小鼠腸道菌群β多樣性存在顯著差異。與MND組相比,MHFD組OTU種類及α多樣性明顯減少。在門水平上,MHFD組擬桿菌門比例下降,厚壁菌門比例升高;在屬水平上,MHFD組Butyricicoccus,Prevotellaceae和Lachnospiracea_incertae_sedis的相對(duì)豐度減低,Akkermansia,Escherichia/Shigella相對(duì)豐度增加。3、通過FITC-D灌胃法評(píng)價(jià)兩組3周齡小鼠的腸道通透性,與MND組子代小鼠相比,MHFD組小鼠血清FITC-D濃度顯著升高(0.32±0.06 vs 0.16±0.13ug/ml,P0.05)。免疫熒光染色結(jié)果顯示,MHFD組小鼠腸道組織ZO-1膜定位表達(dá)低于MND組。PCR結(jié)果顯示MHFD組小鼠結(jié)腸組織中ZO-1、CLDN1及CLDN3 m RNA水平與MND組相比明顯下降。4、HE染色兩組3周齡小鼠腸道均未見明顯鏡下炎癥,然而PCR結(jié)果顯示MHFD組子代小鼠結(jié)腸組織中IL-1β、IL-6及TNF-αm RNA相對(duì)表達(dá)水平較MND組顯著升高。5、8周齡子代小鼠給予2%DSS 5天后,與MND組小鼠相比,MHFD組小鼠DAI評(píng)分在給藥后第3、4和5天升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MHFD組小鼠結(jié)腸長度更短,HE染色及組織學(xué)損傷評(píng)分顯示MHFD組小鼠結(jié)腸炎程度與MND組相比更重。PCR結(jié)果顯示MHFD組小鼠炎癥因子KC、IL-6及TNF-αm RNA相對(duì)表達(dá)水平較MND組顯著升高。結(jié)論:生命早期母體高脂飲食可抑制3周齡子代小鼠腸道發(fā)育,誘導(dǎo)子代小鼠腸道菌群失衡,破壞腸粘膜屏障,誘導(dǎo)子代小鼠腸道低度炎癥,加劇子代小鼠8周齡時(shí)對(duì)DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎的易感性。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R725.7;R715.3
【圖文】：

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文二、結(jié)果2.1 MHFD 抑制 3 周齡子代小鼠腸道發(fā)育2.1.1 MHFD 對(duì)小鼠生長狀況的影響兩組小鼠自出生后每周監(jiān)測體重，MHFD 組子代小鼠在出生后第 2（6.55±0.65g vs 5.95±0.73g，P＜0.05）、3（9.21±0.74g vs 8.26±1.19g，P＜0.01）、4（14.83±1.36g vs 13.72±1.08g，P＜0.05）周體重顯著高于 MND 組，其他時(shí)間段兩組小鼠體質(zhì)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見圖 1A）。

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 1B, C）。2.1.3 MHFD 對(duì) 3 周齡子代小鼠腸道增殖及分化的影響與 3 周齡 MND 組子代小鼠相比，MHFD 組小鼠每個(gè)小腸絨毛中 Ki67 陽性細(xì)胞數(shù)（18.00±4.74 個(gè) vs 24.60±4.17 個(gè)，P < 0.01）明顯減少（見圖 2A）；每個(gè)結(jié)腸隱窩中杯狀細(xì)胞的數(shù)目（14.70±2.91 個(gè) vs 28.10±4.95 個(gè)，P<0.001）和 MUC陽性細(xì)胞數(shù)（20.60±3.13 個(gè) vs 30.00±3.33 個(gè)，P＜0.001）均明顯減少（見圖 2B,C）

圖 5. MHFD 對(duì) 3 周齡子代小鼠腸道菌群屬水平的影響（MND 母體正常飲食組，MHFD 母體高脂飲食組)2.3 MHFD 破壞 3 周齡子代小鼠腸粘膜屏障2.3.1 MHFD 對(duì) 3 周齡子代小鼠腸上皮通透性的影響與 MND 組 3 周齡子代小鼠相比，MHFD 組小鼠血清 FITC-D 濃度顯著升高（0.32±0.06 vs 0.16±0.13 ug/ml，P < 0.05），見圖 6。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李學(xué)奇;曹曉培;;高脂飲食到底多傷身[J];農(nóng)產(chǎn)品市場周刊;2017年21期

2 ;孕期高脂飲食可能增加后代患乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)[J];中國食品;2017年15期

3 李端;劉帥;;健康新知[J];中老年保健;2017年02期

4 譚健;;高膽固醇是否一定有癌癥高危險(xiǎn)性[J];國外醫(yī)學(xué)情報(bào);1987年13期

5 張柏麗,陸一竹,范英昌,樊繼援;高脂飲食對(duì)氧化修飾低密度脂蛋白和巨噬細(xì)胞集落刺激因子影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年02期

6 ;高脂飲食兔早期的血管內(nèi)皮功能的研究[J];嶺南心血管病雜志;2000年04期

7 蔡危威,曲伸,鄒大進(jìn),賈鶯歌,李慧,徐茂錦,高從容;高脂飲食肥胖大鼠制備的探討[J];現(xiàn)代康復(fù);2000年12期

8 文惠芳;;肝膽疾病與高脂飲食[J];醫(yī)學(xué)文選;1990年03期

9 房志琴;王亞玲;彭偉;;母鼠高脂飲食易化雄性子鼠對(duì)血管緊張素Ⅱ的升壓作用[J];神經(jīng)藥理學(xué)報(bào);2016年03期

10 劉善云;何玉秀;張洪俠;;耐力性運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂飲食小鼠主動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)的影響[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2011年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 董莉君;王輝;;不同時(shí)期高脂飲食對(duì)小鼠結(jié)腸和脂肪組織的影響[A];第十屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)匯編[C];2015年

2 陳立;林海;曲極冰;李紅;楊世杰;;高脂飲食對(duì)胚胎期過量接觸乙醇大鼠糖代謝的影響[A];中國藥理學(xué)會(huì)第八次全國代表大會(huì)暨全國藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

3 史仍飛;袁海平;張平;;不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂飲食大鼠脂質(zhì)代謝的影響及機(jī)理的探討[A];2002年第9屆全國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

4 王婷婷;于恒彩;高濱;馮麗;王芙蓉;高聆;趙家軍;;長期大量乙醇攝入及高脂飲食對(duì)大鼠血清生化指標(biāo)影響的比較[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

5 秦銳;羅楠;;膳食鈣對(duì)高脂飲食大鼠肥胖形成的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

6 黃力平;王慧;李慶雯;曹龍軍;張薇;;運(yùn)動(dòng)和高脂飲食對(duì)大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體-α表達(dá)的影響[A];第八屆全國體育科學(xué)大會(huì)論文摘要匯編（二）[C];2007年

7 陳立;林海;曲極冰;李紅;楊世杰;;高脂飲食對(duì)胚胎期過量接觸乙醇大鼠糖代謝的影響[A];中國藥理學(xué)會(huì)第八次全國代表大會(huì)論文摘要集（第二部分）[C];2002年

8 馮文煥;袁雪雯;朱大龍;童國玉;邵琳琳;戴雅s

本文編號(hào)：2744457