本文關鍵詞：不同濃度褪黑素對ICSI周期中未成熟卵子體外培養(yǎng)成熟及后續(xù)胚胎發(fā)育的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的1.將不同濃度的褪黑素加入IVM培養(yǎng)液中,培養(yǎng)ICSI周期中人未成熟卵母細胞,探索不同濃度褪黑素對人類未成熟卵母細胞體外成熟以及后續(xù)胚胎發(fā)育的影響。2.根據(jù)對加有褪黑素的IVM液中培養(yǎng)成熟的卵母細胞線粒體膜電位與不加褪黑素培養(yǎng)成熟的卵母細胞線粒體膜電位的分析,初步探索褪黑素在人未成熟卵體外培養(yǎng)成熟中的作用機制。方法1.將來自于ICSI周期中的602枚未成熟卵子隨機加入含有不同濃度褪黑素的IVM液中進行培養(yǎng),培養(yǎng)24h后對成熟的卵母細胞行ICSI受精,ICSI后16-18h觀察受精情況,挑選出正常受精卵進行囊胚培養(yǎng)。根據(jù)在IVM液中所加褪黑素濃度的不同,實驗分為6組(0,10~(-11)M,10~(-9)M,10~(-7)M,10~(-5)M,10~(-3)M),未加褪黑素組為對照組,其余5組為實驗組。比較每組中卵子的成熟率,受精率,卵裂率,囊胚形成率以及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率情況。并且通過a CGH技術對優(yōu)質(zhì)囊胚的染色體進行檢測,判斷非整倍體發(fā)生概率。2.將來自對照組中經(jīng)過IVM培養(yǎng)成熟的13枚卵子和MT=10~(-5)M組中IVM成熟的15枚卵子進行線粒體膜電位的檢測。用JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒將成熟的卵母細胞的線粒體膜電位進行染色,在倒置熒光顯微鏡下,分別在紅色熒光和綠色熒光模塊下進行觀察,及時拍照。然后用Image J軟件測量同一卵母細胞的紅色熒光和綠色熒光強度值,得到二者熒光強度比值,通過紅綠熒光強度比值來反應線粒體膜電位強度。結(jié)果1.與對照組相比,10~(-9)M,10~(-7)M,10~(-5)M組優(yōu)質(zhì)囊胚率均顯著增高(75±4.4%,63.5±5.4%,60±4.7%VS 11.1±5.4%,p0.05),且10~(-9)M組優(yōu)質(zhì)囊胚形成率最高。與對照組相比,10~(-3)M組卵裂率及囊胚形成率均顯著降低(73.8±1.2%VS.90.2±0.6%;2±0.2%VS.16.4±0.6%;p0.05)。本研究共獲得30枚優(yōu)質(zhì)囊胚,隨機選取11枚優(yōu)質(zhì)囊胚行a CGH檢測(1枚來自對照組,10枚來自實驗組),對照組中1枚優(yōu)質(zhì)囊胚為非整倍體,核型為49,XX(+1,+15,+17);另外實驗組中2枚胚胎染色體異常,分別為46,XX(+11,-15)(10~(-11)M組);和46,XX(-7(q36.2~q36.3))(10~(-7)M組),其余8枚(4枚來自10~(-9)組,1枚來自10~(-7)組,2枚來自10~(-5)組,另1枚來自10~(-11)組)均為正常胚胎。2.與對照組相比,10~(-5)M組成熟卵母細胞線粒體膜電位熒光強度比值明顯增高(0.58±0.3 VS.0.35±0.17,P0.05)。結(jié)論1.在IVM培養(yǎng)液中加入合適濃度的褪黑素能改善ICSI周期中人未成熟卵母細胞的IVM結(jié)果,獲得更多的染色體正常的優(yōu)質(zhì)囊胚,其中最佳褪黑素濃度為10~(-9)mol/l。2.合適濃度褪黑素在一定程度上可以改善卵母細胞的質(zhì)量。
【關鍵詞】：褪黑素 卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射 未成熟卵子 體外成熟 微陣列比較基因組雜交 線粒體膜電位
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R714.8
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-15
• 2 材料與方法15-26
• 2.1 材料15-18
• 2.2 方法18-26
• 3 結(jié)果26-30
• 3.1 每組中人未成熟卵子體外成熟率，受精率，，卵裂率，囊胚形成率，優(yōu)質(zhì)囊胚形成率結(jié)果的比較26-27
• 3.2 a CGH檢測結(jié)果27-29
• 3.3 成熟卵母細胞線粒體膜電位檢測結(jié)果29-30
• 4 討論30-31
• 5 結(jié)論31
• 6 參考文獻31-37
• 附錄37-38
• 致謝38-39
• 綜述39-47
• 參考文獻45-47

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本文編號：258850