【摘要】：目的建立子宮內(nèi)膜異位癥(EMs)異位、在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的體外細(xì)胞模型,實時觀察間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化。方法膠原酶消化異位、在位內(nèi)膜組織,二次篩網(wǎng)過濾結(jié)合低速離心法分離純化間質(zhì)細(xì)胞,應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色進(jìn)行細(xì)胞鑒定,并進(jìn)行傳代培養(yǎng),觀察細(xì)胞生長狀況及細(xì)胞形態(tài)差異。結(jié)果培養(yǎng)成功率91.3%,間質(zhì)細(xì)胞純度達(dá)95%;異位間質(zhì)細(xì)胞9代內(nèi)、在位及對照組間質(zhì)細(xì)胞11代內(nèi),細(xì)胞形態(tài)及活性并無明顯改變。結(jié)論子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞可為子宮內(nèi)膜異位癥研究提供較好的細(xì)胞模型。
【圖文】：

組內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞外觀特征相似，懸浮液中呈單個細(xì)胞，形態(tài)呈圓形或橢圓形；貼壁后呈梭形生長，少部分呈星形生長，細(xì)胞質(zhì)薄且透明，細(xì)胞核圓形居中，細(xì)胞平鋪生長，無明顯極性。細(xì)胞培養(yǎng)過程中見異位間質(zhì)細(xì)胞比在位、正常細(xì)胞稍大，形態(tài)仍是梭形或星形。２．３間質(zhì)細(xì)胞生長情況分離的內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞３０ｍｉｎ后部分細(xì)胞開始貼壁，２４ｈ后大部分間質(zhì)細(xì)胞已貼壁。在位、對照組間質(zhì)細(xì)胞生長速度較快，２～３ｄ傳代１次；異位間質(zhì)細(xì)胞生長速度相對較慢，４～５ｄ傳代１次（細(xì)胞傳代后生長形態(tài)見圖１）。在位、對照組間質(zhì)細(xì)胞１１代內(nèi)，異位間質(zhì)細(xì)胞９代內(nèi)，細(xì)胞形態(tài)及活性并無明顯改變，若繼續(xù)傳代，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)增大，胞質(zhì)中含有顆粒，細(xì)胞出現(xiàn)崩解現(xiàn)象，在相同的消化條件下，裂解的細(xì)胞數(shù)目較多。２．４間質(zhì)細(xì)胞鑒定間質(zhì)細(xì)胞表面特異性標(biāo)志分子為波形蛋白，腺上皮細(xì)胞的特異性標(biāo)志分子為細(xì)胞角蛋白。細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果示：內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞波形蛋白陽性著色（棕黃色），角蛋白及空白對照未著色，間質(zhì)細(xì)胞純度達(dá)９５％（圖２）。Ａ：對照組；Ｂ：異位組；Ｃ：在位組。圖１各組間質(zhì)細(xì)胞傳代后生長形態(tài)Ａ：波形蛋白組；Ｂ：角蛋白組；Ｃ：空白組。圖２各組細(xì)胞化學(xué)免疫鑒定結(jié)果２０８５重慶醫(yī)學(xué)２０１５年５月第４４卷第１５期
【作者單位】： 江西省婦幼保健院;
【基金】：江西省自然科學(xué)基金資助項目(2012BAB205011)
【分類號】：R711.71

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2538377