發(fā)布時間：2017-03-29 08:18

  本文關鍵詞：不同藥物對大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型Leptin、Stat3和Caspase3的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis, EMS)也稱內(nèi)異癥,是一種雌激素依賴性婦科常見病,其生物學特征隨著女性體內(nèi)激素周期性改變而變化。臨床癥狀主要包括：盆腔痛,盆腔包塊、不孕等表現(xiàn)。EMS具有轉移、侵襲、粘附、血管形成、凋亡減少等類似惡性腫瘤細胞的特征,也被稱為“良性癌”。我們前期的研究發(fā)現(xiàn),瘦素(leptin)、瘦素受體(leptin receptor, OB-R)和stat3在EMS異位內(nèi)膜上均有表達,提示leptin有可能通過與OB-R結合,激活JAK2/stat3途徑,促進EMS病灶的增殖,同時伴隨著局部能量代謝的異常。此外caspase3作為調(diào)控細胞凋亡的關鍵分子,在EMS異位內(nèi)膜細胞的凋亡中扮演著舉足輕重的角色。辛伐他汀(simvastatin)屬于他汀類藥物,主要通過抑制膽固醇的合成,降低低密度脂蛋白,增加高密度脂蛋白,從而達到降膽固醇的作用。還可通過多條信號通路作用于全身多個臟器,發(fā)揮其調(diào)節(jié)機體代謝、抗腫瘤、抗炎、抗凋亡、預防缺血再灌注損傷等多方面效應。二甲雙胍(metformin)既往主要用于治療2型糖尿病。然而近年來越來越多的文獻證明：二甲雙胍可通過不同的機制發(fā)揮重要的抗腫瘤作用。既然EMS具有能量代謝異常、凋亡降低等特點,那么辛伐他汀和二甲雙胍這兩種既可改善機體能量代謝,又可通過多種途徑促進細胞凋亡的藥物,是否可以用來治療EMS呢!本實驗從EMS病灶的能量代謝和細胞凋亡異常著手,嘗試從新的角度,研究EMS的發(fā)病機制，為EMS的藥物治療提供新的靶點。目的1、建立Lewis大鼠同種異體腹腔移植EMS模型。2、觀察葛根素、辛伐他汀、二甲雙胍和米非司酮對大鼠EMS病灶的影響。3、探討四種藥物是否對EMS病灶中Leptin及其下游分子stat3產(chǎn)生作用。4、通過觀察四種藥物對EMS病灶caspase3的影響,探討其對EMS病灶細胞凋亡的影響。方法1、選擇健康雌性Lewis大鼠,共70只,其中供體組9只,實驗組61只,建立大鼠同種異體EMS模型,每日給予苯甲酸雌二醇0.05mg/100g,月幾注，，共4周。2、觀察大鼠EMS病灶的體積,篩選建模成功的大鼠,計算建模成功率。3、隨機選擇50只EMS大鼠,分為五組：1)對照組;2)葛根素組(50mg/kg);3)辛伐他汀組(5mg/kg);4)甲雙胍組(126mg/kg);5)米非司酮組(6.33mg/kg),每組各10只。每組分別給相應的藥。繼續(xù)每日苯甲酸雌二醇0.05mg/100g,肌注,飼養(yǎng)4周。4、處死大鼠,再次觀察病灶體積,取出病灶,待下一步實驗。5、免疫組化(IHC)、實時熒光定量聚合酶鏈式反應(RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western-blot)檢測leptin、Stat3、Caspase-3;結果1、53只大鼠建模成功,成功率86.9%,每個病灶平均體積為27.01±3.72mm3。2、二甲雙胍組和米非司酮組的病灶體積小于對照組,葛根素組病灶體積大于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義;辛伐他汀組病灶體積與對照組相比無明顯差異。3、冰凍切片IHC示：①葛根素組leptin的表達與對照組無明顯差異;其他三組Leptin的表達均低于對照組;②辛伐他汀組Stat3的表達低于對照組;葛根素組Stat3的表達與對照組無明顯差異;二甲雙胍組和米非司酮組的Stat3的表達均高于于對照組。③葛根素組caspase3的表達與對照組相比無明顯差異;辛伐他汀組caspase3的表達均低于對照組;二甲雙胍組和米非司酮組caspase3的表達均高于于對照組。4、RT-PCR顯示：①四組實驗組Leptin mRNA的表達均低于對照組;②葛根素組和辛伐他汀組Stat3 mRNA的表達低于對照組;二甲雙胍組和米非司酮組Stat3 mRNA的表達高于對照組；③葛根素組caspase3 mRNA表達與對照組無明顯差異;其他三組實驗組Leptin mRNA的表達均低于對照組。5、Western-blot示：①辛伐他汀組Leptin含量低于對照組;二甲雙胍組和米非司酮組Leptin含量的表達高于對照組;葛根素組Leptin含量與對照組無差異;②四實驗組stat3蛋白含量均低于對照組：③葛根素組caspase3含量低于對照組;其他三組caspase3蛋白含量的表達高于對照組。結 論1、Lewis大鼠同種異體腹腔移植EMS模型,成活率高,易觀察,大鼠生存能力強,可接受多次手術,具有完整的免疫系統(tǒng),在很大程度上與人EMS的組織和生化特征相一致。2、葛根素可降低EMS異位內(nèi)膜中Leptin、Stat3、caspase3 mRNA表達和caspase3蛋白的含量，Leptin、Stat3蛋白的含量增加,可能是刺激了leptin、 stat3途徑,同時抑制了EMS異位內(nèi)膜細胞的凋亡,不適用于EMS的治療。3、辛伐他汀未抑制病灶生長,但病灶中l(wèi)eptin、stat3、caspase3 mRNA和蛋白含量均下降。因此,需進一步實驗探討辛伐他汀是否可用于治療EMS。4、二甲雙胍不能通過leptin、OB-R、tat3信號通路,而可能是通過caspase3誘導細胞凋亡來抑制EMS病灶的生長。二甲雙胍有望成為新的EMS治療藥物。5、米非司酮可通過caspase3誘導細胞凋亡來抑制EMS病灶的生長。6、Leptin可用于EMS的診斷,但不能用于判定療效,無法成為EMS的參考檢測指標。7、通過對EMS能量代謝和凋亡的研究,有助于明確EMS細胞的增殖和死亡,明確新的治療理念,探索新的治療藥物。
【關鍵詞】：子宮內(nèi)膜異位癥 瘦素 stat3 caspase3 辛伐他汀 二甲雙胍 葛根素 米非司酮
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R-332;R711.71
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-15
• 第一部分 Lewis大鼠子宮內(nèi)膜異位癥同種異體移植模型的建立15-21
• 實驗材料15
• 實驗方法15-16
• 實驗結果16-18
• 討論18-19
• 參考文獻19-21
• 第二部分 不同藥物對大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型leptin、Stat3和Caspase3的影響21-57
• 材料和方法21-40
• 討論40-47
• 參考文獻47-57
• 全文總結57-58
• 文獻綜述58-66
• 參考文獻62-66
• 個人簡歷、碩士期間發(fā)表文章情況66-67
• 致謝67

