【摘要】：目的:探究母體高同型半胱氨酸血癥狀態(tài)對早期胚胎發(fā)育的影響及表觀遺傳學(xué)改變方法:使用含3%蛋氨酸的動物繁殖飼料喂食6周大小C57/BL6雌鼠6周,建立高同型半胱氨酸血癥小鼠模型,小鼠血值17 umol/L為建模成功的高同型半胱氨酸血癥小鼠。以PMSG+HCG序貫促排法對建模成功的小鼠進(jìn)行超促排卵后體外受精并且進(jìn)行體外胚胎培養(yǎng),觀察并記錄胚胎不同時期的發(fā)育率,收集囊胚,摘取模型鼠卵巢組織。另外,對建模小鼠進(jìn)行合籠實驗,一部分用于產(chǎn)仔計數(shù)活產(chǎn)數(shù);一部分在14.5dpc時取雌性胎鼠卵巢用于檢測胚胎發(fā)育及表觀重編程過程和同型半胱氨酸代謝關(guān)鍵基因表達(dá)水平。結(jié)果:高同型半胱氨酸血癥組囊胚形成率(50.6%)顯著低于正常組(75.5%),兩組之間有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。高同型半胱氨酸血癥組囊胚甲基化水平較正常組低,與甲基化重編程密切相關(guān)的兩個蛋白DNMT1、DPPA3表達(dá)水平低于正常組。模型組(F0)卵巢中與同型半胱氨酸代謝相關(guān)的關(guān)鍵基因表達(dá)水平上調(diào),而模型組14.5dpc(F1)卵巢中該通路相關(guān)基因表達(dá)水平無明顯改變。模型組(F0)和14.5dpc(F1)卵巢中與表觀重編程密切相關(guān)的兩個關(guān)鍵蛋白DNMT1、DPPA3表達(dá)下調(diào),14.5dpc(F1)卵巢中參與胚胎發(fā)育的關(guān)鍵基因OCT4、SOX2表達(dá)下調(diào)。高同型半胱氨酸血癥組活產(chǎn)數(shù)(4.2±1.9)較正常組活產(chǎn)數(shù)(7.6±1.7)低,兩組有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。
【圖文】：

SDSL、GLYCTK、CTH、DAO、DLD、AGXT 、ALAS1、ALAS2、 GCGAMT、PHGDH、GATM、GCSH、GNMT、GLDC、AMT 、PSAT1、AOC2、MAOB、PGAM4、PIPOX、PGAM1、PGAM2、PSPH、SRR、AGXT2、BPGM、ACBS、GRHPR10.2 通過 STRING 數(shù)據(jù)庫(version-10-5.string-db.org)，將以上三路分別構(gòu)建 PPI 蛋白互做網(wǎng)絡(luò)。（圖 1-3）10.3 通過網(wǎng)絡(luò)中蛋白互做的關(guān)聯(lián)程度及大量文獻(xiàn)查詢，篩選出 6 個發(fā)育及其表觀重編程的關(guān)鍵基因，，7 個同型半胱氨酸代謝通路的基因，設(shè)計引物，進(jìn)行后續(xù)實驗樣本實時定量 PCR 實驗。13 個核因及其 PPI 網(wǎng)絡(luò)模式如下。（圖 4）DNMT1、DNMT3A、DPPA3、NANOG、SOX2、OCT4/POU5F1、CBS、GBHMT、MTR、AHCYL2、MAT2A、MAT2B

葉酸與一碳單位代謝通路圖
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R714.2

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本文編號：2692929