本文關(guān)鍵詞：不同濃度褪黑素對(duì)ICSI周期中未成熟卵子體外培養(yǎng)成熟及后續(xù)胚胎發(fā)育的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的1.將不同濃度的褪黑素加入IVM培養(yǎng)液中,培養(yǎng)ICSI周期中人未成熟卵母細(xì)胞,探索不同濃度褪黑素對(duì)人類(lèi)未成熟卵母細(xì)胞體外成熟以及后續(xù)胚胎發(fā)育的影響。2.根據(jù)對(duì)加有褪黑素的IVM液中培養(yǎng)成熟的卵母細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位與不加褪黑素培養(yǎng)成熟的卵母細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位的分析,初步探索褪黑素在人未成熟卵體外培養(yǎng)成熟中的作用機(jī)制。方法1.將來(lái)自于ICSI周期中的602枚未成熟卵子隨機(jī)加入含有不同濃度褪黑素的IVM液中進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)24h后對(duì)成熟的卵母細(xì)胞行ICSI受精,ICSI后16-18h觀(guān)察受精情況,挑選出正常受精卵進(jìn)行囊胚培養(yǎng)。根據(jù)在IVM液中所加褪黑素濃度的不同,實(shí)驗(yàn)分為6組(0,10~(-11)M,10~(-9)M,10~(-7)M,10~(-5)M,10~(-3)M),未加褪黑素組為對(duì)照組,其余5組為實(shí)驗(yàn)組。比較每組中卵子的成熟率,受精率,卵裂率,囊胚形成率以及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率情況。并且通過(guò)a CGH技術(shù)對(duì)優(yōu)質(zhì)囊胚的染色體進(jìn)行檢測(cè),判斷非整倍體發(fā)生概率。2.將來(lái)自對(duì)照組中經(jīng)過(guò)IVM培養(yǎng)成熟的13枚卵子和MT=10~(-5)M組中IVM成熟的15枚卵子進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。用JC-1線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)試劑盒將成熟的卵母細(xì)胞的線(xiàn)粒體膜電位進(jìn)行染色,在倒置熒光顯微鏡下,分別在紅色熒光和綠色熒光模塊下進(jìn)行觀(guān)察,及時(shí)拍照。然后用Image J軟件測(cè)量同一卵母細(xì)胞的紅色熒光和綠色熒光強(qiáng)度值,得到二者熒光強(qiáng)度比值,通過(guò)紅綠熒光強(qiáng)度比值來(lái)反應(yīng)線(xiàn)粒體膜電位強(qiáng)度。結(jié)果1.與對(duì)照組相比,10~(-9)M,10~(-7)M,10~(-5)M組優(yōu)質(zhì)囊胚率均顯著增高(75±4.4%,63.5±5.4%,60±4.7%VS 11.1±5.4%,p0.05),且10~(-9)M組優(yōu)質(zhì)囊胚形成率最高。與對(duì)照組相比,10~(-3)M組卵裂率及囊胚形成率均顯著降低(73.8±1.2%VS.90.2±0.6%;2±0.2%VS.16.4±0.6%;p0.05)。本研究共獲得30枚優(yōu)質(zhì)囊胚,隨機(jī)選取11枚優(yōu)質(zhì)囊胚行a CGH檢測(cè)(1枚來(lái)自對(duì)照組,10枚來(lái)自實(shí)驗(yàn)組),對(duì)照組中1枚優(yōu)質(zhì)囊胚為非整倍體,核型為49,XX(+1,+15,+17);另外實(shí)驗(yàn)組中2枚胚胎染色體異常,分別為46,XX(+11,-15)(10~(-11)M組);和46,XX(-7(q36.2~q36.3))(10~(-7)M組),其余8枚(4枚來(lái)自10~(-9)組,1枚來(lái)自10~(-7)組,2枚來(lái)自10~(-5)組,另1枚來(lái)自10~(-11)組)均為正常胚胎。2.與對(duì)照組相比,10~(-5)M組成熟卵母細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位熒光強(qiáng)度比值明顯增高(0.58±0.3 VS.0.35±0.17,P0.05)。結(jié)論1.在IVM培養(yǎng)液中加入合適濃度的褪黑素能改善ICSI周期中人未成熟卵母細(xì)胞的IVM結(jié)果,獲得更多的染色體正常的優(yōu)質(zhì)囊胚,其中最佳褪黑素濃度為10~(-9)mol/l。2.合適濃度褪黑素在一定程度上可以改善卵母細(xì)胞的質(zhì)量。
【關(guān)鍵詞】：褪黑素 卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射 未成熟卵子 體外成熟 微陣列比較基因組雜交 線(xiàn)粒體膜電位
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-15
• 2 材料與方法15-26
• 2.1 材料15-18
• 2.2 方法18-26
• 3 結(jié)果26-30
• 3.1 每組中人未成熟卵子體外成熟率，受精率，，卵裂率，囊胚形成率，優(yōu)質(zhì)囊胚形成率結(jié)果的比較26-27
• 3.2 a CGH檢測(cè)結(jié)果27-29
• 3.3 成熟卵母細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)結(jié)果29-30
• 4 討論30-31
• 5 結(jié)論31
• 6 參考文獻(xiàn)31-37
• 附錄37-38
• 致謝38-39
• 綜述39-47
• 參考文獻(xiàn)45-47