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;什么是瘦素(Leptin)?[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2002年04期

2 李曉娟,陸大祥;瘦素(leptin)與肥胖[J];中國病理生理雜志;2003年07期

3 王舒然;Leptin抵抗與肥胖[J];國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊);2003年02期

4 張震;瘦素(leptin)誘導新生大鼠心室肌細胞的肥厚[J];中國分子心臟病學雜志;2003年05期

5 ;什么是瘦素(Leptin)?[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2003年S1期

6 王穎;Expression of leptin and leptin receptor in gastric carcinoma[J];China Medical Abstracts;2005年03期

7 邵冰峰;Expression of leptin and leptin receptor in gastric carcinoma[J];China Medical Abstracts;2005年03期

8 肖煒;馬云;魏連波;;Leptin與慢性腎衰竭營養(yǎng)不良研究進展[J];中國中西醫(yī)結合腎病雜志;2006年02期

9 朱曉平;路新國;李麗艷;;運動、飲食對leptin的影響[J];中國體育科技;2006年02期

10 侯英;孫世新;李賢厚;楊玉芝;;甲狀腺功能障礙對leptin水平的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2006年13期

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 暨南大學醫(yī)藥生物技術研究開發(fā)中心 姚成燦 李校坤;“減肥” 突破口在哪？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

2 暨南大學醫(yī)藥生物技術研究開發(fā)中心 姚成燦 李校坤;根本減肥始自瘦素[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

3 殷臘生;多肽與減肥[N];中國食品質(zhì)量報;2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊春;leptin調(diào)節(jié)下丘腦神經(jīng)肽Y分泌的研究[D];河北醫(yī)科大學;2005年

2 肖其海;Leptin調(diào)控鵝卵泡顆粒細胞的增殖凋亡、脂質(zhì)代謝及類固酵激素合成研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2014年

3 阮氏青海;奶牛酮體水平與抗氧化、leptin等的關系及l(fā)eptin等對體外牛肝細胞抗氧化酶表達的影響[D];廣西大學;2015年

4 蘇蘭利;leptin對雞胚尿囊膜血管生成的影響及其機理[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2012年

5 鄭櫻;肺結核合并2型糖尿病患者攝食因子leptin/ghrelin水平以及能量代謝特征研究[D];青島大學;2014年

6 劉國慶;Leptin對雌性大鼠下丘腦—垂體—性腺軸作用的分子機理研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學;2002年

7 孫淑娟;瘦素調(diào)控血管新生機理的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

8 袁麗霞;雞下丘腦食欲和能量穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)相關基因表達的品種差異以及l(fā)eptin的程序化作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2009年

9 司藝玲;Leptin在腦缺血性損傷中的神經(jīng)保護作用和機制探討[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2009年

10 胡艷;母源性leptin對肉雞子代早期生長和肝臟脂肪代謝的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2008年

  本文關鍵詞：不同藥物對大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型Leptin、Stat3和Caspase3的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：274037