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王彩英;褪黑素的研究歷程及應(yīng)用前景[J];廣州醫(yī)藥;2002年02期

2 劉河;褪黑素與健康關(guān)系的研究進(jìn)展[J];口岸衛(wèi)生控制;2004年03期

3 吳亮,邱勇,李雷;人脊椎骨中褪黑素受體mRNA的表達(dá)及其意義[J];中國(guó)脊柱脊髓雜志;2005年04期

4 嘉勉;;褪黑素對(duì)癌癥的治療作用值得注意[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);2006年04期

5 徐峰,李經(jīng)才;褪黑素對(duì)睡眠的調(diào)節(jié)作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).精神病學(xué)分冊(cè);1997年02期

6 楊嵐;來(lái)自生命深處的渴望──美國(guó)南求褪黑素還你自然的睡眠[J];廣西質(zhì)量監(jiān)督導(dǎo)報(bào);1997年06期

7 汪曉飛,劉志民,彭樹(shù)勛;褪黑素:一個(gè)多功能的光周期信號(hào)[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1998年03期

8 張銀萍,劉保良;保健品──褪黑素作用簡(jiǎn)述[J];中國(guó)藥業(yè);1998年04期

9 童鐘杭;;褪黑素與性活力[J];健康博覽;2007年05期

10 吳彬;;解決失眠,在于正確選擇褪黑素[J];長(zhǎng)壽;2010年10期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 石瓊;孫儒泳;張崇理;許榮昆;;人體中褪黑素的生理作用[A];中國(guó)動(dòng)物科學(xué)研究——中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)第十四屆會(huì)員代表大會(huì)及中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)65周年年會(huì)論文集[C];1999年

2 賈嬌;楊紅;;褪黑素及褪黑素能類(lèi)藥物臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)精神醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

3 葉曉華;懷佳萍;孫學(xué)成;徐曉;吳建勝;;褪黑素通過(guò)調(diào)節(jié)白介素22改善重癥急性胰腺炎相關(guān)性肺損傷[A];2013第六屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

4 袁崇剛;施英唐;何令;;持續(xù)光照和褪黑素對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞周期的影響[A];動(dòng)物學(xué)專(zhuān)輯——上海市動(dòng)物學(xué)會(huì)2000年年會(huì)論文集[C];2000年

5 劉志民;劉志民;趙瑛;陸祖謙;沈玉美;談雯;彭樹(shù)勛;;褪黑素受體在體內(nèi)分布及信息傳導(dǎo)通路的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

6 徐峰;王芳;李經(jīng)才;;褪黑素睡眠調(diào)節(jié)作用的神經(jīng)機(jī)制[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)肥胖的臨床與基礎(chǔ)暨神經(jīng)免疫內(nèi)分泌學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2003年

7 何穎;李經(jīng)才;;褪黑素對(duì)學(xué)習(xí)、記憶的作用研究進(jìn)展[A];2004全國(guó)時(shí)間生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

8 邱旭升;邱勇;陳暉;孫旭;鄧亮生;鄭振耀;;青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸患者褪黑素信號(hào)傳導(dǎo)通路的初步研究[A];第八屆全國(guó)脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 吳建勝;懷佳萍;邵穎穎;孫學(xué)成;金尹;黃智銘;;褪黑素通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)改善急性壞死性胰腺炎[A];2012年浙江省內(nèi)科學(xué)年會(huì)論文集[C];2012年

10 王衛(wèi)民;肖國(guó)民;裘五四;吳建躍;程軍;姜啟周;徐海松;張眉;方蓉;;顱腦損傷昏迷患者血清褪黑素變化的臨床研究初步報(bào)告[A];2009年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 方舟子 留美學(xué)者，生物化學(xué)博士;褪黑素究竟有多神奇？[N];經(jīng)濟(jì)觀(guān)察報(bào);2007年

2 蘋(píng)果;未成年人不宜服褪黑素治失眠[N];中國(guó)婦女報(bào);2012年

3 李玉霞;“褪黑素”保健品不要隨便吃[N];中國(guó)人口報(bào);2004年

4 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所教授　張均田;含褪黑素保健品的功效[N];光明日?qǐng)?bào);2002年

5 ;褪黑素安全否看看專(zhuān)家怎么說(shuō)[N];健康報(bào);2002年

6 美國(guó)北達(dá)科他大學(xué)醫(yī)學(xué)院 任駿 張曉;褪黑素：現(xiàn)狀與前景[N];健康報(bào);2002年

7 任駿 張曉;不必濫用褪黑素[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

8 本報(bào)記者 黃萱;“褪黑素”到底是什么[N];人民政協(xié)報(bào);2002年

9 本文由香港麥迪信醫(yī)學(xué)出版有限公司供稿;褪黑素長(zhǎng)期服用安全嗎？用于兒童可靠嗎？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

10 主任醫(yī)師 呂斌;褪黑素使用過(guò)量會(huì)影響生育[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蔣婷婷;褪黑素對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 郭攀;褪黑素保護(hù)鎘暴露所致肝毒性效應(yīng)的機(jī)制探討[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 李吉國(guó);褪黑素對(duì)牙髓炎TLR4、NF-κB調(diào)節(jié)機(jī)制的相關(guān)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 徐永鵬;褪黑素對(duì)1-溴丙烷引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2016年

5 黃海;褪黑素對(duì)外視網(wǎng)膜神經(jīng)元信號(hào)傳遞的調(diào)制[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2005年

6 韓靜;褪黑素抗嗎啡獎(jiǎng)賞效應(yīng)的作用及其中樞機(jī)制的分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

7 李曉峰;褪黑素對(duì)大鼠腦出血后繼發(fā)性腦損傷的作用及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2011年

8 平勇;褪黑素對(duì)鯽魚(yú)和大鼠外層視網(wǎng)膜視桿信號(hào)通路的調(diào)制[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

9 王芳;影響褪黑素催眠作用的諸因素分析[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2002年

10 楊凌輝;褪黑素及光照周期的改變對(duì)大鼠脂肪組織代謝的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王江波;褪黑素、鈣調(diào)蛋白在特發(fā)性脊柱側(cè)凸模型中的相互作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 馬賽君;線(xiàn)粒體凋亡途徑參與褪黑素誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 趙景新;血液透析患者褪黑素水平與氧化應(yīng)激、炎癥狀態(tài)及睡眠質(zhì)量相關(guān)性分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 劉帥;褪黑素對(duì)缺氧缺血所致的新生大鼠未成熟腦白質(zhì)損傷的干預(yù)作用[D];鄭州大學(xué);2015年

5 胡奇珍;褪黑素抑制酒精性脂肪肝的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

6 毛琳;不同尺寸納米三氧化鎢致小鼠肝腎毒性研究以及褪黑素的保護(hù)作用[D];華中師范大學(xué);2015年

7 張笑哲;褪黑素對(duì)氧化應(yīng)激條件下ARPE-19細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系的作用研究及機(jī)制探討[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

8 肖志勇;新型褪黑素受體激動(dòng)劑Neu-240改善帕金森模型大小鼠運(yùn)動(dòng)功能損傷[D];南華大學(xué);2015年

9 胡春利;褪黑素通過(guò)Reelin信號(hào)通路對(duì)Aβ_(1-42)介導(dǎo)的神經(jīng)退行性變的保護(hù)作用[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2015年

10 李偉;外源褪黑素對(duì)超低溫冷凍小鼠成熟卵母細(xì)胞發(fā)育潛力的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：不同濃度褪黑素對(duì)ICSI周期中未成熟卵子體外培養(yǎng)成熟及后續(xù)胚胎發(fā)育的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：258850